液相色譜法檢測糧油農藥殘留的探討

◎ 吳欣欣

（唐山市食品藥品綜合檢驗檢測中心，河北 唐山 063000）

如今，食品安全事故層出不窮，人們越來越關注與自身生命健康安全息息相關的食品安全問題，很多國家對于食品中農藥殘留制定了越來越嚴格的標準。糧油作為與人們日常飲食息息相關的重要部分，需要建立一種更加快捷、高效、簡潔的農藥殘留檢測手段[1]。借助新型的樣品前處理技術將樣品中存在的農藥殘留進行最大程度的回收，同時利用液相色譜法對農藥殘留進行有效檢測，快速有效。隨著樣品前處理技術以及液相色譜技術的不斷提升，相信液相色譜法在糧油農藥殘留檢測過程中必然會發(fā)揮越來越重要的作用。

1 糧油農藥殘留的種類及檢測方法

在糧油作物種植過程中，為了防治病蟲害，一般會在作物生長過程中施加農藥，這些農藥不可避免地會在作物上殘留，而殘留量的多少會對人體造成不同程度的影響，因此人們對這些糧油中農藥的殘留量相當關注，在世界范圍內很多國家也在不斷加強對糧油中農藥殘留的監(jiān)督檢查，相應的檢測技術也在不斷研發(fā)。液相色譜技術作為一種便捷的檢測方式，有著較高的檢測精度，因此常用于糧油農藥殘留檢測與研究[2]。液相色譜技術是在室溫下也能進行相關的檢測分析，與氣相色譜法相比，能夠有效避免費揮發(fā)性以及熱不穩(wěn)定性農藥出現高溫分解現象，但需要注意的是，由于目前應用的農藥中只有少部分存在天然熒光，因此液相色譜技術中分析殘留物的檢測器檢測效果并不夠靈敏。一般來說，能夠借助液相色譜技術進行分析檢測農藥主要包括氨基甲酸酯類、合成擬除蟲菊酯、有機磷類等。

1.1 氨基甲酸酯類

氨基甲酸酯類農藥由于藥效好，在我國應用范圍越來越廣，呋喃丹、西維因、涕滅威等藥物都屬于氨基甲酸酯類。氨基甲酸酯類農藥大多具有熱不穩(wěn)定的特性，氣相色譜檢測技術并不適合用來進行殘留檢測。通過液相色譜柱后衍生化法檢測技術來檢測氨基甲酸酯類農藥殘留，不僅有著很好的重現性，并且選擇性強，檢測結果的靈敏度較高。也正是因為這些優(yōu)勢，在世界衛(wèi)生組織、聯合國糧農組織等國際組織以及發(fā)達國家中都將液相色譜技術作為檢測氨基甲酸酯類農藥殘留的標準檢測方法[3]。

液相色譜檢測技術主要是利用當氨基甲酸酯類農藥處于堿性條件下時會發(fā)生水解反應，生成甲胺，而甲胺在與衍生化試劑鄰苯二甲醛、巰基乙醇發(fā)生反應后能夠產生強熒光物質的原理，借助熒光檢測器來檢測。在檢測過程中，無論是通過液相色譜柱后衍生系統(tǒng)還是熒光檢測器檢測，待測成分都會保持自身的穩(wěn)定性，加上采取的是定量環(huán)進樣，具有很好的重現性。熒光檢測器在檢測熒光物質時具有一定的選擇性，大大減少了樣品中存在的雜質干擾，保持了比較好的分離度，能夠更靈敏的進行檢測，確保檢測結果的可信性。

1.2 合成擬除蟲菊酯類

合成擬除蟲菊酯類農藥是一種模擬天然除蟲菊酯化學結構的合成農藥，不僅對很多種害蟲有效，并且毒性低，殘留量也比較小，是當前農業(yè)種植中一種比較理想化的農藥產品，敵殺死、氯氰菊酯等都屬于合成擬除蟲菊酯類農藥。借助液相色譜技術檢測合成擬除蟲菊酯類農藥主要就是利用液相色譜技術能夠對具有高沸點、熱穩(wěn)定性比較差等具有大質量分子與極性的農藥進行檢測特性開展的。一般在合成擬除蟲菊酯中都存在一個環(huán)丙烷，這種環(huán)狀結構使得其自身不僅具備有幾何與光學的異構體，同時還存在順反異構體。整個檢測過程包含有樣品制備與前處理、光化學衍生器衍生、熒光檢測器檢測3個主要環(huán)節(jié)[4]。

1.3 有機磷類農藥

雖然有機磷類農藥大多具有高毒性或者中等毒性，但當前卻在我國使用最為廣泛，敵敵畏、敵百蟲、硫磷、甲拌磷等都屬于有機磷類農藥。一般在檢測有機磷類農藥時主要采用的是氣相色譜法，與液相色譜法相比，氣相色譜法在檢測農藥含量時有著更高的靈敏度，但對于熱不穩(wěn)定特性的農藥，液相色譜法有著更高的準確度，同時還不會存在實驗用品與時間浪費的問題[5]。

利用液相色譜檢測法檢測有機磷類農藥不僅更加直接、快速，并且對于低揮發(fā)性、熱不穩(wěn)定性以及強極性等農藥來說有著更為廣泛的實用性，是檢測有機磷類農藥時的一種重要方法。目前使用的大多數有機磷類農藥都已經形成了高效液相色譜檢測方法。具體檢測有機磷類農藥殘留過程重要包括樣品前處理以及液相色譜外表法兩個環(huán)節(jié)。

2 液相色譜法在檢測糧油農藥殘留的應用

2.1 糧油產品的前處理技術

2.1.1 傳統(tǒng)的前處理技術

農藥殘留樣品前處理技術主要包括提取與凈化兩個環(huán)節(jié)，可以根據農藥的具體特性選擇振蕩法、索式抽提法或者超聲波提取法。由于農藥殘留檢測具有一定的復雜性，因此完成提取后還需要做好雜質的處理工作，一般都是通過填充活性炭與氧化鋁的吸附柱層析法來進行。

2.1.2 前處理技術的發(fā)展

隨著技術的不斷發(fā)展，前處理技術也得到一定程度的發(fā)展，超臨界流體萃取技術與固相微萃取技術就是當前應用比較廣泛的前處理新技術。

2.2 高效液相色譜法檢測糧油產品中殘留

研究人員通過對樣品進行固相萃取技術進行前處理，結合液相色譜法完成植物油中克百威與甲萘威殘留檢測。借助正己烷對準備好的樣品進行溶解后利用乙腈完成萃取，通過旋轉操作使得樣品中水分蒸發(fā)濃縮近干。將甲醇溶解后上樣到SPE-C18小柱，利用90%甲醇溶液對樣品進行洗脫，將洗脫液收集起來用濾膜進行過濾后，取20μL上樣到色譜柱上進行分析，本次檢測中選用的色譜柱時由Waters公司專門氨基甲酸酯類殺蟲劑設計的Carbmate。檢測過程中保持流動相穩(wěn)定在V（乙腈）∶V（水）=68∶32的狀態(tài)，波長280 nm。檢測結果見圖1，當線性范圍為0.05～0.5 μg/mL時，這種方法能夠實現菜籽油中甲萘威回收率達到89.7%，其中存在的相對標準偏差為3.9%，克百威的回收率為90.3%，存在的相對標準偏差為4.5%。而在對大豆油進行檢測時甲萘威回收率達到98.9%，相對標準偏差為4.8%，克西威回收率為92.4%，相對標準偏差為4.6%。分析數據可以發(fā)現，這種檢測方式能夠對糧油中存在的農藥殘留進行高效率的回收，并且實驗的精密度也保持在一定的水平之上。

圖1 氨基甲酸酯農藥混合標準溶液色譜圖

3 結語

農藥對于農作物病蟲害的防治有著十分重要的意義，但農藥使用后在農作物上出現的農藥殘留卻會對人體健康甚至生命造成威脅，針對糧油中存在的農藥殘留檢測技術開展相應的研究具有很重要價值。液相色譜技術在檢測糧油農藥殘留中作用明顯，需要不斷在實踐中進行改進，確保更好地為農作物殘留檢測服務。