動脈粥樣硬化（AS）患者HCMV陽性率檢測及潔羅維注射液的治療效果觀察

彭玲　孫華　羅迦　肖開永　王建平　何元軍　楊慶

【摘 要】目的 分析動脈粥樣硬化（AS）患者人巨細胞病毒（HCMV）陽性率檢出情況，同時觀察潔羅維注射液治療AS患者的臨床療效，為該類疾病的臨床治療提供新的參考依據(jù)。方法 將我院2017年1月～12月136例AS患者列為觀察對象，將136例AS患者以隨機分配原則均分為兩組（68例/組），且均給予HCMV-pp65 抗原檢測法檢測其HCMV陽性率；其中對照組給予常規(guī)治療，觀察組患者在常規(guī)治療的基礎上加用潔羅維注射液進行治療；觀察兩組AS患者治療前、后HCMV陽性率表達情況，并比較兩組患者治療前、后其AS斑塊變化情況。結果 ①經(jīng)統(tǒng)計顯示，治療前136例患者檢出HCMV的總陽性率為85.29%（116/136），且兩組比較無明顯差異性（P>0.05），經(jīng)治療后，觀察組患者HCMV陽性率顯著低于對照組同期（P<0.05）；②經(jīng)治療后，觀察組患者動脈最大內(nèi)中膜厚度、斑塊面積及MPO水平等方面改善情況顯著優(yōu)于對照組，P<0.05；但兩組患者斑塊數(shù)目治療前后比較無明顯變化，P>0.05；③經(jīng)治療后，觀察組患者穩(wěn)定性斑塊所占比重明顯高于對照組同期，易損斑塊所占比重明顯低于對照組同期（χ2=4.076，P=0.044）。結論 對AS患者積極開展HCMV陽性檢測并制定針對性治療方案有著重要臨床指導意義；應用潔羅維注射液治療AS可有效降低AS患者HCMV陽性率，還可提高斑塊穩(wěn)定性，對減少臨床心腦血管事件風險，有著極高的臨床應用價值。

【關鍵詞】：動脈粥樣硬化；人巨細胞病毒；陽性率；斑塊穩(wěn)定性；潔羅維注射液

【中圖分類號】R543.5 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-3783（2018）10-03--01

AS是冠心病、腦血管病和血栓栓塞性疾病等缺血性心腦血管病的主要病理基礎，其病因與機制十分復雜，以往臨床醫(yī)學多認為高血壓、高血糖及高血脂是誘導AS發(fā)病的高危因素[1]。但隨著對AS研究的深入發(fā)現(xiàn)，占1/3以上的AS患者并無高血壓、高血糖及高血脂等基礎疾病，而是與患者感染性血管內(nèi)皮炎癥反應有關；為此國內(nèi)外眾多臨床單位、學者對此展開了大量研究，研究結果表明人巨細胞病毒（HCMV）感染與AS的發(fā)病有密切聯(lián)系，且參與了AS發(fā)生及發(fā)展全過程[2、3]。因此，檢測AS患者是否被HCMV感染，以及HCMV的陽性率對指導臨床進行針對性治療有著重要意義。本研究通過對136例AS患者治療前后進行HCMV陽性率檢測并給予分組治療，進而分析潔羅維注射液對AS患者HCMV陽性表達及斑塊穩(wěn)定性的影響，為臨床醫(yī)生治療AS提供新的可行性參考依據(jù)，詳細研究如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2017年1月～12月住院部136例AS患者列為觀察對象，所有入選患者均符合AS相關入選標準，將136例AS患者以隨機分配原則均分為兩組（68例/組），其中對照組男性38例、女性30例；年齡49～70歲，平均（62.1±6.5）歲；觀察組男性36例、女性32例；年齡48～71歲，平均為（62.3±6.8）歲；兩組患者性別、平均年齡等一般基礎資料比較無明顯差異性，可進行對照研究。

1.2 方法

1.2.1 斑塊檢測及判定：全部患者均經(jīng)彩色多普勒超聲檢查，觀察并記錄以管腔內(nèi)膜面到中層與外膜交界處的垂直距離有無粥樣硬化斑塊及其部位、大小、回聲強度和表面特征。斑塊類型根據(jù)斑塊穩(wěn)定程度將扁平斑、軟斑、混合斑納入易損斑塊，硬斑及內(nèi)膜增厚納入穩(wěn)定斑塊，而潰瘍斑和斑塊內(nèi)出血這兩種類型由于技術條件所限暫不納入本次觀察。

1.2.2 HCMV陽性檢測：采用HCMV-PP65抗原檢測方法，于患者空腹狀態(tài)下采集靜脈血液樣本2-5ml，采用抗凝劑乙二胺四乙酸二鈉抗凝，而后采用離心機分離多形核白細胞、血漿提取白細胞懸液，以APES玻璃為載體將白細胞懸液置于37℃烘干箱中烘干，加入鼠抗人HCMV一抗培育40min后，再次加入羊抗鼠二抗培育30min后，采用二氨基聯(lián)苯胺進行第一次染色，10min后采用蘇木素進行復染，隨后于光學顯微鏡（型號：日本OLYMPUSBX-41）下計數(shù)陽性白細胞；陽性細胞胞漿或胞核為棕黃色，陰性細胞為均勻一致的藍紫色，以陽性細胞數(shù)>1/50000即判定為HCMV-PP65抗原陽性。

1.2.3 血清MPO的檢測：MPO試劑盒由美國R&D;公司生產(chǎn)，檢測操作步驟嚴格按照說明書進行。

1.2.4 治療方法：對照組AS患者給予阿司匹林腸溶片50mg/d口服，每日1次；同時口服倍他樂克，2次/d，25mg/次；血栓通靜滴治療，1次/d，劑量為500mg ；以及其他常規(guī)對癥治療。觀察組AS患者在對照組的基礎上加用潔羅維注射液（通用名：阿昔洛韋氯化鈉注射液（Ⅱ），生產(chǎn)企業(yè)：四川科倫藥業(yè)有限公司，規(guī)格：0.1 g：100 mL/ 瓶，批準文號：國藥準字H19990147）進行治療，用法用量： 200ml/次，2次/天。

1.3 觀察指標

①觀察兩組AS患者治療前、后HCMV陽性率表達情況，并比較兩組患者治療前、后其AS斑塊變化情況[4]。

②通過動脈超聲檢查斑塊數(shù)目和動脈內(nèi)膜-中膜厚度（IMT）及斑塊面積統(tǒng)計斑塊變化情況[5]；

③檢測血清髓過氧化物酶（MPO）水平評定血管內(nèi)炎癥反應輕重程度[6]。

④采用動脈超聲檢查判別斑塊類型，根據(jù)2003年發(fā)表的美國心臟協(xié)會的協(xié)定分為易損斑塊和穩(wěn)定斑塊，進而綜合評價斑塊的穩(wěn)定性[7]。

1.4 統(tǒng)計學分析

將本研究使用統(tǒng)計學軟件SPSS 22.0進行相關統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用百分數(shù)（%）表示采用χ2檢驗，計量資料采用（）表示行t檢驗，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 治療前、后HCMV陽性率表達情況分析比較

檢測結果顯示：治療前136例患者檢出HCMV總陽性率為85.29%（116/136），其中對照組檢出HCMV陽性患者57例，觀察組59例，兩組比較無明顯差異性（P>0.05）；經(jīng)治療后，觀察組患者HCMV陽性率顯著低于對照組同期（P<0.05）；詳見表1.

2.2 治療前后斑塊變化情況分析比較

經(jīng)統(tǒng)計得出：兩組患者治療前其動脈最大內(nèi)中膜厚度、斑塊面積與數(shù)量及MPO水平比較均無明顯差異，P>0.05；經(jīng)治療后，觀察組患者動脈最大內(nèi)中膜厚度、斑塊面積及MPO水平等方面改善情況顯著優(yōu)于對照組，P<0.05；但兩組患者斑塊數(shù)目治療前后比較無明顯變化，P>0.05；詳見表2。

2.3 治療前后斑塊穩(wěn)定性斑塊與易損斑塊數(shù)量變化情況分析

經(jīng)統(tǒng)計顯示：治療前兩組穩(wěn)定性斑塊、不穩(wěn)定性斑塊所占比重無明顯差異性，P>0.05；然經(jīng)治療后，觀察組患者穩(wěn)定性斑塊所占比重明顯高于對照組同期，不穩(wěn)定斑塊所占比重明顯低于對照組同期（χ2=4.076，P=0.044）；詳見表3.

3 討論

近年來，隨著AS研究的深入，發(fā)現(xiàn)動脈內(nèi)壁炎癥反應是AS發(fā)生、發(fā)展全過程最主要的表現(xiàn)，且該炎癥反應多由感染病原微生物所致。相關研究表明[8]，HCMV是引發(fā)血管壁感染和血管外感染進而出現(xiàn)動脈內(nèi)壁炎癥反應的重要病因之一。HCMV屬于人類β皰疹病毒亞家族，外觀形態(tài)呈球形，其具有典型的皰疹病毒結構，且廣泛分布于自然環(huán)境中，人類是其唯一的宿主。據(jù)流行病調查，HCMV在非洲、南美洲等發(fā)展中國家的感染陽性率較高，約為 70%～90%，在歐美等發(fā)達國家則相關較低，約為36.9%～68.3%，HCMV感染在我國也廣泛流行[9]。當機體感染該病毒后，免疫機制啟動可清除絕大部分病毒，但仍有部分病毒可長期潛伏于血管內(nèi)皮細胞與平滑肌細胞中，當機體免疫力下降時被激活，其在增殖過程致血管內(nèi)皮細胞結構受損，引起內(nèi)皮細胞出現(xiàn)功能損傷，影響NO合成，導致NO分泌明顯減少，NO分泌減少可使血小板從抗凝狀態(tài)變?yōu)榇倌隣顟B(tài)，增加其在血管內(nèi)皮的黏附，促使血栓形成；從而參與了AS的發(fā)生、發(fā)展全過程。因此，對AS患者積極展開HCMV陽性檢測，進而判定有無HCMV感染或HCMV潛伏感染狀態(tài)是否被激活對臨床制定針對性抗病毒治療有重要指導意義。

氧化應激和炎癥是動脈粥樣硬化發(fā)展的兩個關鍵成分，是動脈粥樣硬化從脂肪條紋形成到斑塊破裂和血栓形成這一發(fā)展過程的主要因素[10]。氧化應激可引起內(nèi)皮細胞膜穩(wěn)定性和通透性平衡失調、內(nèi)分泌和旁分泌功能受損、黏附分子表達增加及脂質過氧化等。HCMV病毒感染后人體往往處于慢性的氧化應激狀態(tài)，這主要表現(xiàn)在兩個方面[12]：一是病毒感染后宿主細胞會在病毒的誘導下發(fā)生氧化應激，釋放出大量的自由基來推動氧化進程；二是大量活性氧自由基導致機體過氧化損傷，引起細胞膜磷脂層的脂質過氧化，從而進一步抑制和損傷機體免疫功能，導致機體耐藥率增加。因此，ROS通常被視為病毒性疾病病理進程中引起細胞損傷的元兇。機體通過維持氧化物/抗氧化物平衡來保持正常狀態(tài)，而病毒通過改變宿主細胞內(nèi)前氧化物/抗氧化物的平衡，影響細胞凋亡過程。綜上所述，氧化應激貫穿于As斑塊的形成、發(fā)展以及破裂并觸發(fā)臨床事件的始終，因此抗氧化治療也是防治As有效、最有希望的策略之一。

本研究中，通過對136例AS患者進行HCMV-pp65 抗原血癥檢測發(fā)現(xiàn)，136例患者檢出HCMV陽性率為39.71%（54/136），與相關文獻報道相近?；谏鲜鰴z測結果對所有研究對象給予分組治療，研究結果顯示，經(jīng)治療后，觀察組患者HCMV陽性率顯著低于對照組同期（P<0.05）；提示潔羅維注射液應用于AS患者臨床治療可顯著降低病毒總閾值，降低HCMV感染陽性率。眾所周知，斑塊穩(wěn)定性是評定斑塊是否發(fā)生脫落或破裂的重要指標；學者孔偉麗、谷聚賢等人認為[13]，局部炎癥細胞的浸潤以及全身急性炎癥是導致斑塊脫落或破裂的主要原因之一，MPO是中性粒細胞激活的標志物，MPO水平的高低表達出嗜中性多形核白細胞功能、活性狀態(tài)，從而反應出機體炎癥反應的輕重，是反映斑塊穩(wěn)定性的重要指標之一。本研究中，觀察組患者動脈最大內(nèi)中膜厚度、斑塊面積及MPO水平等方面改善情況顯著優(yōu)于對照組，P<0.05；則表示潔羅維注射液可有效消退AS患者斑塊面積、減輕動脈狹窄程度及控制炎癥反應以降低斑塊的易損性；此外，經(jīng)治療后，觀察組患者穩(wěn)定性斑塊所占比重明顯高于對照組同期，易損斑塊所占比重明顯低于對照組同期P<0.05，充分表明潔羅維注射液可有效將AS患者易損斑塊轉化為穩(wěn)定性斑塊，以減少不良血管事件的發(fā)生。

潔羅維注射液（阿昔洛韋氯化鈉注射液Ⅱ）產(chǎn)品主要有效成分包括阿昔洛韋、甲硫氨酸、煙酰胺、甘氨酸、脯氨酸，其中阿昔洛韋可有效清除HCMV，降低HCMV含量總閾值，抑制其活躍程度，從而有效消退動脈粥樣硬化斑塊面積與控制炎癥反應，進而提高斑塊的穩(wěn)定性，以減少臨床心腦血管事件風險。此外，潔羅維中的甲硫氨酸可外源性的有效補充機體抗氧化物質的含量，甲硫氨酸是機體內(nèi)合成谷胱甘肽的前體物質，而谷胱甘肽可保護細胞免受氧自由基的損傷。Grimmble等（1998）研究表明：甲硫氨酸的足量、規(guī)范補充可以迅速增加人體內(nèi)谷胱甘肽（GSH）的合成，在還原型谷胱甘肽（GSH）與氧化型谷胱甘肽（GSSG）的循環(huán)過程中清除自由基，調節(jié)血管內(nèi)皮細胞氧化應激狀態(tài)，改善內(nèi)皮細胞功能微環(huán)境，同時降低病毒耐藥性，更為全面有效的抑制多種已知和未知病毒；而產(chǎn)品中的其他有效成分煙酰胺、甘氨酸、脯氨酸則可有效補充機體所需的營養(yǎng)物質，對縮短治療周期及促進預后質量有著積極作用。

綜上所述，對于心腦血管疾病的患者，在檢測條件允許的情況下（等級醫(yī)院），應該積極做HCMV的陽性率或滴度檢測，以此檢測結果為臨床的進一步治療提供診斷依據(jù)；在不具備檢測條件的情況下（基層醫(yī)療單位），在臨床治療時，根據(jù)HCMVG感染的生物特性，我們推薦把潔羅維注射液納入基礎治療方案中，這對于患者住院周期、減少經(jīng)濟負擔、促進預后，以及控制醫(yī)保費用支出有著積極的臨床意義，值得推薦。

參考文獻

李婉珍，王明麗，趙俊等.巨細胞病毒參與動脈粥樣硬化致病機制研究新進展[J].微生物與感染，2017，12（1）：50-56.

申廣輝，曹麗娟，陳福祥等.人巨細胞病毒感染促動脈粥樣硬化的機制[J].國際心血管病雜志，2017，44（5）：285-288.

杜立平，朱淑芬.冠心病患者動脈粥樣硬化與人巨細胞病毒檢測結果的相關性分析[J].標記免疫分析與臨床，2016，23（12）：1379-1381，1412.

阮強，何蓉.人巨細胞病毒感染的實驗室檢測與診斷[J].實用兒科臨床雜志，2012，27（10）：729-731.

王靜，陳時芳，徐淑靜等.2型糖尿病患者臂踝脈搏波傳導速度與頸動脈內(nèi)膜中層厚度及斑塊的關系[J].重慶醫(yī)學，2016，45（10）：1345-1347.

何倩，張蕾，鄭美娟等.抗中性粒細胞胞質髓過氧化物酶抗體相關性血管炎周圍血中性粒細胞CD35表達的變化及意義[J].中華風濕病學雜志，2018，22（4）：251-256.

方芳，張偉，喬旭柏等.急性冠狀動脈綜合征患者易損斑塊的臨床病理分析[J].中華心血管病雜志，2011，39（9）：802-806.

郭洪平，王淑輝，鄭金花等.人巨細胞病毒檢測在動脈粥樣硬化病變中的臨床意義研究[J].中國醫(yī)師進修雜志，2013，36（10）：11-13.

張雨，曾慧慧.人巨細胞病毒感染及母嬰傳播阻斷臨床研究進展[J].中華實驗和臨床感染病雜志（電子版），2017，11（6）：526-532.

孫龍飛.炎性信號通路在動脈粥樣硬化中的機制與中醫(yī)藥干預作用研究進展[J].中國動脈硬化雜志，2015，23（11）：1177-1181.

脫厚珍，車晶晶，劉磊等.HCMV感染致培養(yǎng)臍靜脈內(nèi)皮細胞活化和氧化應激的作用[J].中華實驗和臨床病毒學雜志，2017，31（4）：298-301.

盧斯?jié)h，危偉浪，劉玉林等.HCMV感染的抗氧化治療與潔羅維注射液臨床預防與治療應用[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2015，15（30）：5982-5985.

孔偉麗，谷聚賢，何俊瑛等.缺血性腦血管病患者MPO的表達水平與頸動脈粥樣硬化斑塊類型及HCMV相關性研究[J].河北醫(yī)科大學學報，2012，33（9）：1004-1007，封2.