苯醚威混配劑對印鼠客蚤毒效的觀察

劉 濤 漆一鳴

(1. 延安大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，陜西延安 716000;2. 貴州醫(yī)科大學(xué)生物學(xué)教研室，貴州貴陽 550004)

蚤是重要的醫(yī)學(xué)昆蟲，是鼠疫、鼠源性斑疹傷寒等疾病的重要媒介(吳厚永等，1999)。印鼠客蚤Xenopsyllacheopis(Rothschild, 1903)屬于蚤科，客蚤屬。在我國滇粵閩黃胸鼠鼠疫疫源地，主要媒介為印鼠客蚤(貴州省衛(wèi)生防疫站，2002)。因此，尋求一種殺滅印鼠客蚤的藥物對防治鼠疫的流行有重要意義。苯醚威(又名雙氧威，F(xiàn)enoxycarb)化學(xué)名稱為：乙基氨基甲酸酯，是第3代殺蟲劑，屬于非萜烯類昆蟲生長調(diào)節(jié)劑，其殺蟲作用是非神經(jīng)性的，是具有保幼激素活性的昆蟲生長調(diào)節(jié)劑。它具有安全性高、毒性低、選擇性強、殺蟲譜廣、持效長、對環(huán)境無污染，可殺滅成蟲的卵，但作用較緩慢(程暄生，1996； 姜志寬等，2001；張宏超等，2002)。氯氰菊酯毒力強、作用速度快，但蚤類對其可產(chǎn)生抗性(吳鶴松等，2005)。苯醚威與氯氰菊酯混配，其一、由于它們在結(jié)構(gòu)上的特殊性(張友軍，2003)不僅會彌補苯醚威藥效較為遲緩的缺陷和蚤類對氯氰菊酯產(chǎn)生抗性的不足，而且有可能表現(xiàn)出增效作用。其二、對成蟲和卵都有殺滅作用，增強殺蟲效果。為此，本實驗取長補短，將兩種殺蟲劑配伍，尋求最佳混配濃度，為蚤的防治提供重要的基礎(chǔ)資料(李曉東，1999)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源及獲取

印鼠客蚤大理株2002年從云南省地方病防治所引種，在貴州醫(yī)科大學(xué)蚤類飼養(yǎng)室繁殖傳代。將幼蟲飼料過20目篩，篩出的蚤繭轉(zhuǎn)入干凈試管內(nèi)，雙層綢布封口，置于養(yǎng)蚤室內(nèi)的玻璃缸內(nèi)待其羽化。

1.2 藥物梯度、對照設(shè)置及制作藥膜

氯氰菊酯原藥從貴州省疾病預(yù)防控制中心獲取，制備氯氰菊酯1 000 mg/L (丙酮為溶劑)儲備液，再稀釋儲備液得到濃度為3.12、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00 mg/L的測試液，苯醚威制備1 200 mg/L、1 400、1 600、1 800、2 000 mg/L的測試液，以空白和丙酮為對照(蔣志勝，1997；張宏超等，2002)。準(zhǔn)確吸取300 μL測試液入500 mL三角燒瓶輕搖使均勻布滿瓶底，自然通風(fēng)4 h揮干丙酮得到藥膜(趙善歡，1993；吳鶴松等，2005)。

1.3 試蚤毒效觀察及獲得苯醚威、氯氰菊酯半數(shù)致死濃度和相關(guān)系數(shù)

按照不同濃度測試，取本室飼養(yǎng)印鼠客蚤新羽化未吸血成蟲，一種濃度同時倒入500 mL三角燒瓶內(nèi)(30只成蟲、3瓶、10只/瓶)，待30 min后將試蚤轉(zhuǎn)到潔凈的50 mL三角燒瓶內(nèi)，觀察并記錄24 h死亡數(shù)，重復(fù)3次。死亡標(biāo)準(zhǔn)：中毒蚤側(cè)臥、六足伸直，無活力、無任何反應(yīng)或足雖有微弱抽動，但不能站立、復(fù)活，即為死亡(慕立義，1994)。

1.4 設(shè)置混配試劑及試蚤毒效觀察

將每個濃度溶液制成藥膜(制膜方法同1.2)，取本室飼養(yǎng)印鼠客蚤未吸血新羽化成蟲，同時倒入500 mL三角燒瓶內(nèi)(10只/瓶)，待30 min后將試蚤轉(zhuǎn)到潔凈的50 mL三角燒瓶內(nèi)，觀察24 h死亡率。實驗條件：實驗溫度(21±2)℃、濕度(75±5)%，每次實驗重復(fù)2次，間隔1周以上重復(fù)進(jìn)行(每次實驗均重新配制儲備液和測試液)。如對照組死亡率<20%用Abbott公式校正，對照組死亡率>20%則實驗重做(吳鶴松，2005)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

通過SPSS軟件用直線回歸法計算苯醚威、氯氰菊酯半數(shù)致死濃度和相關(guān)系數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 試蚤毒效觀察及獲得苯醚威、氯氰菊酯半數(shù)致死濃度和相關(guān)系數(shù)

2.2 試蚤毒效觀察

按不同比例混合法將苯醚威、氯氰菊酯混配，結(jié)果詳見表1，表明：混配試劑3毒效最佳 (苯醚威6 mg、1000 mg/L氯氰菊酯溶液51 μL、丙酮9. 949 mL)。24 h死亡率70.0%，校正死亡率69.3%；混配試劑2、4、5： 24 h死亡率分別為58.9%、61.1%、53.3%，24 h校正死亡率分別為58.0%、60.2%、52.2%。均超過了苯醚威、氯氰菊酯單獨使用的毒效，表現(xiàn)出明顯的增效作用。

表1 苯醚威、氯氰菊酯混配劑對印鼠客蚤未吸血新羽化成蟲的毒力Tab.1 Toxicity of combined insecticides of fenoxycard, cypermethrin to the newly emerged fleas X. cheopis

圖1 苯醚威、氯氰菊酯混配劑對印鼠客蚤未吸血新羽化成蟲的毒力Fig.1 Toxicity of combined insecticides of fenoxycard, cypermethrin to the newly emerged fleas X. cheopis

3 討論

本次實驗是用藥膜法來研究苯醚威、氯氰菊酯及二者混配劑對印鼠客蚤的毒效，苯醚威、氯氰菊酯對未吸血新羽化成蟲的LC50分別為1647.9752 mg/L、8.4861 mg/L。表明苯醚威需大劑量才對印鼠客蚤未吸血新羽化成蟲有較明顯直接致死作用。按比例混合法將二者混配，結(jié)果表明，混配試劑組的毒效均超過了苯醚威、氯氰菊酯單獨使用的毒效，其中，混配試劑3毒效最佳 (苯醚威6 mg、1000 mg/L氯氰菊酯溶液51 μL、丙酮9. 949 mL)；24小時死亡率70.0%，校正死亡率69.3%；表現(xiàn)出明顯的增效作用。