范東旭 薛金枝 韋利 孫瑤 程明勛 金松

【摘要】通過研究血管性血友病因子（vWF）與凝血酶敏感蛋白-1（TSP-1）在深靜脈血栓形成的作用，間接證明血小板在靜脈血栓栓塞（VTE）中的積極作用，vWF及TSP-1的作用位點(diǎn)將可能成為新的抗血栓藥物作用靶點(diǎn)，為臨床治療提供新的方向。

【關(guān)鍵詞】靜脈血栓栓塞癥；深靜脈血栓形成；vWF；TSP-1；血小板

【中圖分類號(hào)】R285.5 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】ISSN.2095-6681.2018.15..02

全球VTE發(fā)病率逐年增加，將成為死亡和致殘的主要疾病之一[1]；我國已步入老齡化社會(huì)，對(duì)深靜脈血栓形成的早期預(yù)防、及時(shí)治療引起社會(huì)關(guān)注。現(xiàn)關(guān)于VTE發(fā)病機(jī)制及其相關(guān)參與因子尚待進(jìn)一步研究，但眾多文獻(xiàn)已提及vWF、TSP-1及血小板與血栓形成之間的關(guān)系十分緊密。

1 VTE的概述

靜脈血栓栓塞（VTE）可分為兩類：深靜脈血栓形成（DVT）及肺動(dòng)脈栓塞（PE）[2]。Yuk Law[3]所發(fā)表的中國人群VTE的流行病學(xué)研究中，DVT的發(fā)病率從2000～2001年的17.1人/10萬人增至2010～2011年的30.0人/10萬人；PE的發(fā)病率從2000～2001年的3.9人/10萬人增加到2010～2011年的11.7人/10萬人；DVT和PE相關(guān)的死亡率分別由7.3%增至20.3%、23.8%增至30.7%。韓國的調(diào)查示：2011年的DVT發(fā)病率為5.3人/10萬人；PE的發(fā)病率為7.0人/10萬人。

VTE的高危因素[4]，包括：i癌癥；ii急性內(nèi)科疾?。盒募」Ｈ?，急性呼吸、循環(huán)衰竭和急性感染等等；iii手術(shù)；iv外傷：腿部骨折：80%；脊柱損傷：62%；骨盆：61%；v有深靜脈血栓形成史；vi不動(dòng)：包括長期的臥床、下肢制動(dòng)、長途旅行等；vii高齡：年齡> 85歲時(shí)達(dá)到峰值。viii吸煙；ix血液的高凝狀態(tài)；x其他：肥胖、口服避孕藥、雌激素替代治療等。

VTE預(yù)防包括一級(jí)預(yù)防和二級(jí)預(yù)防：一級(jí)預(yù)防可通過兩種方式的組合來實(shí)現(xiàn)[5]：（1）物理（即非藥理學(xué)）方法：包括早期行走，漸變壓縮襪等；（2）抗凝劑（即藥理學(xué)方法）：包括普通肝素，維生素K拮抗劑，新型口服抗凝藥物。二級(jí)預(yù)防即確診VTE后的治療，有效抗凝即能減少血栓復(fù)發(fā)，又能防止血栓的進(jìn)展，應(yīng)持續(xù)至少三個(gè)月，或六個(gè)月，或更長時(shí)間[6]。研究表明，在入院時(shí)納入VTE風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和原發(fā)性血栓預(yù)防措施可有效地減少死亡，并減少非致死性VTE的再入院率[7]。

2 vWF的概述

vWF是多聚體糖蛋白，在止血和血栓形成中起重要作用。該蛋白由非常大的基因組（180 kb，52個(gè)外顯子）編碼，位于12號(hào)染色體短臂末端區(qū)域內(nèi)，vWF前原由22個(gè)氨基酸的信號(hào)肽、741個(gè)氨基酸的前肽和2050個(gè)氨基酸的蛋白組成，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體中經(jīng)歷成熟過程[8]。作為對(duì)各種刺激的響應(yīng)，vWF從內(nèi)皮細(xì)胞釋放為UL-vWF，其分子量可以達(dá)到20，000 kDa，此時(shí)UL-vWF的粘附和反應(yīng)功能最佳[9]，成熟的vWF單體蛋白，分子量約250 kDa，含有12個(gè)N-連接和10個(gè)O-連接的寡糖鏈[10]，每種vWF單體都具有纖維蛋白、GPIb、GPIIb/IIIa和Fviii的結(jié)合位點(diǎn)[8]，可進(jìn)行多向調(diào)節(jié)作用。

3 TSP-1的概述

TSPs是編碼糖蛋白的5種基因（TSP-1至TSP-5）的大家族[11]，TSP-1是其中之一，TSP-1的單體包含1152個(gè)氨基酸（180kDa），并通過半胱氨酸252和256的鏈間二硫鍵將其組裝成三聚體，每個(gè)單體包括：N-末端結(jié)構(gòu)域，寡聚化結(jié)構(gòu)域，分子量約450 kDa，由多種類型的細(xì)胞合成，包括成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、炎癥細(xì)胞、巨核細(xì)胞和血管壁基質(zhì)；血漿中TSP-1的濃度范圍為60至80 ng/mL，在強(qiáng)效激動(dòng)劑作用下可增加1000倍。其復(fù)雜的多領(lǐng)域結(jié)構(gòu)使TSP-1與許多細(xì)胞黏附受體結(jié)合，包括CD36、一些整合素、整合素相關(guān)蛋白（IAP）CD47、硫酸乙酰肝素，及其它黏附糖蛋白等，因此，TSP-1可以正面和負(fù)面調(diào)節(jié)許多細(xì)胞功能，如粘附，運(yùn)動(dòng)，增殖和細(xì)胞凋亡，參與多種生物過程中，包括血管生成，傷口愈合，動(dòng)脈粥樣硬化，止血和血栓形成[12]。

4 血小板與TSP-1、vWF之間的關(guān)系

Brill等[13]使用“敲除”vWF基因的小鼠證明vWF介導(dǎo)的血小板粘附對(duì)深靜脈血栓形成至關(guān)重要，證明TSP-1、vWF在血栓形成中血小板黏附、活化及聚集中所起的作用，以此補(bǔ)充血栓形成的病理學(xué)過程。

5 結(jié) 論

VTE是一種無癥狀性疾病，其患病率及死亡率很高；DVT的長期后遺癥是嚴(yán)重的下肢腫脹和久治不愈的潰瘍，嚴(yán)重者可致殘；PE則會(huì)迅速致命，也可無癥狀，但可導(dǎo)致長期后遺癥如心力衰竭和肺動(dòng)脈高壓。因此，深入研究VTE的病因和發(fā)病機(jī)制，針對(duì)性的早期預(yù)防，盡可能避免高危因素，可降低其發(fā)生率和死亡率，具有重要的意義。通過研究vWF及TSP-1在深靜脈血栓形成的作用位點(diǎn)將可能成為臨床治療的新方向，但是目前關(guān)于深靜脈血栓形成中血小板所起的作用研究較少，需要進(jìn)一步完善。

參考文獻(xiàn)

[1] Raskob GE Angchaisuksiri PB.lanco ANBüller HGallus AHunt BJHylek EMKakkar TLKonstantinides SVMcCumber MOzaki YWendelboe AWeitz JI.Thrombosis： a major contributor to global disease burden.Seminars in thrombosis and hemostasis 2014 Oct；40（7）：724-35.

[2] D'Alesandro M.Focusing on lower extremity DVT.Nursing 2016 Apr；46 （4）： 28-35；quiz 35-6.

[3] Yuk Law，Yiu Che Chan，Stephen W.K.Cheng.Epidemiological updates of venous thromboembolism in a Chinese population.Asian Journal of Surgery （2018） 41，176-182.

[4] Gustav Schellack，Tumelo Modau，Natalie Schellack.Clinical overview of venous thromboembolism.South African Family Practice 2016；58（1）：39-45.

[5] Catterick D，Hunt BJ.Impact of the national venous thromboembolism risk assessment tool in secondary care in England： retrospective population-based database study.Blood Coagul Fibrinolysis.2014；25：571-576.

[6] Burgazli KM，Atmaca N，Mericliler M，et al.Deep vein thrombosis andnovel oral anticoagulants： a clinical review.Eur Rev Med Pharmacol Sci.2013；17（23）：3123-3131.

[7] Suwanabol PA，Hoch JR.Venous thromboembolic disease.Surg Clin N Am.2013；93（4）：983-995.

[8] Cramer EM，Meyer D，Le Menn R，Breton-Gorius J： Eccentric localization ofvon willebrand factor in an internal structure of platelet alpha-granuleresembling that of weibel-palade bodies.Blood 1985，66（3）：710-713.

[9] Tsai HM，Nagel RL，Hatcher VB，Sussman II.Multimeric composition of endothelial cell-derived von Willebrand factor.Blood 1989；73：2074-6.

[10] Titani K，Kumar S，Takio K，Ericsson LH，Wade RD，Ashida K，Walsh KA，Chopek MW，Sadler JE，F(xiàn)ujikawa K： Amino acid sequence of humanvon willebrand factor.Biochemistry 1986，25（11）：3171-3184.

[11] Prem Prakash，Paresh P.Kulkarni，and Anil K.Chauhan.Thrombospondin 1 requires von Willebrand factor to modulate arterial thrombosis in mice.Blood.2015；125（2）：399-406.

[12] Arnaud Bonnefoy and Marc F.Hoylaerts，Thrombospondin-1 in Von Willebrand Factor Function.Current Drug Targets，2008，9，822-832.

[13] Arnaud Bonnefoy，Kim Daenens，Hendrik B.Thrombospondin-1 controlsvascularplateletrecruitmentandthrombusadherenceinmicebyprotecting（sub）endothelial vWFfromcleavagebyADAMTS13.Blood.2006；107：955-964.

本文編輯：王雨辰