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      熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA與化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)相關(guān)性

      2018-12-21 01:49:04
      關(guān)鍵詞:大三陽(yáng)小三陽(yáng)化學(xué)發(fā)光

      乙肝為乙型肝炎病毒感染引起的慢性傳染性肝臟疾病,在我國(guó)有較高發(fā)病率,為影響我國(guó)人們健康主要傳染性疾病之一。研究指出,臨床中早期、全程、規(guī)律抗病毒治療,對(duì)延緩乙肝患者疾病發(fā)生、發(fā)展,改善患者預(yù)后非常關(guān)鍵[1]。臨床中診斷乙肝可從病原學(xué)及免疫學(xué)方面進(jìn)行檢測(cè),包括檢測(cè)HBV-DNA病毒及病毒載量、檢測(cè)乙肝病毒所致抗原和抗體,不同檢測(cè)方法能反映患者不同感染情況和疾病狀態(tài)。熒光定量PCR法為檢測(cè)HBV-DNA主要方法,化學(xué)發(fā)光酶免疫法為檢測(cè)乙肝五項(xiàng)主要方法,兩種檢測(cè)方法具有經(jīng)濟(jì)、便捷、操作簡(jiǎn)便、靈敏度和特異性高等優(yōu)點(diǎn)[2],為探究?jī)煞N檢測(cè)方法檢測(cè)HBV-DNA與乙肝五項(xiàng)的關(guān)聯(lián)性,研究如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料

      選擇2016年2月—2018年4月我院檢驗(yàn)科采用熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA,陽(yáng)性血清標(biāo)本158份作為研究對(duì)象,標(biāo)本患者信息:男82例,女76例;年齡16~82歲,平均(48.2±6.2)歲;住院患者118份,門(mén)診患者40份。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)所有標(biāo)本經(jīng)熒光定量PCR檢測(cè),其病毒載量≥5.0E+02 IU/ml,判定為HBVDNA陽(yáng)性;(2)標(biāo)本均有保存,能滿足再次采用化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)所需,且質(zhì)量合格;(3)標(biāo)本來(lái)源清晰;(4)向標(biāo)本患者講解本研究干預(yù)后,獲得患者同意采用化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)標(biāo)本劑量不足或不合格;(2)標(biāo)本來(lái)源不能追蹤,未能獲得標(biāo)本提供患者同意者。

      1.2 方法

      熒光定量PCR檢測(cè)法:采用杭州安杰思醫(yī)學(xué)科技有限公司生產(chǎn)的AFD-4800型核酸擴(kuò)增實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)系統(tǒng),其配套試劑由中山大學(xué)達(dá)安基因有限公司提供,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)?;瘜W(xué)發(fā)光酶免疫法:采用強(qiáng)生公司生產(chǎn)VITROS 3600型號(hào)全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀及同公司配套試劑盒,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。在檢測(cè)過(guò)程中,每檢測(cè)批次均設(shè)陰陽(yáng)性對(duì)照、臨界質(zhì)控品,檢測(cè)值均在控。

      1.3 觀察指標(biāo)

      (1)按照乙肝五項(xiàng)檢測(cè)后HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBcAb、HBeAb陽(yáng)性將患者進(jìn)行分組,分析HBV-DNA檢測(cè)陽(yáng)性標(biāo)本乙肝五項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性情況。(2)按照乙肝五項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性情況將患者分為大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組、HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組,分別比較兩組患者中HBV-DNA病毒載量情況。根據(jù)HBV-DNA載量結(jié)果分為低載量(5.0E+02 IU/ml~1.0E+05 IU/ml)、中載量(1.0E+05 IU/ml~ 1.0E+07 IU/ml)、高載量(1.0E+07 IU/ml~ 1.0E+11 IU/ml)[3]。

      1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

      用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)本研究收集和整理數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,計(jì)量資料用(±s)表示;乙肝五項(xiàng)陽(yáng)性情況及病毒載量情況用Z檢驗(yàn)或χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

      2 結(jié)果

      2.1 乙肝五項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性組合情況

      HBsAg、HBcAb、HBeAb( 小 三 陽(yáng) ) 和 HBsAg、HBcAb、HBeAg(大三陽(yáng))患者比例分別為43.04%、37.34%,顯著高于其它陽(yáng)性組患者(P<0.05)。見(jiàn)表1。

      表1 乙肝五項(xiàng)檢測(cè)陽(yáng)性組合情況

      2.2 大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組HBV-DNA載量

      大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組HBV-DNA載量比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

      表2 大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組HBV-DNA載量 [n(%)]

      2.3 HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組HBV-DNA載量

      HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組HBV-DNA載量比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

      表3 HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組HBV-DNA載量比較 [1(%)]

      3 討論

      熒光定量PCR和化學(xué)發(fā)光酶免疫法均為常用定量檢驗(yàn)方法,但兩種檢測(cè)方法從不同原理檢測(cè)標(biāo)本,結(jié)果不能進(jìn)行直接對(duì)比和比較。乙肝為我國(guó)常見(jiàn)慢性傳染性疾病之一,為引起肝硬化、肝癌主要病因,對(duì)患者健康、生活質(zhì)量造成嚴(yán)重影響。實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)為輔助診斷乙肝的主要方法,早檢查、早診斷并積極干預(yù)為延緩乙肝患者疾病發(fā)生、發(fā)展,改善患者預(yù)后的關(guān)鍵[4]。目前,臨床中定量檢測(cè)并診斷乙肝可通過(guò)分子技術(shù)和免疫技術(shù)進(jìn)行檢驗(yàn),即檢驗(yàn)HBV-DNA載量和HBV病毒相關(guān)抗原和抗體水平[5-6]。臨床中通過(guò)判讀HBV病毒相關(guān)抗原、抗體陽(yáng)性情況能對(duì)機(jī)體感染HBV情況及對(duì)HBV免疫情況進(jìn)行判定,同時(shí)根據(jù)HBV-DNA載量情況能判定HBV感染情況和傳染情況[7-8]。

      本研究分別采用熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA,并將HBVDNA陽(yáng)性標(biāo)本再次采用化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)指標(biāo),得出HBV-DNA陽(yáng)性標(biāo)本中檢測(cè)出HBsAg、HBcAb、HBeAb(小三陽(yáng))和HBsAg、HBcAb、HBeAg(大三陽(yáng))患者比例分別為43.04%、37.34%,顯著高于其它陽(yáng)性組患者(P<0.05)。大三陽(yáng)和小三陽(yáng)均為臨床中反映乙肝感染的重要標(biāo)準(zhǔn),對(duì)HBV-DNA陽(yáng)性患者同時(shí)檢測(cè)乙肝五項(xiàng)指標(biāo)同樣有較高的陽(yáng)性率。同時(shí)本研究結(jié)果得出大三陽(yáng)組和小三陽(yáng)組、HBeAg陽(yáng)性組和HBeAb陽(yáng)性組HBV-DNA載量的差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。證實(shí)在不同乙肝感染和傳染情況中,患者HBV-DNA載量同樣存在差異。同樣有學(xué)者研究指出,乙肝患者HBV-DNA載量與乙肝患者肝炎活動(dòng)程度及傳染情況有相關(guān)性[9-11]。另有學(xué)者研究指出,乙肝大三陽(yáng)患者相對(duì)乙肝小三陽(yáng)患者HBV-DNA病毒載量顯著升高[12]。

      綜上所述,熒光定量PCR檢測(cè)HBV-DNA和化學(xué)發(fā)光酶免疫法檢測(cè)乙肝五項(xiàng)在乙肝患者中有較高關(guān)聯(lián)性,臨床中分別采用兩種方法進(jìn)行檢測(cè)對(duì)輔助診斷和判定乙肝患者病情有重要臨床價(jià)值。

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