羅康石 張永成 周寧聰 孫曉紅 張立果 張勇 劉劍鋒 閆鑫鵬 薩仁格日勒 李改蘭

（1，內(nèi)蒙古烏蘭察布市家畜改良工作站 012000；2，內(nèi)蒙古烏蘭察布市農(nóng)牧業(yè)科學(xué)研究院012000）

烏蘭察布市現(xiàn)行的綿肉羊同期發(fā)情人工授精工作中，精液稀釋比例多數(shù)在1∶3以內(nèi)，偶爾稀釋倍數(shù)超過1∶3～1∶5倍，配種受胎率沒有相關(guān)數(shù)據(jù)。輸精次數(shù)在拔栓注射PMSG后，36、48、60h各輸精1次，共輸精3次，秋季配種情期受胎率平均在70%左右。

優(yōu)化改進(jìn)肉羊同期發(fā)情人工授精技術(shù)試驗(yàn)—精液稀釋比例從1∶3提高到1∶5，輸精次數(shù)從3次減少到2次；使用高滲稀釋液稀釋比例到1∶10。通過本次試驗(yàn)，以求驗(yàn)證精液不同稀釋比例、不同輸精次數(shù)對(duì)受胎率的影響，驗(yàn)證使用高滲液大倍釋精液的可行性。為此，2017年9月11～27日在四子王旗上泰肉羊養(yǎng)殖合作社開展了此項(xiàng)試驗(yàn)。

1 試驗(yàn)方法

1.1 稀釋液

1.1.1 普通稀釋液

檸檬酸鈉、葡萄糖、抗生素。

1.1.2 高滲低溫大倍稀釋保存液

檸檬酸鈉、絡(luò)合物、無機(jī)鹽類、含氮化合物等。

1.2 試驗(yàn)羊群組織

隨機(jī)挑選杜蒙母羊 （烏蘭察布市正在培養(yǎng)的肉羊品種）350只，分為2組。普通稀釋液組 （200只），高滲稀釋液組（150只）。組間比較不同稀釋液的差異，組內(nèi)比較不同稀釋倍數(shù)、不同輸精次數(shù)的差異 （見表1）。

表1 精液不同稀釋倍數(shù)不同輸精次數(shù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3 同期發(fā)情

采用陰道海綿栓+血促激素 （PMSG）同期發(fā)情方法，兩組放栓間隔1d。

1.4 輸精時(shí)間

拔栓注射血促激素36h后開始輸精。不試情，全部配種。發(fā)情率按95%計(jì)算。

1.5 輸精劑量

輸精劑量，每次0.15ml/只。

1.6 記錄

記錄配種母羊耳號(hào)，根據(jù)產(chǎn)羔記錄核對(duì)母羊組別。

2 試驗(yàn)結(jié)果

受胎比例的試驗(yàn)結(jié)果，見表2。

表2 受胎率統(tǒng)計(jì)表

（1）普通稀釋液組內(nèi)比較2次輸精和3次輸精對(duì)受胎率的影響差異不顯著 （ ＞0.05）。

普通稀釋液1∶3和1∶5稀釋精液輸精2次，受胎率分別為67.39%和50.98%；輸精3次受胎率分別為68.29%和52.27%。結(jié)果表明，輸精2次和3次受胎率差異不顯著 （ ＞0.05）。

（2）普通稀釋液不同比例稀釋精液配種，受胎率差異極顯著 （ ＜0.01）。1∶3和 1∶5稀釋精液輸精2次受胎率分別為67.39%和50.98%，輸精3次，受胎率分別為68.29%和52.27%。表明1∶3和1∶5稀釋精液配種，受胎率差異極顯著 （ ＜0.01）。

（3）高滲稀釋液和普通稀釋液稀釋精液配種，受胎率差異不顯著 （ ＞0.05）。 普通稀釋液1∶3、1∶5稀釋精液輸精2次，受胎率分別為67.39%和50.98%；用高滲稀釋液同樣的稀釋比例、輸精次數(shù)，受胎率分別為67.50%和48.89%。表明高滲稀釋液和常規(guī)稀釋液對(duì)受胎率無顯著影響 （ ＞0.05）。

3 結(jié)論與討論

（1）采用陰道海綿栓+血促激素 （PMSG）同期發(fā)情人工授精工作中，據(jù)本次試驗(yàn)，不論是常規(guī)稀釋液還是高滲稀釋液，精液的稀釋倍數(shù)都不宜超過3倍，否則受胎率會(huì)顯著降低。

從理論上來說，每個(gè)輸精劑量應(yīng)含有效精子數(shù)5000萬以上，配種即可達(dá)到平均的情期受胎率水平[1]。本次試驗(yàn)羊精液的密度平均為25億/ml，活力0.8，精液稀釋比例1∶5，每個(gè)輸精劑量為0.15ml，達(dá)不到理論上5000萬的有效精子數(shù)，雖然可以輸精配種，但受胎率偏低，這也驗(yàn)證了這一理論的正確性。也曾有報(bào)道，山羊精液用乳糖-葡萄糖-檸檬酸鈉稀釋液，按1∶30、1∶50稀釋精液配種，情期受胎率達(dá)到80%的良好效果[2]。綿羊精液稀釋液配方和輸精方法值得進(jìn)一步研究。

（2）常規(guī)稀釋液和高滲稀釋液采精后及時(shí)稀釋精液輸精受胎率無差異。根據(jù)烏蘭察布市農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院2017年8月在烏蘭察布市前旗華豐種養(yǎng)合作社開展的綿羊精液高滲低溫保存試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高滲稀釋液可以延長(zhǎng)精子存活時(shí)間，在0～8℃低溫條件下保存， 1∶3∶、 1∶5、 1∶10 稀釋后的精液 3d 后的活力仍可達(dá)到0.6～0.7。本次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采精后及時(shí)稀釋、輸精，受胎率和使用常規(guī)稀釋液沒有明顯差別。在今后生產(chǎn)實(shí)踐中，將繼續(xù)試驗(yàn)觀察高滲低溫保存稀釋液，稀釋精液保存1～3d后輸精受胎率的效果，其意義在于少數(shù)優(yōu)秀種公羊可以異地采精，遠(yuǎn)距離輸精，也可以調(diào)劑不同時(shí)間點(diǎn)采精量不足的困惑。同時(shí)可以避免種公羊來回調(diào)運(yùn)帶來不便和疾病傳播的機(jī)會(huì)。

（3）精液稀釋比例相同的情況下，2次輸精和3次輸精受胎率無顯著差異，適宜輸精時(shí)間為注射血促激素后36、48h各輸精1次。