張祥東

（河北省唐山市灤州市農(nóng)牧局，河北唐山 063700）

在家禽飼料工業(yè)中，制粒是一種常用的熱處理飼料原料的方法。有研究表明，飼料制粒后可提高肉雞日增重、日采食量和改善飼料利用率（Jensen，2000），提高飼料密度、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝入量及消化率，同時(shí)還可以降低飼料浪費(fèi)和用于進(jìn)食所消耗的能量（Douglas等，1990）。商品飼料廠可以控制飼料調(diào)質(zhì)溫度和保留時(shí)間（McCracken，2002）。目前，部分飼料廠的調(diào)質(zhì)溫度達(dá)90℃，且飼料工業(yè)開(kāi)啟了更高、更嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)控制病原菌，如沙門氏菌（Doyle和 Erickson，2006）。由芽孢桿菌得到的益生素具有熱穩(wěn)定性，在室溫下保質(zhì)期長(zhǎng)，在胃pH很低的情況下存活率高，大部分細(xì)菌可以完整進(jìn)入小腸（Lee等，2010），這對(duì)家禽飼料中應(yīng)用該菌具有很大吸引力。有文獻(xiàn)報(bào)道，益生素具有多種功能，如控制病原菌、調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、與有害菌競(jìng)爭(zhēng)腸道上皮內(nèi)的黏附受體（Cuttting，2010；Nava等，2005），提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率，進(jìn)而調(diào)控機(jī)體代謝（Jin等，2000）。盡管芽孢桿菌可以耐受高溫，但關(guān)于芽孢桿菌在蒸汽調(diào)質(zhì)-制粒下的存活率，以及制粒溫度和飼料添加益生素對(duì)肉雞生長(zhǎng)和免疫方面的交互作用研究報(bào)道較少。因此，本試驗(yàn)在日糧中添加益生素，同時(shí)采用不同的制粒溫度，考察其對(duì)1～42 d肉雞生長(zhǎng)性能和免疫性能的影響。

1 材料與方法

1.1 日糧設(shè)計(jì)與動(dòng)物分組 試驗(yàn)選擇健康平均體重為（62.38±1.22）g的1日齡肉仔雞672只，隨機(jī)分為6組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)28只。試驗(yàn)采用3個(gè)制粒溫度（75、85和90℃）×益生素水平（0和 5.20 log cfu/g），共 6個(gè)日糧，益生素購(gòu)自湖北華大瑞爾科技有限公司。試驗(yàn)分為1～21 d和22～42 d兩個(gè)階段，兩個(gè)階段日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1，按照常規(guī)飼養(yǎng)管理方法對(duì)試驗(yàn)肉雞進(jìn)行飼養(yǎng)和免疫。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 制粒 制粒過(guò)程分別采用75、80和90℃進(jìn)行調(diào)質(zhì)，1～21 d飼料直徑維持在2.5 mm，22～42 d飼料直徑維持在3 mm。分別在制粒前、調(diào)質(zhì)后和制粒后收集飼料樣品500 g用于分析益生素的含量，制粒后益生素的回收率見(jiàn)表3。

表2 制度溫度 ℃

表3 制粒對(duì)益生素回收率的影響

1.3 生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)期間，每天記錄雞只的死亡和淘汰數(shù)量，每周統(tǒng)計(jì)一次飼料用量，分別在試驗(yàn)第1、21和42天上午對(duì)各組雞只按重復(fù)稱重，計(jì)算1～21 d、22～42 d和1～42 d肉雞的日均采食量、日均增重、料重比和死亡率。

1.4 血液和腸道內(nèi)容物指標(biāo) 分別在試驗(yàn)第21和42天每個(gè)重復(fù)選擇8只雞進(jìn)行翅下靜脈采血，分離血清。之后屠宰雞只，分離十二指腸和空腸，用刀片將十二指腸黏膜刮下。用商品試劑盒測(cè)定血清和十二指腸黏膜IgA及血清IgM和活性氧中間體的含量。測(cè)定方法為ELISA法，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。將空腸內(nèi)容物擠無(wú)菌Epperdroff管中，在室溫下用黏度計(jì)測(cè)定內(nèi)容物的黏度。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 每個(gè)重復(fù)作為一個(gè)試驗(yàn)單元測(cè)定生長(zhǎng)性能指標(biāo)，每只肉雞為一個(gè)試驗(yàn)單元測(cè)定血液指標(biāo)、腸黏膜指標(biāo)。所有數(shù)據(jù)均用SPSS多因素方差分析，各組差異性用Ducan’s法進(jìn)行多重比較，同時(shí)，研究制粒溫度與日糧添加或不添加益生素對(duì)各指標(biāo)的交互作用，以P＜0.05作為差異顯著性判定標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 制粒后對(duì)飼料益生素回收率的影響 由表2可知，在制粒的最后階段，試驗(yàn)測(cè)定了實(shí)際制粒溫度，實(shí)測(cè)制粒溫度與設(shè)定的制粒溫度接近。由表3可知，日糧添加的益生素在75、85和90℃條件下制粒，制粒后飼料中的益生素含量回收率達(dá)90%以上。

2.2 日糧添加益生素和不同制粒溫度對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響 由表4可知，日糧添加益生素有降低1～21 d肉雞采食量的趨勢(shì)（P=0.06），但對(duì)日增重和料重比無(wú)顯著影響（P＞0.05）。飼料制粒溫度對(duì)各階段肉雞的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響（P＞0.05）。與75和90℃制粒溫度相比，85℃制粒溫度顯著降低了22～42 d和1～42 d肉雞的日增重（P＜0.05）。日糧添加益生素顯著降低了日采食量和料重比（P＜0.05）。日糧添加益生素和不同制粒溫度對(duì)試驗(yàn)全期肉雞生長(zhǎng)性能的影響無(wú)顯著的交互作用（P＞0.05）。在75℃制粒溫度條件下，日糧添加益生素較不添加組有降低死亡率的趨勢(shì)（P=0.08）。

2.3 日糧添加益生素和不同制粒溫度對(duì)肉雞腸道免疫性能的影響 由表5可知，日糧制粒溫度和益生素對(duì)21 d肉雞血清IgM，IgA和活性氧中間體的含量均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。85和90℃制粒溫度添加益生素較75℃腸黏膜sIgA分別提高了61%和51%（P＜0.05）。日糧制粒溫度和益生素對(duì)42 d黏膜sIgA含量的影響表現(xiàn)為顯著交互作用（P＜0.05）。與90℃制粒溫度相比，75和85℃制粒溫度添加益生素顯著降低了黏膜sIgA含量（P＜0.05）。同時(shí)，日糧添加益生素，其中90℃較85℃顯著降低了血清IgM的含量（P＜ 0.05）。

表4 不同制粒溫度和益生素對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.4 日糧添加益生素和不同制粒溫度對(duì)肉雞空腸內(nèi)容物黏度的影響 由表6可知，日糧制粒溫度和添加益生素對(duì)21和42 d肉雞空腸內(nèi)容物黏度均無(wú)顯著影響（P＞0.05），同時(shí)制粒溫度和添加益生素對(duì)該指標(biāo)的影響也無(wú)顯著交互作用（P＞ 0.05）。

3 討論

3.1 制粒溫度對(duì)日糧中益生素回收率的影響本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在不同制粒溫度條件下，試驗(yàn)所用益生素的回收率均在90%以上。同時(shí)，在本研究中，淀粉糊化度隨制粒溫度的升高無(wú)顯著變化。Abdollahi等（2010）研究發(fā)現(xiàn)，制粒溫度由60℃提高至90℃，玉米淀粉的糊化度分別提高了16%、16.9%和19.9%，但在該試驗(yàn)中，其糊化玉米量?jī)H僅為本試驗(yàn)的一半，結(jié)果差異可能與制粒工藝及糊化淀粉測(cè)定方法有關(guān)。淀粉的糊化度取決于調(diào)質(zhì)過(guò)程的蒸汽量，因?yàn)檎羝綍?huì)限 制 玉 米 糊 化 度（Moritz等，2001）。Svihus等（2005）研發(fā)發(fā)現(xiàn)，調(diào)質(zhì)和制粒過(guò)程淀粉的糊化度為10%～20%。

表5 不同制粒溫度和益生素對(duì)肉雞腸道免疫性能的影響 μ g/mL

表6 不同制粒溫度和益生素對(duì)空腸內(nèi)容物黏度的影響 cPs

3.2 不同制粒溫度和日糧添加益生素對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響 試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與75℃和90℃制粒溫度相比，85℃制粒溫度顯著降低22～42 d和1～42 d肉雞的日增重，這與Abdollahi等（2010）的研究結(jié)果一致，其結(jié)果發(fā)現(xiàn)，60和90℃制粒溫度較75℃改善了1～21 d肉雞的日增重。制粒溫度對(duì)生長(zhǎng)性能的影響可能存在兩種原因：（1）高溫條件下制粒，調(diào)質(zhì)過(guò)程進(jìn)入的蒸汽可以起到潤(rùn)滑作用，降低環(huán)模與熱不穩(wěn)定營(yíng)養(yǎng)素之間的摩擦；（2）90℃的制粒溫度較75℃有降低高溫對(duì)養(yǎng)分的利用率，可以提高飼料質(zhì)量。但Kirkpinar和 Basmacioglu（2006）的研究發(fā)現(xiàn)，玉米型日糧在65℃制粒條件下較75℃和85℃提高了日增重。日糧添加益生素降低了采食量，但改善了料重比，對(duì)日增重?zé)o顯著影響，結(jié)果表明，益生素對(duì)肉雞的生長(zhǎng)性能具有促進(jìn)作用。但關(guān)于益生素對(duì)肉雞研究報(bào)道結(jié)果存在差異，這可能與試驗(yàn)所用的益生素類型不同有關(guān)。益生素的作用機(jī)制主要有平衡腸道微生物菌群、免疫調(diào)節(jié)及與有害菌競(jìng)爭(zhēng)腸道上皮內(nèi)的黏附受體等（Lee等，2010）。

3.3 不同制粒溫度和日糧添加益生素對(duì)肉雞血清和腸道相關(guān)指標(biāo)的影響 試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，85和90℃制粒溫度添加益生素較75℃腸黏膜sIgA分別提高了61%和51%；與90℃制粒溫度相比，75℃和85℃制粒溫度添加益生素顯著降低了黏膜sIgA的含量，這與Lee等（2011）的研究報(bào)道一致。制粒溫度和日糧添加益生素對(duì)21 d和42 d肉雞血清IgA和IgM的影響存在差異說(shuō)明，制粒溫度和益生素主要對(duì)腸道黏膜發(fā)揮作用。日糧添加益生素，其中90℃較85℃顯著降低了血清IgM的含量，這可能與制粒溫度為90℃時(shí)，降低了益生素的免疫刺激性有關(guān)。日糧制粒溫度在85和90℃條件下促進(jìn)了十二指腸黏膜sIgA的分泌，說(shuō)明高溫促進(jìn)了機(jī)體免疫反應(yīng)（McCracken，2002）。

4 結(jié)論

在不同制粒溫度添加下，日糧添加益生素降低了采食量和料重比，提高了腸道黏膜sIgA的含量。75和90℃制粒溫度較85℃提高了42 d肉雞的日增重。