雷迪 鄭楠薪 隋明星

實(shí)驗(yàn)證據(jù)表明，在可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡的環(huán)境中，自噬在細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境的過程中起主要作用[1-2]。由于經(jīng)過了缺血-再灌注、小動(dòng)脈血管收縮、毛細(xì)血管破壞以及間質(zhì)纖維化等過程，移植腎初期通常處于缺氧狀態(tài)[3]。此外，移植腎臟的炎癥環(huán)境促進(jìn)釋放危害分子，進(jìn)而激活體液免疫和細(xì)胞免疫。由于自噬主要的激活因素是缺氧和炎癥介質(zhì)，而這二者是腎移植最主要的應(yīng)激因素[4]，所以自噬一定參與調(diào)節(jié)移植腎的穩(wěn)態(tài)平衡，且自噬的參與程度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于人類認(rèn)知，目前并沒有大量的實(shí)驗(yàn)室或臨床證據(jù)[5]。

一、自噬生物學(xué)

細(xì)胞自噬開始于隔離膜的形成和擴(kuò)張，然后通過一系列的步驟，包括隔離膜閉合形成自噬體，與溶酶體接觸、融合形成自噬溶酶體，通過溶酶體的酸性水解酶分解、降解包裹的物質(zhì)及其內(nèi)膜，回收形成的產(chǎn)物。自噬可以識(shí)別和降解特定的底物，如P62 （sequestosome 1，一種泛素樣結(jié)合蛋白），多泛素化蛋白聚合物，細(xì)胞器，代謝產(chǎn)物或外界侵襲的微生物[6]。

自噬體的形成是自噬過程中具有標(biāo)志性的關(guān)鍵步驟。自噬體膜起源于何處仍然存在爭(zhēng)議，可能的來源包括高爾基復(fù)合體、內(nèi)涵體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體和質(zhì)膜。在哺乳動(dòng)物中，細(xì)胞自噬的核心機(jī)制至少涉及五組蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)復(fù)合物：（1）UNC-51-樣激酶（ULK）1/2復(fù)合物是必不可少的誘導(dǎo)蛋白；（2）磷脂酰肌醇3激酶（PtdIns3K）復(fù)合物參與囊泡成核；（3）自噬相關(guān)基因跨膜蛋白（ATG9L1）可能促進(jìn)其他來源的膜形成自噬體；（4）微管相關(guān)蛋白輕鏈3-磷酰胺乙醇胺（LC3-PE）和ATG12-ATG5-ATG16L復(fù)合物，這2個(gè)共軛系統(tǒng)參與了囊泡的伸長(zhǎng)和形成；（5）可能參與介導(dǎo)自噬后期步驟（囊泡融合和內(nèi)容物降解）的蛋白質(zhì)[7-8]。在自噬調(diào)節(jié)機(jī)制的上游，有一個(gè)復(fù)雜的信號(hào)網(wǎng)絡(luò)調(diào)控。mTOR信號(hào)通路，特別是雷帕霉素靶蛋白復(fù)合物1（mTORC1），是自噬的主要調(diào)節(jié)途徑。許多可以通過營(yíng)養(yǎng)、生長(zhǎng)因子和能量等信號(hào)激活的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，都可以整合并入mTORC1通路參與調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬[8]。同時(shí)一些不依賴mTOR通路的機(jī)制也被提出過。需注意自噬通常由多種細(xì)胞應(yīng)激所誘發(fā)，如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、缺氧應(yīng)激、氧化應(yīng)激、DNA損傷和病原體的侵入。

大多數(shù)情況下細(xì)胞自噬是為了維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)，而應(yīng)激誘導(dǎo)的自噬則是為了維持生存而采用的適應(yīng)性和保護(hù)性策略。在代謝應(yīng)激刺激下，細(xì)胞自噬產(chǎn)生氨基酸和脂類以供蛋白和腺苷三磷酸 （adenosine triphosphate，ATP）的合成。自噬可以清除蛋白聚合物、受損的細(xì)胞器和細(xì)胞內(nèi)的病原體。自噬也減少了DNA損傷和染色體不穩(wěn)定性。盡管自噬對(duì)細(xì)胞具有保護(hù)作用，但自噬也可能導(dǎo)致細(xì)胞死亡。然而，自噬并不是在生理或病理?xiàng)l件下直接殺死細(xì)胞[9]，雖然過度自噬會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞器大量降解，從而造成損害[10]。

自噬與細(xì)胞死亡、生存的關(guān)系非常復(fù)雜[11]。自噬與凋亡并不是對(duì)立的，反而共用很多相同的調(diào)節(jié)因子。因此自噬與凋亡可以拮抗、合作甚至互相促進(jìn)，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞的生存。自噬是否促進(jìn)細(xì)胞死亡仍存在爭(zhēng)議（自噬性細(xì)胞死亡）。因?yàn)椤白允尚约?xì)胞死亡”的定義尚未明確，現(xiàn)在認(rèn)為該定義需滿足以下條件：（1）當(dāng)細(xì)胞死亡時(shí)，caspase（半胱天冬氨酸蛋白酶）未被激活；（2）在死亡細(xì)胞中自噬過程增加，而不僅是自噬標(biāo)記物升高；（3）抑制自噬能夠防止細(xì)胞死亡。在哺乳動(dòng)物中[12]，使用多種自噬相關(guān)基因（ATGs）被敲除或更改的小鼠模型，都沒有明確的證據(jù)表明在生理?xiàng)l件下存在自噬性細(xì)胞死亡。大多數(shù)實(shí)驗(yàn)顯示，哺乳動(dòng)物細(xì)胞的自噬性細(xì)胞死亡需要在體外培養(yǎng)的條件下，并且伴有細(xì)胞凋亡缺陷如Bax-/-Bak-/-雙基因敲除[13]。這提示在未經(jīng)基因修飾的哺乳動(dòng)物細(xì)胞中，生理?xiàng)l件下的死亡是伴有自噬而非由自噬引起。

自噬參與動(dòng)物發(fā)育和細(xì)胞分化[14]。值得注意的是，細(xì)胞自噬參與了大量疾病的病理生理過程，包括神經(jīng)退行性疾病，癌癥，老化，傳染病和炎癥性疾病，心血管疾病，代謝性疾病，肺部疾病和腎臟疾病[15-16]。

二、受損腎臟中自噬的作用

（一）缺血再灌注損傷

缺血再灌注損傷中存在由冷保存誘導(dǎo)激活的自噬。氧化應(yīng)激可以上調(diào)自噬調(diào)控因子的表達(dá)，包括LC3和Beclin1，并促進(jìn)LC3依賴ATG-4的磷脂化，使自噬體成熟。利用3-甲基腺嘌呤抑制自噬可以增加小鼠的缺血再灌注損傷，說明自噬可能具有保護(hù)作用[17]。腎小管細(xì)胞近端和遠(yuǎn)端的Atg5缺陷可以導(dǎo)致腎功能受損，并使腎臟更易受到缺血損害，使得線粒體受損累積以及腎小管細(xì)胞凋亡和增殖[18-19]。這些結(jié)果在敲除了腎小管ATG7基因的小鼠中得到了證實(shí)，該小鼠比野生型小鼠對(duì)腎缺血再灌注損傷更敏感[20]?？偟膩碚f，自噬在缺血再灌注損傷中可以維持腎小管上皮細(xì)胞的完整性。

（二）缺血應(yīng)激下的非常規(guī)蛋白分泌

現(xiàn)有的證據(jù)表明，自噬參與細(xì)胞間通訊網(wǎng)絡(luò)的建立，特別是在細(xì)胞凋亡過程中，自噬調(diào)節(jié)細(xì)胞死亡的微環(huán)境和結(jié)果。在應(yīng)激條件下（如饑餓）常規(guī)的分泌受到抑制（分泌蛋白質(zhì)的經(jīng)典途徑需要N-末端的信號(hào)肽，它允許多肽在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)經(jīng)過翻譯后進(jìn)行逆向易位、折疊和質(zhì)量控制、運(yùn)輸?shù)礁郀柣w，從而以囊泡形式轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞膜、融合并分泌），而非常規(guī)分泌途徑可能被激活，并成為細(xì)胞間通訊的主要模式。目前并不清楚這些非常規(guī)分泌的蛋白和免疫分子是如何釋放到細(xì)胞外的。參與自噬的成分，包括LC3，ATG16L1和溶酶體相關(guān)膜蛋白，也可能來自營(yíng)養(yǎng)缺乏的、自噬體積聚的內(nèi)皮細(xì)胞[21]。這個(gè)過程依賴于caspase激活，表明細(xì)胞凋亡可以促進(jìn)自噬。人血管內(nèi)皮細(xì)胞饑餓條件下釋放的囊泡已被確定與凋亡和自噬有關(guān)[22]。這些囊泡不同于經(jīng)典的凋亡小體，因?yàn)樗鼈儾缓屑?xì)胞核成分，并且不依賴Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶（Rock）1的活化。它們反而含有不同成熟階段的自噬體以及線粒體。這些囊泡也富含危險(xiǎn)分子信號(hào)、ATP，可能在缺血條件刺激下參與先天免疫的調(diào)節(jié)。

（三）自噬作為缺血再灌注損傷的治療靶點(diǎn)

設(shè)計(jì)具有調(diào)節(jié)自噬功能的藥物、并在臨床上用于預(yù)防缺血再灌注損傷的最大挑戰(zhàn)是生物靶向藥物的特異性。迄今為止最好的成功藥物是西羅莫司，通過抑制mTORC1來誘導(dǎo)細(xì)胞自噬，但是實(shí)驗(yàn)室和臨床證據(jù)表明它會(huì)阻礙腎臟功能恢復(fù)[23-24]。事實(shí)上，移植腎功能延遲恢復(fù)與急性腎小管壞死有關(guān)，決定于受損的腎小管上皮細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期和增殖的能力，而mTOR抑制劑可以抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此降低了細(xì)胞的增殖能力[23,25]。其他調(diào)節(jié)自噬藥物也存在同樣的問題，如巴弗洛霉素，氯喹或3-甲基腺嘌呤，它們具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，不僅調(diào)控自噬，而且也可以加重組織損傷。比如3-甲基腺嘌呤通過抑制I類PI3K信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞死亡，又能通過抑制Ⅲ類PI3K誘導(dǎo)自噬，進(jìn)而抑制細(xì)胞死亡。故而需要更精確的途徑來微調(diào)自噬。比如多肽類的Tat-beclin1，是自噬蛋白Beclin1的一部分，可以與HIV-1的Nef結(jié)合，可以強(qiáng)效誘導(dǎo)自噬[2]。Tat是種來源于HIV的、輔助病毒進(jìn)入細(xì)胞的蛋白質(zhì)。當(dāng)與Beclin1融合后，Tat可以使Beclin1不需要經(jīng)過轉(zhuǎn)染即可進(jìn)入細(xì)胞。這種多肽能特異性激活自噬，從而清除蛋白質(zhì)聚合物和病毒，但沒有其他自噬方面的副作用。

三、自噬與免疫抑制藥物

（一）環(huán)孢素A的腎毒性

環(huán)孢素可以誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激[26]。受內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激影響的細(xì)胞會(huì)激活未折疊的蛋白質(zhì)，以減少蛋白負(fù)荷并增加初期蛋白折疊，促進(jìn)細(xì)胞保護(hù)[27]。最近的證據(jù)表明，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可以啟動(dòng)自噬，具體機(jī)制可能包括蛋白激酶RNA樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶和真核起動(dòng)因子2α，從而調(diào)節(jié)自噬的表達(dá)、隔離膜的形成和IRE1激活（JNK和XBP1可能調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬）。特別是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激條件下，自噬已被證明能夠減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和減少細(xì)胞死亡[28]。環(huán)孢素誘導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可以調(diào)節(jié)自噬。在體外培養(yǎng)的人上皮細(xì)胞中，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激通過激活自噬以抵抗環(huán)孢素的傷害。如果特異性敲除Beclin1來抑制自噬，那么環(huán)孢素誘導(dǎo)的腎小管細(xì)胞的細(xì)胞毒性會(huì)增強(qiáng)，這表明了自噬可以減輕環(huán)孢素的毒性[29]。大鼠環(huán)孢素腎毒性模型同樣證實(shí)，環(huán)孢素增加了腎臟中LC3-Ⅱ和Beclin1的表達(dá)，且與劑量相關(guān)。相較于環(huán)孢素組，使用環(huán)孢素聯(lián)合普伐他汀或N-乙酰半胱氨酸降低了尿中8-羥基-2'-脫氧鳥苷濃度，繼而降低了LC3-Ⅱ表達(dá)和p62陽(yáng)性的細(xì)胞數(shù)，表明環(huán)孢素A誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激可以激活細(xì)胞自噬[30]。

（二）西羅莫司的副作用

西羅莫司用于預(yù)防急性排斥反應(yīng)。西羅莫司通過抑制mTOR信號(hào)通路以誘導(dǎo)細(xì)胞自噬。西羅莫司不抑制鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶，因此，它缺乏鈣調(diào)磷酸酶抑制劑類的腎毒性資料。在臨床實(shí)踐中，西羅莫司最初是作為鈣調(diào)磷酸酶抑制劑的輔助用藥，而現(xiàn)在常用于低腎毒性的藥物方案中。但西羅莫司有一系列的不良事件，包括蛋白尿、系統(tǒng)性炎癥、水腫、皮膚疹、口瘡、肺炎、血脂異常和糖尿病[31]。雖然大部分西羅莫司導(dǎo)致的副作用被認(rèn)為與抑制mTOR相關(guān)，但確切的機(jī)制尚不清楚，自噬對(duì)其他mTOR相關(guān)的生物效應(yīng)（如翻譯的起始和延伸）的影響也不明確。沒有明確的證據(jù)證實(shí)自噬導(dǎo)致了這些副作用，但是鑒于mTOR和自噬在足細(xì)胞的抵抗應(yīng)激[32-33]和在調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)[34-35]中的重要地位，可以猜測(cè)，通過抑制mTOR通路介導(dǎo)的自噬與這些副作用有關(guān)。但目前證據(jù)并不多。在西羅莫司引起的副作用中，西羅莫司誘導(dǎo)的β細(xì)胞損傷可能涉及細(xì)胞自噬[36]。這項(xiàng)研究利用了胰島移植小鼠模型，在西羅莫司治療后出現(xiàn)明顯增強(qiáng)的細(xì)胞自噬，導(dǎo)致了胰島β細(xì)胞受損，使得胰島移植手術(shù)后移植物失功。這些結(jié)果還表明，3-甲基腺嘌呤改善了體外和體內(nèi)的西羅莫司相關(guān)的β細(xì)胞失功。雖然這只是初步的、未涉及腎臟移植的研究，仍然可以推測(cè)自噬可能直接參與西羅莫司的副作用。

四、自噬和免疫調(diào)節(jié)

自噬調(diào)節(jié)先天免疫和獲得性免疫，并具有明顯相反的調(diào)節(jié)結(jié)果。自噬可以減輕炎癥，自噬能降解蛋白聚合物和變性的線粒體，而這兩者可以加劇氧化應(yīng)激、激活炎癥[5,37]，同時(shí)自噬可以調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的非常規(guī)分泌；但它又促進(jìn)T細(xì)胞的克隆增殖（為這一過程提供營(yíng)養(yǎng)），促進(jìn)胸腺孵育，提供MHC Ⅰ類和Ⅱ類抗原呈遞（以及交叉呈遞）的多肽[38-39]?？偟膩碚f，自噬促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)病原體清除。此外，許多觸發(fā)免疫反應(yīng)的物質(zhì)可以激活細(xì)胞自噬，如Toll樣或nod樣受體配體或者炎性細(xì)胞因子[37,40]。

自噬在調(diào)控先天性或獲得性免疫功能方面的復(fù)雜機(jī)制尚未被研究透徹，而這些機(jī)制與移植和自身免疫病相關(guān)。最近，自噬在腎移植中的免疫調(diào)節(jié)作用出現(xiàn)爭(zhēng)議[19,41]。比如，ATG5缺陷的小鼠腎臟腎小管，受到缺血再灌注損傷時(shí)，與同窩小鼠相比其巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)相對(duì)較少[19]。這表明，自噬可能抑制無菌性炎癥反應(yīng)，但不知道這是不是死亡細(xì)胞（可以釋放能激活危險(xiǎn)受體的細(xì)胞內(nèi)容物）減少所致，或者是不是自噬對(duì)炎癥的特異性表現(xiàn)。后者這一假說可以由以下觀察到的結(jié)果證實(shí)：ATG-5缺陷的腎小管中大量累積變性的線粒體，形成強(qiáng)大的促炎劑[19]。除了缺血性應(yīng)激，細(xì)胞因子的刺激也可以激活腎臟細(xì)胞的自噬。干擾素γ是移植腎穩(wěn)態(tài)平衡的主要調(diào)控因子。干擾素γ在炎癥過程中有重要的作用，使得它也與移植特別相關(guān)，影響移植物的存活[42]。自噬和干擾素γ相互作用。干擾素γ通過Beclin1機(jī)制在小鼠的免疫和非免疫細(xì)胞中促進(jìn)自噬，而干擾素γ介導(dǎo)的抗菌效果需要自噬參與[43-44]。人腎小管上皮細(xì)胞中干擾素γ激活了自噬。干擾素γ誘導(dǎo)色氨酸代謝，從而激活組蛋白乙酰化酶合成通用控制蛋白2激酶，導(dǎo)致自噬激活劑eIF2a的磷酸化[41]。自噬在干擾素γ作用下會(huì)減少分泌炎性細(xì)胞因子，這與以前的發(fā)現(xiàn)相一致，即自噬減少了IL-1β的產(chǎn)生，繼而影響了炎癥小體和變性的線粒體的破壞作用[45]。

五、自噬與腎臟移植缺血/再灌注損傷（ischemiareperfusion injury，I/R）

腎臟I/R常常發(fā)生于腎移植手術(shù)及嚴(yán)重創(chuàng)傷以后，是腎移植手術(shù)過程中一種常見的臨床病理、生理現(xiàn)象，并成為影響腎移植術(shù)后患者康復(fù)及生存率的重要因素[46]?，F(xiàn)已證實(shí)，全身組織器官很多都存在I/R現(xiàn)象，而在腎臟移植I/R過程中，腎小管細(xì)胞自噬存在的調(diào)控機(jī)制有哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信號(hào)通路、氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激、缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）及其轉(zhuǎn)錄目標(biāo)促凋亡線粒體蛋白（BNIP3）、腫瘤抑制基因P53、Unc-51樣自噬激活激酶1 （ULK1）、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因（Bcl-2）家族蛋白。自噬中的 3 種關(guān)鍵的蛋白復(fù)合體，即 mTORC1、ULK1 及 Beclin-1/PI3KⅢ型蛋白復(fù)合體調(diào)節(jié)此過程。自噬啟動(dòng)后，由兩類不同的泛素樣蛋白系統(tǒng)執(zhí)行著自噬體的延長(zhǎng)，包括ATG5-ATG12通路和泛素樣微管相關(guān)蛋白1 輕鏈3 （LC3，ATG8）結(jié)合系統(tǒng)。腎臟中的足細(xì)胞及近端小管特異性缺失 Atg5或Atg7的小鼠表現(xiàn)出累積錯(cuò)誤折疊的蛋白質(zhì)和變形的細(xì)胞器，說明腎臟中的足細(xì)胞及近端小管易被I/R。腎臟I/R 的大鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭酗@示受損的腎小管中Beclin-1和LC3的表達(dá)升高，缺血的情況下，如果Bcl-2過度表達(dá)，自噬將會(huì)下降，腎臟受損情況好轉(zhuǎn)；并有研究對(duì)GPF-LC3的轉(zhuǎn)基因小鼠進(jìn)行I/R處理，自噬發(fā)生的同時(shí)，腎小管也隨之出現(xiàn)了形態(tài)學(xué)的破壞；而對(duì)于Bcl-2/GFP-LC3的雙轉(zhuǎn)基因小鼠，自噬的發(fā)生及腎小管形態(tài)學(xué)破壞程度均減少[47]。

現(xiàn)已被證實(shí)可作為自噬標(biāo)記物有兩種，Beclin-1是促進(jìn)自噬發(fā)生的始動(dòng)因子，LC3-Ⅱ是位于自噬體上的唯一蛋白[48]。研究發(fā)現(xiàn)，丙酮酸乙酯可以抑制I/R，其過程是通過抑制Beclin-1和LC3的表達(dá)，減弱自噬的強(qiáng)度，以達(dá)到抑制I/ R 的作用[49]。并有研究表示，可溶性晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（sRAGE）作為內(nèi)源性保護(hù)物質(zhì)，可抑制I/R引起自噬。亦有研究顯示，靜脈注射飽和氫氣生理鹽水可通過抑制自噬減少I/R[50]。

缺血預(yù)處理的過程中，許多內(nèi)源性機(jī)制介導(dǎo)保護(hù)著腎臟，以免腎臟遭到 I/R，而其機(jī)制有抑制細(xì)胞凋亡、儲(chǔ)存 ATP、產(chǎn)生促存活細(xì)胞因子及抗炎因子。在這期間可誘導(dǎo)自噬發(fā)生，通過促進(jìn)細(xì)胞內(nèi) ATP 形成，以減輕炎癥反應(yīng)來獲取細(xì)胞生存。

六、展望

在移植免疫相關(guān)的細(xì)胞自噬資料非常少，但它可以幫助理解免疫相關(guān)過程是如何調(diào)節(jié)的。有很多值得研究的途徑，可以將自噬整合于危險(xiǎn)模型，這一模型可以將無菌性炎癥（如I/R）與獲得性免疫聯(lián)系起來。再如，線粒體產(chǎn)生的ATP是一種危險(xiǎn)信號(hào)，可以激活樹突狀細(xì)胞表面的嘌呤受體，且已證實(shí)早期凋亡細(xì)胞在膜通透性改變之前，需要自噬參與才能釋放ATP[51]。其他還有自噬小體中大分子物質(zhì)如何被處理、消化，抗原呈遞細(xì)胞如何修飾免疫多肽，以及修飾后多肽的作用[52]。除了炎癥，自噬在調(diào)節(jié)組織穩(wěn)態(tài)的其它生物學(xué)功能也剛剛開始研究，比如纖維化，這是移植腎發(fā)生組織學(xué)改變最重要的特征[53]。

如何在臨床實(shí)踐中監(jiān)測(cè)（診斷和治療）自噬仍有待解決。到目前為止，在人體組織中利用免疫組化方法檢測(cè)細(xì)胞自噬能力的結(jié)果仍不一致，而且可行性也較差[54]。由于自噬是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的過程，所以必須通過“通量（f l ux）”來計(jì)算，并且需要藥物來抑制自噬小體降解，而這種通量幾乎不可能在活檢標(biāo)本中檢測(cè)，因?yàn)闃?biāo)本是靜態(tài)的。細(xì)胞中出現(xiàn)大量的自噬體不代表自噬體的生物合成被激活，因?yàn)槿苊阁w的降解作用可以被抑制，也會(huì)產(chǎn)生大量自噬體。研究自噬機(jī)制的最大挑戰(zhàn)是它不是通過轉(zhuǎn)錄來調(diào)控，也沒有直接可用的標(biāo)記物。潛在可用的標(biāo)記物，如P62，可以在自噬過程中定量調(diào)節(jié)，但其表達(dá)缺乏特異性，除了自噬還有氧化應(yīng)激等也可以調(diào)節(jié)其表達(dá)。