狼瘡性腎炎發(fā)病機(jī)制及其與核轉(zhuǎn)錄因子—κB關(guān)系探討

王翔鵬 張全書 李麗麗 武璐璐 向陽

【摘 要】 狼瘡性腎炎是系統(tǒng)性紅斑狼瘡的一種并發(fā)癥，以自身抗體及其免疫復(fù)合物在腎臟沉積引發(fā)的腎臟炎癥浸潤為基礎(chǔ)，腎實(shí)質(zhì)破壞與間質(zhì)增生并存，造成腎臟結(jié)構(gòu)紊亂、腎功能障礙，最終可能發(fā)展為腎功能衰竭，是系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者預(yù)后是否良好的關(guān)鍵因素。核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）能調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞分化、激活炎癥因子轉(zhuǎn)錄等，在狼瘡性腎炎腎臟損傷過程中有著重要的調(diào)控作用。探究NF-κB對狼瘡性腎炎病程的調(diào)控，能夠更好地為基礎(chǔ)研究與臨床診治提供理論基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】 狼瘡性腎炎；系統(tǒng)性紅斑狼瘡；核轉(zhuǎn)錄因子-κB；自身免疫性疾病

狼瘡性腎炎（lupus nephritis，LN）是一種在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus，SLE）狀態(tài)下，自身免疫系統(tǒng)功能紊亂而引發(fā)腎臟慢性炎性損傷的自身免疫性疾病。約60%的SLE患者伴有LN的發(fā)生，10%～30%的患者最終發(fā)展為腎功能衰竭[1]。LN的核心致病過程為自身抗體及其免疫復(fù)合物沉積在腎臟，引發(fā)慢性炎癥浸潤，逐步破壞腎臟的結(jié)構(gòu)與功能。核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）作為重要的免疫與炎癥相關(guān)信號分子，2008年

ZHENG等[2]就發(fā)現(xiàn)了LN患者腎臟中NF-κB的顯著活化，提示LN與NF-κB存在一定關(guān)聯(lián)。NF-κB作用廣泛，參與LN自身抗體產(chǎn)生過程中自身反應(yīng)性B細(xì)胞活化與增殖，及腎臟炎性損傷，在LN發(fā)病及病情進(jìn)展過程中發(fā)揮著重要作用；但NF-κB在LN中的作用還未被系統(tǒng)闡述。為進(jìn)一步了解兩者之間的關(guān)系，并為進(jìn)一步探索LN防治打下基礎(chǔ)，本文就LN的發(fā)病機(jī)制與NF-κB在LN病程進(jìn)展中的作用進(jìn)行相關(guān)闡述。

1 LN的發(fā)病機(jī)制

1.1 自身抗體的產(chǎn)生 目前，LN被界定為一種病程復(fù)雜的自身免疫性疾病，表現(xiàn)為B細(xì)胞自我耐受性喪失、自身抗體的分泌與腎臟的慢性炎癥，其中，自身抗體的分泌是LN發(fā)病的基礎(chǔ)?？闺p鏈DNA（ds-DNA）抗體是最為常見的自身抗體[3]。ds-DNA的主要來源是細(xì)胞死亡。細(xì)胞死亡釋放的ds-DNA一般不具有免疫原性，只擁有免疫反應(yīng)性。若與適當(dāng)?shù)拇碳の锫?lián)合作為T輔助細(xì)胞或B細(xì)胞的共刺激因子時(shí)，則產(chǎn)生針對自身ds-DNA的免疫應(yīng)答，如來自病原體的DNA結(jié)合蛋白、多瘤病毒的T抗原、抗微生物肽LL37等。在特殊情況下，DNA自身也可具有強(qiáng)免疫原性，比如紫外線直接損傷皮膚而導(dǎo)致細(xì)胞死亡產(chǎn)生的DNA具有很強(qiáng)的免疫原性，可直接被髓樣樹突狀細(xì)胞識別，并誘導(dǎo)免疫反應(yīng)[4]。正常人體中B細(xì)胞發(fā)育和分化的任意階段都存在著防止自身反應(yīng)性B細(xì)胞活化的機(jī)制，包括bim、Fas對自身反應(yīng)性B細(xì)胞的清除和SHIP-1、SHP-1誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生自身DNA耐受

等[5]。若上述基因功能缺失，則可形成自身反應(yīng)性B細(xì)胞并分泌自身抗體。除此之外，其他基因的突變或缺失也可促使機(jī)體形成自身反應(yīng)性B細(xì)胞，如DNASE1與DNASE1L3的突變導(dǎo)致DNA降解障礙[6]、IFIH1與ACP5的異常表達(dá)啟動

I型IFN過表達(dá)[7-8]及補(bǔ)體系統(tǒng)C1、C3與C4功能缺失導(dǎo)致的凋亡細(xì)胞清除受阻等途徑提高免疫細(xì)胞自身反應(yīng)性[9]，從而導(dǎo)致自身反應(yīng)性B細(xì)胞的

生成。

1.2 自身抗體及其免疫復(fù)合物在腎臟沉積 自身抗體及其免疫復(fù)合物的腎臟沉積是LN患者腎臟損傷的基礎(chǔ)。STAMATIADES等[10]證實(shí)，腎巨噬細(xì)胞通過表面FcγR與免疫復(fù)合物的識別并結(jié)合，攝取免疫復(fù)合物，完成免疫復(fù)合物的內(nèi)皮運(yùn)輸，致使免疫復(fù)合物沉積于腎臟。繼而激活補(bǔ)體系統(tǒng)、招募炎細(xì)胞聚集、釋放細(xì)胞因子及蛋白水解酶，造成系膜細(xì)胞增生、血管球上皮受損和腎間質(zhì)纖維化等一系列病理改變，最終導(dǎo)致腎功能喪失。

除免疫復(fù)合物的直接沉積外，KRISHNAN等[11]

研究發(fā)現(xiàn)，抗ds-DNA抗體可直接與腎小球基底膜結(jié)合，進(jìn)一步與血液中相應(yīng)自身抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物。此外，單純抗體的直接作用也可產(chǎn)生類似免疫復(fù)合物帶來的炎癥反應(yīng)。YUNG等[12]將LN患者血清中分離出的抗ds-DNA抗體直接作用于體外腎小管上皮細(xì)胞，誘導(dǎo)了轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）等細(xì)胞因子的分泌并激活NF-κB等炎癥相關(guān)信號通路，加劇炎癥環(huán)境，加速纖維化的進(jìn)展。因此，單純抗ds-DNA抗體無需依賴與血液中的ds-DNA結(jié)合就可沉積于腎臟，并擁有與免疫復(fù)合物相似的致病性，也可進(jìn)一步形成免疫復(fù)

合物。

在自身抗體及其免疫復(fù)合物沉積腎臟之后，腎臟炎性損傷隨之而來，造成腎臟功能下降[13]。炎癥介質(zhì)、自身抗體及其免疫復(fù)合物是誘導(dǎo)炎性損傷的主要分子。LN早期，自身抗體及其免疫復(fù)合物沉積于腎臟，腎小球產(chǎn)生大量趨化因子，巨噬細(xì)胞趨化，釋放IL-1β、IL-6及TNF-α等促炎細(xì)胞因子，分泌基質(zhì)金屬蛋白酶及組織蛋白酶，引發(fā)腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞死亡及腎臟組織結(jié)構(gòu)改變[14]。此外，促炎細(xì)胞因子可繼續(xù)激活腎間質(zhì)細(xì)胞中炎癥相關(guān)信號通路，分泌更多的細(xì)胞因子，增強(qiáng)細(xì)胞凋亡和細(xì)胞焦亡的進(jìn)展，進(jìn)而加劇腎臟的損傷。

2 LN與NF-κB的關(guān)系

2.1 NF-κB概述 NF-κB蛋白包括5種亞單位，分為NF-κB蛋白與C-末端具有反式激活結(jié)構(gòu)域的Rel蛋白，NF-κB蛋白包括NF-κB1（p105/p50）、NF-κB2（p100/p52），Rel蛋白包括RelA（p65）、RelB和cRel。這些亞單位通過經(jīng)典和非經(jīng)典兩種途徑被二聚體化激活，進(jìn)而入核，起到轉(zhuǎn)錄因子的作用，但p50與p52形成的二聚體或自身的同二聚體不具有激活基因轉(zhuǎn)錄的功能。

2.2 NF-κB調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞功能 漿細(xì)胞是自身抗體的主要來源，自身反應(yīng)性B細(xì)胞發(fā)育至漿細(xì)胞的過程是LN發(fā)病的基礎(chǔ)環(huán)節(jié)，NF-κB的非經(jīng)典激活途徑對于其發(fā)育分化更是有著關(guān)鍵作用。RelB與NF-κB2的缺失都可導(dǎo)致B細(xì)胞成熟障礙，后者尤甚[15]。在經(jīng)典激活途徑中，NF-κB必需調(diào)節(jié)劑（NEMO）與激活I(lǐng)κB激酶（IKK）復(fù)合物的缺陷會阻滯B細(xì)胞的成熟，降低未成熟B細(xì)胞的生命活力，但這種抑制作用對于成熟B細(xì)胞并不明顯[16]。

患者過度表達(dá)的B細(xì)胞激活因子（BBAF）與BBAF-R結(jié)合，激活NF-κB，加速B細(xì)胞的成熟，并使其具有更強(qiáng)的分泌抗體的能力[17]。

此外，Th17、Treg等T細(xì)胞亞群比例失衡與LN的發(fā)病也關(guān)系密切。Treg功能障礙會引發(fā)B細(xì)胞活動異常及自身抗體的生成，造成致死性多器官自身免疫反應(yīng)[18]。若在炎癥環(huán)境中，NF-κB誘導(dǎo)激酶（NIK）的激活會解除Treg細(xì)胞對免疫系統(tǒng)的抑制，促使其分泌IFN-γ與IL-2，增強(qiáng)B細(xì)胞的反應(yīng)性[19]。

2.3 NF-κB誘導(dǎo)炎性損傷 自身抗體在LN患者的腎臟炎癥過程中發(fā)揮著重要的引導(dǎo)作用。當(dāng)抗ds-DNA抗體與巨噬細(xì)胞結(jié)合，可激活TLR4-NF-κB和NLRP3炎性小體信號通路，造成巨噬細(xì)胞發(fā)生焦亡，加強(qiáng)細(xì)胞因子的分泌并釋放活性氧，損傷腎組織[20]。此外，將患者血清中分離的抗ds-DNA抗體加入至腎系膜細(xì)胞的培養(yǎng)基當(dāng)中，引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，激活NF-κB信號通路，并促進(jìn)

IL-1β、TNF-α及MCP-1的釋放[21]。MCP-1可通過趨化作用進(jìn)一步招募巨噬細(xì)胞在腎臟集聚，加劇炎癥反應(yīng)。

諸多細(xì)胞因子作為NF-κB的下游分子，對LN患者的腎臟損傷都具有重要作用。其中TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和炎癥小體引發(fā)的細(xì)胞焦亡在腎損傷的過程中有著重要作用，包括免疫細(xì)胞、腎系膜細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞等細(xì)胞中NF-κB的激活上調(diào)TNF-α及IL-1β的生成與釋放，及NF-κB激活的下游炎癥小體，引發(fā)腎小管上皮細(xì)胞及足細(xì)胞程序性死亡，導(dǎo)致腎臟發(fā)生炎性損傷，腎功能受到影響，出現(xiàn)蛋白尿等臨床癥狀[22-23]。

然而，腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3（TNFAIP3）同樣作為被NF-κB調(diào)控的蛋白，卻具有與TNF-α等炎癥因子截然相反的作用。TNFAIP3過表達(dá)可通過抑制小鼠巨噬細(xì)胞中的NF-κB和NLRP3炎癥小體活化來減輕LN的癥狀[24]。但在LN中NF-κB的激活導(dǎo)致的主要趨勢仍是炎性損傷，因而TNFAIP3的激活作為一種機(jī)體自身的防御措施可能能夠成為臨床治療LN的一種手段。

2.4 NF-κB參與腎臟纖維化 腎纖維化是LN病程中腎臟發(fā)生的主要病理改變之一。主要過程包括巨噬細(xì)胞的浸潤，造成腎結(jié)構(gòu)消融，自身抗體的沉積誘導(dǎo)炎癥、腎小管上皮細(xì)胞與腎間質(zhì)細(xì)胞分泌細(xì)胞外基質(zhì)所致。

巨噬細(xì)胞在腎臟中的浸潤是LN患者和動物模型的顯著特征，被認(rèn)為是LN病程中最重要的標(biāo)志之一。在腎臟聚集的巨噬細(xì)胞主要來源于血液中的單核細(xì)胞，可能是由于自身抗體的腎臟沉積及其誘導(dǎo)的炎性環(huán)境促使腎小管上皮細(xì)胞激活TLR4/

NF-κB，進(jìn)而分泌MCP-1，導(dǎo)致單核細(xì)胞在腎臟炎性環(huán)境中轉(zhuǎn)化為活化的巨噬細(xì)胞，上調(diào)組織蛋白酶與基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，進(jìn)而浸潤腎間質(zhì)，改變腎實(shí)質(zhì)結(jié)構(gòu)[13，20，25-26]。沉積的自身抗體及其免疫復(fù)合物與炎癥環(huán)境共同刺激腎小管上皮細(xì)胞分泌TGF-β1[12]。TGF-β1可激活腎成纖維細(xì)胞Samd通路，上調(diào)I型膠原的分泌，從而參與到腎纖維化進(jìn)程[27]。除此之外，LI等[28]在進(jìn)行乙肝病毒X蛋白誘導(dǎo)腎臟纖維化的實(shí)驗(yàn)當(dāng)中發(fā)現(xiàn)，NF-κB的磷酸化與腎小管上皮細(xì)胞的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化呈正相關(guān)，而與MAPK等炎癥通路無明顯相關(guān)，這提示NF-κB可能是LN病程中腎纖維化的重要分子之一。

2.5 LN治療與NF-κB的關(guān)系 NF-κB在LN病程中作用廣泛，涉及前期自身抗體的產(chǎn)生及后期腎臟的炎性損傷，通過調(diào)節(jié)NF-κB的活化狀態(tài)可達(dá)到一定的治療目的。JHOU等[29]發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇依賴激活NF-κB上調(diào)FcγRIIB，減少雌性MRL/lpr小鼠脾臟生發(fā)中心B細(xì)胞和骨髓B細(xì)胞的數(shù)量并改善脾腫大。同時(shí)，血清自身抗體含量隨著B細(xì)胞數(shù)量的減少也明顯降低，LN癥狀也得以改善。這提示B細(xì)胞中的NF-κB是LN的一種潛在治療靶點(diǎn)。除調(diào)節(jié)B細(xì)胞活性外，ZHAO等[30]使用特異性NF-κB抑制劑Bay11-7082作用于雌性MRL/lpr小鼠，發(fā)現(xiàn)其能夠阻滯NF-κB的激活，明顯改善腎臟炎癥浸潤及抑制炎性小體活化，顯著減少腎臟損傷程度。WU等[31]研究表明青蒿素可通過抑制NF-κB的磷酸化，減少IL-6、TNF-α等細(xì)胞因子的釋放，達(dá)到緩解狼瘡小鼠腎臟損傷的效果。雖然干預(yù)NF-κB的活化在動物實(shí)驗(yàn)中治療LN有著良好的療效，但還未有臨床研究報(bào)道。

3 小 結(jié)

LN作為SLE重要的并發(fā)癥之一，其病程的進(jìn)展關(guān)系著患者生存年限與生活質(zhì)量。對于其發(fā)病機(jī)制的認(rèn)識與治療手段的探索，還有很多的不足。現(xiàn)有研究水平雖不能夠?qū)N的發(fā)病機(jī)制作出完善的解釋，但自身免疫與腎臟炎癥作為LN的基本特征已經(jīng)被廣泛接受。

目前，LN主要的治療手段是免疫抑制，雖有一定療效，但差強(qiáng)人意。根據(jù)NF-κB在淋巴細(xì)胞分化與腎臟炎癥中的作用，NF-κB的激活很有可能是LN發(fā)病及致病過程中的重要機(jī)制之一。已有研究通過調(diào)節(jié)NF-κB的活化進(jìn)而探索LN的治療手段，不論是在淋巴細(xì)胞方面，還是腎臟炎癥方面，都取得了一定進(jìn)展，表明調(diào)控LN進(jìn)展中的NF-κB有望成為治療LN的有效手段。但如何靶向調(diào)控淋巴細(xì)胞及腎臟炎癥相關(guān)細(xì)胞中NF-κB的活性，是動物實(shí)驗(yàn)走向臨床試驗(yàn)的首要難題，望未來能夠解決此難題，讓靶向調(diào)控NF-κB為臨床治療LN

服務(wù)。

4 參考文獻(xiàn)

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收稿日期：2018-01-05；修回日期：2018-03-28