消化道惡性腫瘤患者血清腫瘤特異性生長(zhǎng)因子與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子水平檢測(cè)及意義

張家明，洪 流 *，卓少賢 ，溫 本 ，謝朝陽(yáng)

（1.廣東醫(yī)科大學(xué)附屬湛江中心醫(yī)院，廣東 湛江 524037；2.廣東醫(yī)科大學(xué)，廣東 湛江 524000）

消化道惡性腫瘤是我國(guó)最常見(jiàn)的惡性腫瘤，近年來(lái)其發(fā)病率持續(xù)升高，嚴(yán)重威脅人類身體健康及生活質(zhì)量。早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療能顯著提高惡性腫瘤患者的生存率。因此，有助于惡性腫瘤早期診斷的方法——血清腫瘤標(biāo)志物（TM）檢測(cè)顯得尤為重要。在腫瘤形成早期，腫瘤的發(fā)生發(fā)展與血管生成備受關(guān)注。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）是重要的血管生成正性調(diào)節(jié)因子；腫瘤特異性生長(zhǎng)因子（TSGF）由腫瘤細(xì)胞特異產(chǎn)生，是惡性腫瘤及周邊血管大量擴(kuò)增的物質(zhì)基礎(chǔ)，兩種TM與惡性腫瘤血管的形成密切相關(guān)[1-2]。本文主要通過(guò)檢測(cè)消化道惡性腫瘤患者治療前后血清TSGF及VEGF水平，探討其在消化道惡性腫瘤早期診斷、療效觀察及預(yù)后判斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

84例消化道惡性腫瘤患者均為2012年5月至2013年12月在廣東醫(yī)科大學(xué)附屬湛江中心醫(yī)院住院的患者（肝癌25例、胃癌21例、腸癌38例），其中男46例，女38例；年齡33～71歲，平均年齡53歲。所有患者術(shù)前均未進(jìn)行放療或化療，均排除合并有其他疾病，所有患者均經(jīng)手術(shù)和病理確診。選擇經(jīng)臨床及病理確認(rèn)的消化系統(tǒng)疾?。ㄎ改c道炎癥、潰瘍、息肉等）患者40例作為良性疾病組，另以35名健康體檢者作為正常對(duì)照組。各組患者年齡、性別比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 檢測(cè)方法

消化道惡性腫瘤患者手術(shù)前5天，手術(shù)后7天、14天各采集靜脈血3 ml，良性疾病組及正常對(duì)照組患者只采集1次空腹靜脈血3 ml，所有標(biāo)本均放置在無(wú)抗凝劑的一次性干燥試管中，室溫靜置30分鐘，離心半徑10 cm，3 000 r/min離心10分鐘，分離吸出血清1 000 μl，放置在-20℃冰箱保存?zhèn)溆?。所有?biāo)本均檢測(cè)TSGF及VEGF。采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）雙抗體夾心法檢測(cè)VEGF（試劑盒購(gòu)自深圳晶美生物工程公司），檢測(cè)步驟嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。按說(shuō)明書(shū)在貝克曼DXC800全自動(dòng)生化分析儀上設(shè)置工作參數(shù)，進(jìn)行定標(biāo)及測(cè)定TSGF。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 消化道惡性腫瘤與良性疾病組及正常對(duì)照組患者血清TSGF、VEGF水平比較（見(jiàn)表1）

84例消化道惡性腫瘤患者血清TSGF、VEGF水平顯著高于正常對(duì)照組及良性疾病組患者（P＜0.01）；良性疾病組患者血清VEGF水平與正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。良性疾病組患者血清TSGF水平高于正常對(duì)照組（P＜0.05）。

表1 不同組患者血清TSGF、VEGF水平比較（±s）

表1 不同組患者血清TSGF、VEGF水平比較（±s）

注：與正常對(duì)照組或良性疾病組比較，*P＜0.01；與正常對(duì)照組比較，#P＜0.05

組別正常對(duì)照組良性疾病組肝癌患者組胃癌患者組腸癌患者組例數(shù)35 40 25 21 38 TSGF（U/ml）50.57±5.94 54.36±7.11#80.46±12.52*82.77±13.98*83.49±13.17*VEGF（pg/ml）125.8±57.1 160.4±85.2 353.3±120.9*364.9±143.8*358.5±140.6*

2.2 惡性腫瘤患者手術(shù)前后血清TSGF、VEGF水平變化（見(jiàn)表2）

84例消化道惡性腫瘤患者經(jīng)手術(shù)治療后7天，血清TSGF、VEGF水平均比治療前明顯下降（P＜0.05）；手術(shù)后14天，患者血清TSGF、VEGF水平均比手術(shù)前顯著下降（P＜0.01）。

表2 惡性腫瘤患者手術(shù)前后血清TSGF、VEGF水平比較（±s）

表2 惡性腫瘤患者手術(shù)前后血清TSGF、VEGF水平比較（±s）

注：與手術(shù)前比較，▲P＜0.05，★P＜0.01

組別手術(shù)前手術(shù)后7天手術(shù)后14天例數(shù)84 84 84 TSGF（U/ml）82.83±13.41 78.50±9.02▲67.46±7.83★VEGF（pg/ml）359.6±137.7 310.5±111.2▲233.4±105.3★

2.3 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清TSGF、VEGF水平變化

手術(shù)治療1年后，經(jīng)跟蹤觀察發(fā)現(xiàn)，在84例消化道惡性腫瘤患者中，73例無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的TSGF、VEGF水平（53.52±6.87、161.9±77.6）與正常對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異（P＞0.05）；而11例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的TSGF、VEGF水平（83.79±15.24、380.6±151.5）明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組及正常對(duì)照組（P＜0.01）。

3 結(jié)論

3.1 早期診斷消化道惡性腫瘤的意義重大

近年來(lái)我國(guó)大腸癌、結(jié)腸癌、肝癌和胰腺癌等消化道惡性腫瘤在人群中發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，消化道惡性腫瘤占所有腫瘤發(fā)病的60%～70%，位居第一[3]，死亡率較高，且呈年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重危害人們的健康。以手術(shù)為主的綜合治療是消化道腫瘤首選的治療手段，早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷才能實(shí)現(xiàn)早期治療，提高患者的生存質(zhì)量。當(dāng)前的影像學(xué)、病理學(xué)等檢測(cè)方法確診時(shí)，往往已是惡性腫瘤的中晚期，血清生物學(xué)及免疫學(xué)方法檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物（TM）已成為消化道惡性腫瘤早期診斷的重要手段。由此可見(jiàn)，找到對(duì)早期消化道惡性腫瘤敏感且在治療過(guò)程中有明顯變化的血清TM指標(biāo)，對(duì)臨床診治疾病相當(dāng)重要。

3.2 血清VEGF水平檢測(cè)在消化道惡性腫瘤診治中的價(jià)值

VEGF又稱血管通透因子，是目前作用最強(qiáng)的促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)的細(xì)胞因子。VEGF能夠刺激體外培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生有絲分裂和遷移，促進(jìn)血管的構(gòu)建及生長(zhǎng)，也可誘導(dǎo)血管通透性增加，導(dǎo)致血管內(nèi)大分子物質(zhì)的漏出，有利于血管外基質(zhì)的形成，為血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、血管的形成提供支架，輔助血管的形成。在腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的前血管期，腫瘤細(xì)胞主要依靠彌散供應(yīng)養(yǎng)分及排泄廢物，雖然腫瘤細(xì)胞迅速增殖，但增殖與凋亡處于動(dòng)態(tài)平衡；當(dāng)腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)變成血管生成表型，凋亡明顯減少，此時(shí)血清VEGF與血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性結(jié)合，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)血管新生并維持腫瘤生長(zhǎng)。腫瘤出現(xiàn)后，為滿足其生長(zhǎng)需要，腫瘤細(xì)胞分泌大量VEGF并釋放到血液循環(huán)，導(dǎo)致血清中VEGF水平升高[4]。本研究結(jié)果顯示，消化道惡性腫瘤患者的VEGF水平顯著高于正常對(duì)照組及良性疾病組患者（P＜0.01），而良性疾病組患者血清VEGF水平與正常對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。這可能與腫瘤細(xì)胞分泌的VEGF穿過(guò)血管壁或使血管壁通透性增加有關(guān)。以手術(shù)為主的治療是消化道惡性腫瘤首選的治療手段，馬利安[5]通過(guò)手術(shù)治療結(jié)腸癌患者發(fā)現(xiàn)，術(shù)后一周患者的血清VEGF比術(shù)前明顯降低（P＜0.05），提示去除癌細(xì)胞后，VEGF含量降低，對(duì)臨床評(píng)估患者病情有一定價(jià)值。本資料結(jié)果顯示，84例消化道惡性腫瘤患者術(shù)后7天、術(shù)后14天的VEGF水平比術(shù)前明顯下降（P＜0.05或P＜0.01）；隨訪觀察1年后，11例有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的VEGF水平比73例無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者顯著升高（P＜0.01）。表明檢測(cè)血清VEGF水平對(duì)消化道惡性腫瘤患者的診斷及鑒別診斷、療效觀察和判斷預(yù)后均有重要臨床意義。

3.3血清TSGF水平檢測(cè)在消化道惡性腫瘤診治中的價(jià)值

TSGF是國(guó)際公認(rèn)的與惡性腫瘤生長(zhǎng)相關(guān)的糖類物質(zhì)和代謝物（脂蛋白、酶、氨基酸）的統(tǒng)稱，是惡性腫瘤細(xì)胞及周邊毛細(xì)血管大量擴(kuò)增的物質(zhì)基礎(chǔ)，又稱腫瘤相關(guān)物質(zhì)群。TSGF的發(fā)現(xiàn)為惡性腫瘤的診斷與治療開(kāi)拓了新的應(yīng)用領(lǐng)域，它的廣譜性、早期性與目前其他TM相比，顯示出一定的優(yōu)越性[6]。與其他常見(jiàn)TM不同的是，TSGF的檢測(cè)物在腫瘤形成早期濃度就已經(jīng)很高，且隨著病情變化出現(xiàn)明顯升高或降低[7]。向禮賢等[8]研究表明，手術(shù)前后動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)上皮性卵巢癌患者血清TSGF的變化情況，有助于判斷療效、監(jiān)測(cè)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。李小民等[9]報(bào)道，TSGF在甲狀腺癌患者血清中表達(dá)升高，在甲狀腺癌發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用，檢測(cè)血清TSGF對(duì)早期診斷及指導(dǎo)治療有一定價(jià)值。我們的研究結(jié)果顯示，84例消化道惡性腫瘤（肝癌25例、胃癌21例、腸癌38例）患者的血清TSGF水平明顯高于良性疾病組和正常對(duì)照組（P＜0.01）；良性疾病組的TSGF也明顯高于正常對(duì)照組（P＜0.05）；各惡性腫瘤TSGF水平組間比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。但良性疾病組患者經(jīng)抗炎治療后TSGF水平很快下降至接近健康者水平?？梢?jiàn)，TSGF并非惡性腫瘤特有，在健康人群和某些良性疾病患者體內(nèi)也有一過(guò)性升高，提示血清TSGF檢測(cè)有助于消化道惡性腫瘤的診斷及鑒別診斷。本資料還顯示，84例消化道惡性腫瘤患者經(jīng)手術(shù)治療7天、14天后，血清TSGF呈下降趨勢(shì)，與治療前比較明顯降低（P＜0.05或P＜0.01），表明血清TSGF水平的檢測(cè)對(duì)消化道腫瘤患者的療效觀察有重要臨床意義。隨訪觀察1年后發(fā)現(xiàn)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的11例患者血清TSGF水平明顯高于73例無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者（P＜0.01），無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者TSGF水平與正常對(duì)照組比較，無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。表明 TSGF與消化道惡性腫瘤病情程度呈明顯正相關(guān)（P＜0.01），在某種程度上可預(yù)測(cè)病情惡化程度，提示血清TSGF升高是惡性腫瘤獲得高侵襲能力的重要因素。

4 結(jié)語(yǔ)

VEGF是促血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、促血管生長(zhǎng)及增加血管通透性的主要因子，而TSGF是惡性腫瘤形成和生長(zhǎng)時(shí)促使腫瘤及周邊毛細(xì)血管大量增殖并釋放到外周血液的一類因子，兩者在消化道惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移過(guò)程中均起著重要作用。監(jiān)測(cè)患者手術(shù)前后血清VEGF及TSGF水平變化對(duì)消化道惡性腫瘤的臨床診斷、療效觀察及預(yù)后判斷有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。