馬令法,何淑玲,南吉斌,楊廣環(huán)
(甘肅民族師范學院,甘肅 合作 747000)
近年來工廠化栽培食用菌的飛速發(fā)展,加快了杏鮑菇產(chǎn)量的增長,然而菌絲是食用菌栽培成功的基礎(chǔ)[1],在適宜的光照、溫度、濕度、pH值等因素影響下,杏鮑菇才能不斷長好,再配以科學的管理模式,才能獲得穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn)的子實體。國內(nèi)外很多學者對工廠化栽培杏鮑菇技術(shù)進行了探索,通過菇房設(shè)計、菌種制作、栽培袋制作以及栽培管理等措施來提高產(chǎn)量[2-3]。關(guān)于微量元素對杏鮑菇生長影響的研究較少。本研究通過在培養(yǎng)基中添加不同濃度微量元素(Zn2+、Mg2+、B3+),比較杏鮑菇菌絲生長情況,以探明微量元素對杏鮑菇菌絲生長的影響,為杏鮑菇生產(chǎn)提供參考。
1.1.1 供試菌株
試驗所用杏鮑菇的菌株均購自安徽省六安市金土地農(nóng)業(yè)科普示范園,分別是:杏鮑菇1號、川杏鮑菇2號和川杏鮑菇3號。
1.1.2 試驗藥劑
試驗所用藥劑及其來源具體見表1。
表1 試驗藥劑及其來源
1.1.3 培養(yǎng)基
試驗用PDA培養(yǎng)基按常規(guī)配制,為促進菌絲生長,加入產(chǎn)酶改良培養(yǎng)劑,配方如下:(1 L)葡萄糖10.0 g、KH2PO42.0 g、VB110.0 mg。
1.2.1 試驗設(shè)計
分別以0(CK)、10、50、100、500、1 000 μmol/L的ZnSO4或MgSO4或H3BO3作為主處理,以3個杏鮑菇菌株為副處理,共計3×6×3=54個處理,每個處理設(shè)10次重復。分別將不同濃度微量元素加入改良后的培養(yǎng)基中,120 ℃高壓滅菌2 h。
1.2.2 接種培養(yǎng)
在超凈工作臺上將供試菌株分別接種于改良后的培養(yǎng)基(所用培養(yǎng)皿直徑90 mm、培養(yǎng)基定量20 mL),25 ℃恒溫暗培養(yǎng)9 d。然后活化培養(yǎng)菌株,用5 mm打孔器打孔(在菌落周圍打孔),菌絲面朝上,25 ℃恒溫條件下暗培養(yǎng)9 d。
1.2.3 菌絲生長速度測定
采用劃線法,菌種接種培養(yǎng)后第3天在培養(yǎng)基上劃初始線,接種后第8天統(tǒng)一劃終止線,第9天結(jié)束試驗(經(jīng)前期預試驗發(fā)現(xiàn),第9天后菌絲生長不明顯,以后逐步老化,故結(jié)束試驗)。
菌絲長勢評分標準[4]:綜合比較菌絲,最好的(菌絲稠密、粗壯)為4,其次(菌絲不稠密、不太粗壯)為3,再次(菌絲稀疏、弱)為2,最差的(菌絲極稀疏、極弱)為1。
1.2.4 數(shù)據(jù)分析
采用DPS 7.05軟件進行數(shù)據(jù)處理與分析。
2.1.1 鋅離子對菌絲生長速度的影響
不同鋅離子濃度處理下3種杏鮑菇菌絲生長速度變化的趨勢見圖1,在改良后的培養(yǎng)基中添加10~100 μmol/L ZnSO4時,對3個杏鮑菇菌株的菌絲生長速度都表現(xiàn)出一定的促進作用,其中杏鮑菇1號在添加濃度為50 μmol/L時,菌絲生長速度促進效果最明顯,菌絲生長速度0.63 cm/d,比CK提高了85.29%;對川杏鮑菇2號的最佳促進濃度為100 μmol/L,菌絲生長速度為0.51 cm/d,比CK提高45.71%;對川杏鮑菇3號最佳促進濃度也為50 μmol/L,菌絲生長速度為0.59 cm/d,比CK提高68.57%。
圖1 鋅離子對杏鮑菇菌絲生長的影響
2.1.2 鋅離子對菌絲長勢的影響
供試的菌株在添加不同濃度鋅離子處理下長勢不同,其中在添加50 μmol/L時菌絲的長勢差異最大(表2),綜合比較3個菌株,杏鮑菇1號的菌絲長勢旺盛,菌絲稠密且粗壯;長勢較差為川杏鮑菇3號,菌絲不夠稠密,也不太粗壯;川杏鮑菇2號處于中間狀態(tài)。從菌絲生長指數(shù)來分析,杏鮑菇1號的菌絲生長指數(shù)是川杏鮑菇2號的1.23倍、是川杏鮑菇3號的1.42倍,與后兩者之間差異顯著。在鋅離子的其他濃度下,菌絲長勢差異不顯著(P>0.05)。
表2 50 μmol/L鋅離子對菌絲長勢的影響
圖2 鎂離子對杏鮑菇菌絲生長的影響
圖3 硼離子對杏鮑菇菌絲生長的影響
2.2.1 鎂離子對菌絲生長速度的影響
不同鎂離子濃度處理下3種杏鮑菇的菌絲生長速度見圖2。鎂離子對3個菌株的生長速度影響均表現(xiàn)為低濃度促進,高濃度抑制。在培養(yǎng)基中添加10~50 μmol/L MgSO4時,杏鮑菇1號菌絲生長最好,最佳促進生長濃度為50 μmol/L,菌絲生長速度達到0.51 cm/d,比CK提高45.72%,50~1 000 μmol/L則抑制菌絲的生長速度。同樣,川杏鮑菇2號和川杏鮑菇3號在添加10~50 μmol/L MgSO4時也表現(xiàn)出菌絲生長速度加快,而在高于50 μmol/L濃度范圍內(nèi)則抑制了菌絲生長;當最佳促進濃度為50 μmol/L時,比對照分別提高17.14%和43.33%。
2.2.2 鎂離子對菌絲長勢的影響
供試3個菌株在添加不同濃度鎂離子處理下生長趨勢大致相同(表3),其中杏鮑菇1號和川杏鮑菇2號菌絲的長勢在50 μmol/L時差異不大,二者和川杏鮑菇3號比較表現(xiàn)出顯著差異。杏鮑菇1號的菌絲長勢旺盛,菌絲濃密且粗壯;長勢較差的為川杏鮑菇3號,在菌絲濃密、粗壯程度方面都不如其他兩者;川杏鮑菇2號處于中間狀態(tài)。從菌絲生長指數(shù)上分析,川杏鮑菇3號和杏鮑菇1號、川杏鮑菇2號差異顯著,具有生物學統(tǒng)計意義,但杏鮑菇1號和川杏鮑菇2號之間差異不顯著,說明鎂離子對這2個菌株的影響不大,但具有促進作用。鎂離子50 μmol/L以外的濃度處理下,菌絲長勢差異不顯著。
表3 50 μmol/L鎂離子對菌絲長勢的影響
2.3.1 硼離子對菌絲生長速度的影響
不同硼離子濃度處理下3種杏鮑菇的菌絲生長速度趨勢見圖3。硼離子濃度對3個菌株生長速度的影響表現(xiàn)與鎂離子有相似之處,即為低濃度促進,高濃度抑制。在培養(yǎng)基中添加10~100 μmol/L硼酸時促進了杏鮑菇1號的菌絲生長,最佳促進濃度為100 μmol/L,生長速度達到0.49 cm/d,比對照提高96.00%,添加濃度高于100 μmol/L時抑制了菌絲的生長速度。川杏鮑菇2號和川杏鮑菇3號表現(xiàn)在10~50 μmol/L時促進了菌絲生長速度,在硼離子濃度高于50 μmol/L時抑制川杏鮑菇2號和川杏鮑菇3號的菌絲生長速度。
2.3.2 硼離子對菌絲長勢的影響
3個菌株在不同的硼離子濃度下生長趨勢相似(表4),在50 μmol/L時,杏鮑菇1號和川杏鮑菇3號菌絲的長勢差異不大,川杏鮑菇3號的菌絲長勢較旺盛,菌絲不稠密但不太粗壯,表現(xiàn)出較佳的特性;長勢最差的為川杏鮑菇2號,在菌絲濃密、粗壯程度方面都不如其他二者。通過對三者的菌絲生長指數(shù)結(jié)果分析,結(jié)果表明:川杏鮑菇2號最小,與其他菌株之間差異顯著。50 μmol/L以外的濃度處理同樣差異不顯著。
表4 50 μmol/L硼離子對菌絲長勢的影響
應(yīng)用杏鮑菇3個菌株(杏鮑菇1號、川杏鮑菇2號、川杏鮑菇3號)在改良后培養(yǎng)基上添加鋅、鎂、硼離子研究其對杏鮑菇菌絲生長速度的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn),培養(yǎng)基中添加10~100 μmol/L的ZnSO4時,對杏鮑菇3個菌株的菌絲生長速度都有促進作用,最佳促進濃度為50 μmol/L,菌絲生長速度比對照分別提高85.29%、45.71%和68.57%;在培養(yǎng)基中添加10~50 μmol/L MgSO4時,杏鮑菇1號菌絲生長最好,最佳促進生長濃度為50 μmo/L,50~1 000 μmol/L處理則抑制了菌絲的生長速度。硼離子濃度對3個菌株生長速度的影響表現(xiàn)與鎂離子有相似之處,即為低濃度促進,高濃度抑制??赡茉蚴遣煌男吁U菇菌株對鋅、鎂的敏感性不同。
鋅、鎂、硼能促進菌絲生長速度的原因可能是促進了相關(guān)酶的活性[5],如過氧化物酶和漆酶;但是濃度過大,會對菌絲細胞造成毒害。雖然本研究在驗證鋅離子對杏鮑菇菌絲生長速度的影響時并沒有觀察到對菌絲生長速度抑制的現(xiàn)象,可能的原因是杏鮑菇對鋅離子的耐性比較強,而本研究所采用的濃度梯度還沒有對杏鮑菇菌絲造成傷害。而鋅離子濃度大于500 μmol/L時,菌絲生長速度有所下降,說明鋅離子大于此濃度時,對杏鮑菇菌絲已經(jīng)造成傷害。
Niess等[6]的研究發(fā)現(xiàn),鎂可以促進糙皮側(cè)耳菌絲生長速度。本研究結(jié)果表明,低濃度的鎂離子對菌絲生長都起促進作用,高濃度則抑制菌絲生長速度,與Hammel[7]關(guān)于香菇的研究結(jié)果相似,在淀粉-麥芽糖培養(yǎng)基中添加1.3 μmol/L MgSO4時,菌絲生長速度降低了50%,MgSO4濃度達到1.5 μmol/L時菌絲幾乎不生長。謝必峰等[8]通過試驗發(fā)現(xiàn),鋅對香菇、金針菇、風尾菇菌絲生長都表現(xiàn)出促進作用,但是鎂對不同的菌株菌絲生長速度影響不一樣,發(fā)現(xiàn)20、100、200 mg/L MgSO4處理對3個菌株的生長速度都表現(xiàn)促進作用,而有的菌株則在低濃度時表現(xiàn)出促進作用,高濃度時則抑制菌絲生長速度,這與本研究結(jié)果相似。
關(guān)于在栽培料中添加微量元素對杏鮑菇子實體生長影響的研究,有待于在下一步工作中開展。