柴方紅， 孫興忠， 李 航， 謝素珠， 張賀洋 賈立軍*

(1.吉林省動物疫病預(yù)防控制中心 吉林 長春 130000；2.白城市動物疫病預(yù)防控制中心 吉林 白城 137000；3.延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院動物醫(yī)學(xué)系 吉林 延吉 133000)

新孢子蟲病(Neosporiasis) 是由犬新孢子蟲(Neosporacaninum) 寄生于犬、牛、羊等多種動物細(xì)胞內(nèi)而引起的一種原蟲病[1]。該病對牛的危害最為嚴(yán)重，能夠感染各種奶牛、肉牛和黃牛，主要引起孕畜流產(chǎn)或死胎以及新生兒運(yùn)動神經(jīng)障礙等，從而降低牛的經(jīng)濟(jì)價值。新孢子蟲病呈世界性分布，美、英、澳、日等30多個國家都有發(fā)生，嚴(yán)重危害養(yǎng)牛業(yè)的健康發(fā)展[2]。新孢子蟲病在我國的新疆、青海、河北、山東、北京、吉林、黑龍江等多個省、市、自治區(qū)都有報道[3-5]。血清學(xué)調(diào)查表明，新疆奶牛抗體陽性率10.3%、牦牛18.8%，青海黃牛15.84%，北京奶牛26.67%，上海奶牛5.08%，河南奶牛16.88%，河北奶牛37.0%，內(nèi)蒙古奶牛3.3%，山東奶牛17.0%、吉林黃牛22.4%[6-7]。近年來，新孢子蟲病的流行區(qū)域逐漸擴(kuò)大，已給養(yǎng)牛業(yè)發(fā)展造成了嚴(yán)重影響。Reichel等統(tǒng)計顯示，每年因犬新孢子蟲感染或流產(chǎn)所造成的全球經(jīng)濟(jì)損失最低為12.98億美元，最高達(dá)23.8億美元[2]。為了解吉林省西部地區(qū)牛新孢子蟲病的流行情況，試驗首次對吉林省西部地區(qū)洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)及乾安縣等5個縣市區(qū)進(jìn)行牛新孢子蟲病的抗體檢測，以期為該病的防控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清樣本

208份牛血清樣本于2016年采自吉林省西部地區(qū)白城市所轄的洮南市、洮北區(qū)、通榆縣，以及松原市所轄的寧江區(qū)和乾安縣等5個縣市區(qū)養(yǎng)牛場。無菌分離血清，于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑盒與藥品試劑

牛血清犬新孢子蟲ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司；其他藥品試劑均為國產(chǎn)分析純級。

1.3 血清樣本檢測

按照試劑盒說明書對采自吉林省西部地區(qū)洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)及乾安縣等5個縣市區(qū)的208份牛血清樣本進(jìn)行新孢子蟲病抗體檢測。

1.4 統(tǒng)計分析

應(yīng)用GraphPad Prism軟件，對檢測結(jié)果進(jìn)行不同地區(qū)、不同飼養(yǎng)方式、不同品種、不同性別及不同年齡段的統(tǒng)計學(xué)方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地區(qū)的牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，吉林省西部地區(qū)洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)及乾安縣等地牛新孢子蟲抗體陽性率分別為18.75%、19.51%、12.50%、14.29%和13.64%(表1)，表明吉林省西部地區(qū)洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)和乾安縣均為牛新孢子蟲病的流行地區(qū)，其中，洮南市和洮北區(qū)抗體陽性率較高。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，通榆縣與洮北區(qū)之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)，而其他地區(qū)之間抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)。

表1 不同地區(qū)牛新孢子蟲病感染情況

2.2 不同飼養(yǎng)方式的牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，在208份牛血清樣本中，放養(yǎng)牛的陽性率為19.01%，圈養(yǎng)牛的陽性率為10.34%。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，放養(yǎng)牛與圈養(yǎng)牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)(表2)。

表2 不同飼養(yǎng)方式牛新孢子蟲病感染情況Table 2 The situation of the prevalence of bovine neosporosis infections between grazing and no grazing

2.3 不同類別牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，在208份牛血清樣本中，黃牛的陽性率為14.10%，肉牛的陽性率為16.15%。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，黃牛與肉牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)(表3)。

表3 不同類別牛新孢子蟲病感染情況Table 3 The situation of the prevalence of bovine neosporosis infections of different category

2.4 不同性別的牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，在208份牛血清樣本中，公牛的陽性率為14.53%，母牛的陽性率為16.48%。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，公牛與母牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)(表4)。

表4 不同性別牛新孢子蟲病感染情況

2.5 不同年齡的牛血清樣本新孢子蟲病抗體陽性率調(diào)查

經(jīng)ELISA抗體檢測，在208份牛血清樣本中，1～3歲牛的陽性率為13.29%，4～6歲牛陽性率為20.00%。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，1～3歲牛和4～6歲牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)(表5)。

表5 不同年齡牛新孢子蟲病感染情況

3 討論與結(jié)論

2006年丁德等對吉林省的梅河、舒蘭、琿春、雙陽地區(qū)黃牛進(jìn)行了新孢子蟲病調(diào)查，其抗體陽性率最高，為16.67%[8]。2015年李男禮等對吉林省白山地區(qū)的長白縣、靖宇縣、撫松縣、江源區(qū)、渾江區(qū)等5個縣區(qū)的黃牛和奶牛進(jìn)行了新孢子蟲病調(diào)查，其檢測樣本的總體陽性率為35.8%，顯著高于丁德等檢測地區(qū)抗體陽性率[9]。2017年張賀洋等對吉林省梅河、松原、長春、吉林和延邊等5個地區(qū)的黃牛和奶牛血清樣本進(jìn)行了檢測，總體陽性率為21.24%[10]。本試驗對吉林省西部地區(qū)的洮南市、洮北區(qū)、通榆縣、寧江區(qū)和乾安縣等5個縣市區(qū)共計208份牛血清樣本進(jìn)行了牛新孢子蟲抗體檢測，總體陽性率為15.38%。證實了吉林省西部地區(qū)也是牛新孢子蟲病的流行區(qū)域，其抗體陽性率顯著低于前期吉林省其他地區(qū)的調(diào)查結(jié)果。

通過對208份牛血清樣本的牛新孢子蟲抗體檢測，并對其不同地區(qū)、不同飼養(yǎng)方式、不同類別、不同性別及不同年齡段的統(tǒng)計學(xué)分析表明，不同地區(qū)之間通榆縣與洮北區(qū)牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)，而其他地區(qū)之間差異不顯著(P>0.05)。放養(yǎng)牛和圈養(yǎng)牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)，這可能與放養(yǎng)牛有更多機(jī)會接觸被孢子化卵囊污染的飼料或飲水有關(guān)。黃牛和肉牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)；公牛與母牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異不顯著(P>0.05)，說明牛新孢子蟲病感染與牛的類別和性別無關(guān)，不同類別和性別牛均可感染。1～3歲牛和4～6歲牛之間牛新孢子病抗體陽性率差異顯著(P<0.05)，其高齡?？贵w陽性率顯著高于低齡牛，這可能與犢牛多以垂直傳播，而成年牛多以水平傳播為主有關(guān)。本試驗采集樣本的5個地區(qū)均為首次牛新孢子病抗體檢測，而且檢測牛的類別為黃牛和肉牛，并對不同性別的牛新孢子病抗體陽性率進(jìn)行了統(tǒng)計學(xué)分析，均不同于蔡光烈等對吉林省其他地區(qū)新孢子蟲病調(diào)查的報道[8-11]。

新孢子蟲的傳播方式分為水平傳播和垂直傳播。食肉動物由于吞噬了含有組織包囊的動物組織很可能被感染，草食動物也會由于采食了被孢子化卵囊污染的飼料或飲水而感染新孢子蟲。垂直傳播是新孢子蟲的主要傳播方式，新孢子蟲速殖子可以在母體懷孕期間經(jīng)胎盤垂直傳播給胎兒，造成流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎或新生胎兒帶蟲。犬和牛作為新孢子蟲的終末宿主和中間宿主，在傳播新孢子蟲的同時，也是其他寄生蟲的傳播媒介，因此新孢子蟲等寄生蟲病的防控研究越來越引起重視[12-15]。該結(jié)果為吉林省西部地區(qū)牛新孢子病防控提供了科學(xué)的流行病學(xué)資料。