李志毅

【摘 要】目的：比較不同時(shí)段、不同性狀痰標(biāo)本涂片，檢出抗酸桿菌陽性率，探討痰標(biāo)本的質(zhì)量、標(biāo)本采樣時(shí)間與抗酸桿菌檢出結(jié)果的關(guān)系。方法：采用痰抗酸桿菌直接涂片檢查，齊-尼抗酸染色，統(tǒng)計(jì)分析不同采樣時(shí)間和不同性狀痰標(biāo)本的涂片檢查的陽性檢出率。結(jié)果：750份初診夜間、清晨、即時(shí)咳出的干酪痰、血痰、粘液痰、唾液標(biāo)本的涂片結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，晨痰、干酪痰檢出率最高為28%、66.2%；不同性狀，不同時(shí)間標(biāo)本中陽性標(biāo)本的分布均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：痰標(biāo)本的質(zhì)量、標(biāo)本留取時(shí)間對痰涂片抗酸染色，陽性率有很大影響。

【關(guān)鍵詞】染色；結(jié)核；肺；痰；抗酸桿菌；涂片

【中圖分類號(hào)】R529.3 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2095-6851（2018）08--01

當(dāng)前我國結(jié)核病控制方式主要是以痰檢抗酸桿菌為主要手段的實(shí)驗(yàn)方法來發(fā)現(xiàn)傳染源，通過痰涂片鏡檢發(fā)現(xiàn)肺結(jié)核是實(shí)施 DOTS 策略的關(guān)鍵，對結(jié)核病控制工作起著重要作用。 本文對可疑肺結(jié)核就診者的不同采樣時(shí)間、不同性狀的痰標(biāo)本的陽性率進(jìn)行比較，以進(jìn)一步提高涂陽肺結(jié)核病人發(fā)現(xiàn)率。

1 資料與方法

1.1 資料來源 2017年12月-1018年2月結(jié)核門診接診的咳嗽、咳痰超過三周、胸透異常的可疑肺結(jié)核癥狀者三份痰標(biāo)本（夜間痰、晨痰、即時(shí)痰）的抗酸桿菌直接涂片檢查結(jié)果。

1.2 標(biāo)本分類

1.2.1 按照痰標(biāo)本采集時(shí)間，標(biāo)本分為三類 即時(shí)痰：化驗(yàn)時(shí)咳出的痰液；晨痰：患者晨起立即用清水漱口后，咳出的痰液；夜間痰：送檢前一天，患者晚間睡前咳出的痰液。

1.2.2 按照痰標(biāo)本性狀，將其分為四類 干酪痰：標(biāo)本外觀以黃色（或奶酪色）、膿樣、團(tuán)塊狀的肺部分泌物為主；血痰：此類標(biāo)本是因粘液痰或干酪痰標(biāo)本中混有血液而形成，顏色為褐色或深褐色、鮮紅色或伴有血絲；粘液痰：標(biāo)本外觀以白色、粘稠度較高的肺部和支氣管分泌物為主；唾液：標(biāo)本外觀以透明或半透明水樣、粘度較低的口腔分泌物為主，標(biāo)本中有時(shí)伴有氣泡。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 采用直接涂片法，挑取標(biāo)本量0.05～0.1ml

涂抹10×20mm的卵圓形痰膜。 烘干后進(jìn)行齊-尼染色（缸染法）：放置在100mL初染劑缸中進(jìn)行染色，時(shí)間為15min，然后取出使用自來水沖洗，再放置在100mL脫色劑缸中，時(shí)間為5min，取出使用自來水沖洗，再置在100mL 復(fù)染劑缸中。流水沖洗待干鏡檢，雙目光學(xué)生物顯微鏡鏡檢（目鏡10×，物鏡100×）。結(jié)果分級(jí)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)見《痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊》[1]。

1.4 質(zhì)量控制 依照中國結(jié)核病防治規(guī)劃《痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊》 、《結(jié)核病診斷細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)規(guī)程》[2]進(jìn)行涂片檢查的室內(nèi)和室間質(zhì)量控制。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 使用 Ex cel 軟件建立數(shù)據(jù)庫，SPSS11.5軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 不同性狀、不同留置時(shí)間痰標(biāo)本構(gòu)成比 750份標(biāo)本中粘液痰所占比例最高為44.2%，其次為唾液標(biāo)本為35.8%。見表1

2.2 不同性狀痰標(biāo)本的涂片檢查情況 干酪痰、血痰、粘液痰和唾液檢出率分別為66.2%、34.8%、15.0%和0.9%，干酪痰檢出率最高，唾液標(biāo)本檢出率最低（=930.464，P <0.01）。 結(jié)果見表2。

2.3 不同留置時(shí)間痰標(biāo)本的涂片檢查的陽性檢出情況 結(jié)果見表2。750份痰標(biāo)本中抗酸桿菌涂片檢查檢出陽性標(biāo)本128份，檢出率為17.00%，即時(shí)痰、夜間痰和清晨痰的檢出率分別為9.2%、14%和285%，晨痰檢出率最高（=156.069，P <0.01）。

3 討論

3.1 痰涂片抗酸染色顯微鏡鏡檢是一種技術(shù)相對簡單，容易標(biāo)準(zhǔn)化和完成操作，所需設(shè)備投入少，檢查成本低，迅速報(bào)告結(jié)果的一種方法；尤其對低收入且結(jié)核病疫情嚴(yán)重的地區(qū)或基層實(shí)驗(yàn)室，符合成本-效益原則的細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 痰標(biāo)本的留置時(shí)間、標(biāo)本質(zhì)量對痰涂片抗酸桿菌陽性率有很大影響。

3.2 本研究結(jié)果顯示，750份痰標(biāo)本的分布有明顯差異，干酪樣痰的比例中，清晨 >夜間>即時(shí)。血痰比例中，清晨>夜間 >即時(shí)，粘液痰比例中，清晨>夜間>即時(shí)，唾液中，即時(shí)>夜間>清晨；初診可疑肺結(jié)核就診者痰抗酸染色涂片陽性率17.0%，不同留取時(shí)間的痰標(biāo)本涂片陽性檢出率存在明顯差異。

3.3 在不同性狀的痰標(biāo)本中，涂片染色陽性率以干酪樣痰最高，其次為血痰、粘液痰、唾液。抗酸桿菌細(xì)胞壁中含有大量的脂質(zhì)，是四型變態(tài)反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)，可結(jié)核結(jié)節(jié)形成，產(chǎn)生干酪樣壞死。干酪樣或膿性痰來自肺內(nèi)脫落的干酪壞死組織，是抗酸桿菌較為集中的成分，來自患者呼吸道的深處，痰標(biāo)本質(zhì)量受檢驗(yàn)因素影響較小，其檢出率最高，血性痰其中一部分是干咳引起的細(xì)支氣管破裂出血，不一定是真正的病灶出血，另外血性痰也會(huì)影響染色背景，因此檢出率并沒有最高；粘液痰因混有較多的上呼吸道分泌物使其檢出率偏低；唾液可能是肺結(jié)核病人大量排菌期間，痰經(jīng)口腔排出殘留在口腔中，陽性率很低。

參考文獻(xiàn)

衛(wèi)生部疾病預(yù)防控制局 中國疾病預(yù)防控制中心.中國結(jié)核病防治規(guī)劃.痰涂片鏡檢標(biāo)準(zhǔn)化操作及質(zhì)量保證手冊[S].北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2009.

中國防癆協(xié)會(huì)基礎(chǔ)委員會(huì).結(jié)核病診斷實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)規(guī)程[M].北京：中國教育出版社，2006.