慢性鼻竇炎黏膜組織中TLR-2的表達(dá)研究

黎潤球 蔣迪 何錦添

實踐研究證實,免疫功能低下為慢性鼻竇炎的主要發(fā)病原因。因此,長期以來我國醫(yī)療領(lǐng)域一直將提高機(jī)體免疫功能作為防治慢性鼻竇炎的主要目標(biāo)［1,2］。近年來不斷有研究發(fā)現(xiàn),活化的TLR-2受體能夠通過信號通路轉(zhuǎn)導(dǎo)介導(dǎo)黏膜組織固有的免疫反應(yīng),可能與黏膜炎性反應(yīng)性疾病的發(fā)生存在密切關(guān)系［3-5］。為進(jìn)一步明確慢性鼻竇炎的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制,本研究對TLR-2受體慢性鼻竇炎黏膜組織中表達(dá)變化的臨床意義進(jìn)行探討,現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本科2017年6月～2018年9月收治的96例慢性鼻竇炎患者作為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①根據(jù)病因及鼻內(nèi)鏡檢查明確診斷為慢性鼻竇炎；②成年患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他免疫系統(tǒng)疾??；②復(fù)發(fā)性慢性鼻竇炎；③入院前2周內(nèi)服用過抗菌藥物。本組患者中,男50例,女46例；年齡23～71歲,平均年齡(45.21±5.07)歲。本研究已事先通過醫(yī)院倫理委員會審核,患者及其家屬均知情、同意,并簽署研究知情同意書。

1.2 方法 采用相同的藥物方案對96例患者實施治療,臨床用藥為鼻淵舒口服液、羅紅霉素膠囊。

于患者治療前在鼻內(nèi)鏡下采集病變部位黏膜組織和正常鼻黏膜組織,于患者治療后在鼻內(nèi)鏡下采集病變部位黏膜組織進(jìn)行TLR-2免疫組化法分析,具體步驟為：甲醛規(guī)定標(biāo)本,梯度酒精脫水、浸泡,石蠟包埋,自動切片機(jī)連續(xù)切成厚度為4 μm的切片,檸檬酸緩沖液(pH=6.0)進(jìn)行抗原修復(fù),3%過氧化氫進(jìn)行過氧化物酶活性滅活,滴加一抗(兔抗TLR-2),4℃濕盒中過夜,滴加二抗,37℃恒溫箱中孵育30 min,陰性對照為磷酸緩沖鹽溶液,DAB染色,蘇木精復(fù)染,梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片,高倍顯微鏡下觀察檢測結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn) 比較96例患者治療前病變部位黏膜組織和正常鼻黏膜組織的TLR-2表達(dá)情況以及治療前后病變部位黏膜組織的TLR-2的表達(dá)情況。TLR-2陽性判定標(biāo)準(zhǔn)［6］：細(xì)胞質(zhì)染色,呈鮮紅色,隨機(jī)選取5個高倍鏡視野,染色細(xì)胞比例＞10%即判定TLR-2為陽性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS23.0統(tǒng)計學(xué)軟件對研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前病變部位黏膜組織、正常鼻黏膜組織的TLR-2表達(dá)情況比較 患者治療前病變部位黏膜組織TLR-2陽性表達(dá)率為81.25%(78/96),明顯高于正常鼻黏膜組織的22.92%(22/96),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=65.447,P=0.000＜0.05)。

2.2 治療前后病變部位黏膜組織的TLR-2表達(dá)情況比較 患者治療后的病變部位黏膜組織TLR-2陽性表達(dá)率為30.21%(29/96),低于治療前的81.25%(78/96),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=50.686,P=0.000＜0.05)。

3 討論

慢性鼻竇炎是指發(fā)生在鼻竇的慢性化膿性炎性反應(yīng),在我國臨床十分常見。發(fā)病后臨床癥狀主要表現(xiàn)為流膿涕和嗅覺障礙,病情易反復(fù)發(fā)作,可導(dǎo)致患者生活質(zhì)量顯著下降,甚至?xí)黾踊颊甙l(fā)生其他慢性疾病的風(fēng)險［7-9］。因此,深入了解該疾病的發(fā)生、發(fā)展機(jī)制,指導(dǎo)該疾病防治方案的制定具有重要意義。

TLR-2為TLRs的一種亞型,其與黏膜組織炎性反應(yīng)的關(guān)系為近年來的研究熱點。本研究探討TLR-2在慢性鼻竇炎黏膜組織中表達(dá)變化的作用發(fā)現(xiàn),患者治療前病變部位黏膜組織TLR-2陽性表達(dá)率為81.25%(78/96),明顯高于正常鼻黏膜組織的22.92%(22/96),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=65.447,P=0.000＜0.05)。患者治療后的病變部位黏膜組織TLR-2陽性表達(dá)率為30.21%(29/96),低于治療前的81.25%(78/96),差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=50.686,P=0.000＜0.05)。

由此得出,鼻黏膜組織中TLR-2的陽性表達(dá)可能在患者疾病發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮著促進(jìn)作用。分析原因為：TLRs其本質(zhì)是一種能夠通過識別病原體和內(nèi)源性配體激活免疫系統(tǒng)配體的穿膜蛋白,TLR-2也具有與TLRs相似的生理功能,其不僅能夠識別多種病原體表面的病原分子模式,而且能產(chǎn)生多種促炎性反應(yīng)的細(xì)胞因子［10-12］。

綜上所述,鼻黏膜組織中TLR-2的陽性表達(dá)可能為慢性鼻竇炎發(fā)生和進(jìn)展的危險因素,但由于現(xiàn)階段國內(nèi)相關(guān)研究較少,故本研究所得結(jié)論的客觀性還有待驗證。