朱玉 秦嫘 何寶國(guó)
(齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院 161042)
除清潔級(jí)動(dòng)物應(yīng)排除的病原外,不攜帶主要潛在感染或條件致病和對(duì)科學(xué)實(shí)驗(yàn)干擾大的病原,這類動(dòng)物被稱為無(wú)特殊病原體 (Specific Pathogen Free,SPF) 動(dòng)物。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,不同種屬、同一種屬中不同品系的動(dòng)物對(duì)藥理反應(yīng)也不同,如果應(yīng)用了不健康的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,還可能無(wú)法獲得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),致使實(shí)驗(yàn)失敗。由于SPF 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物遺傳背景明確,健康狀況優(yōu)良,實(shí)驗(yàn)反應(yīng)敏感,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確,常常被用來(lái)做藥物和毒性反應(yīng)實(shí)驗(yàn),但SPF 動(dòng)物對(duì)飼養(yǎng)環(huán)境要求較高,對(duì)管理水平要求嚴(yán)格,所以必須飼養(yǎng)在屏障系統(tǒng)中,實(shí)行嚴(yán)格的微生物控制才能符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)。
管理人員應(yīng)為醫(yī)學(xué)、動(dòng)物學(xué)等相關(guān)專業(yè)人員,并經(jīng)嚴(yán)格的專業(yè)培訓(xùn),儀器、設(shè)備操作熟練,能認(rèn)真執(zhí)行無(wú)菌操作,嚴(yán)格控制污染,熟悉相關(guān)各物品等無(wú)菌操作方法和程序,并嚴(yán)格按照方法執(zhí)行。管理人員要有強(qiáng)烈的責(zé)任心強(qiáng),要經(jīng)常檢查各種儀器設(shè)施的運(yùn)轉(zhuǎn)情況,按照各儀器、設(shè)備使用、維護(hù)方法進(jìn)行操作,做到正確操作、常檢查、勤清潔。
飼養(yǎng)SPF 級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物單位必須擁有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證;實(shí)驗(yàn)動(dòng)物所需的飼料來(lái)源合理,采用正確方法處理后再進(jìn)行飼喂,必須從具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料生產(chǎn)許可證的單位購(gòu)買,所用飼料經(jīng)過(guò)高壓或輻照滅菌后再喂給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物;沒(méi)有特殊要求時(shí),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物采用自由飲水,且需要飲用經(jīng)過(guò)凈化和消毒處理后的水;使用優(yōu)質(zhì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物墊料,做到勤更換;勤觀察,即觀察動(dòng)物精神狀態(tài)、是否打架、吃食和飲水情況等,把不健康的動(dòng)物及時(shí)取出并處理,要時(shí)刻觀察飼養(yǎng)的環(huán)境指標(biāo):包括溫度(18~29℃)日溫差 (3℃以內(nèi))、相對(duì)濕度 (適宜 40%~70%)、換氣次數(shù) (l0 次/h)、氣流速度 (0.18m/s 以內(nèi))、壓差(25Pa)、潔凈度 (一萬(wàn)級(jí))、氨濃度 (l5mg/m3)、噪音 (≤60dB)、光照度 (150~300Lux)。
進(jìn)出屏障系統(tǒng)室內(nèi)要嚴(yán)格按照正確流向走動(dòng):人員進(jìn)出屏障系統(tǒng)流向:一更衣室→二更衣室→風(fēng)淋→潔凈走廊→飼養(yǎng)區(qū)→實(shí)驗(yàn)區(qū)→次潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統(tǒng);物品進(jìn)出屏障系統(tǒng)流向:雙扉高壓消毒器 (傳遞窗、渡槽) →潔凈儲(chǔ)物間→潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統(tǒng)→洗消間;動(dòng)物進(jìn)出屏障系統(tǒng)流向:外運(yùn)→檢疫室→繁殖區(qū)→潔凈走廊→實(shí)驗(yàn)區(qū)→次潔凈走廊→緩沖間→出屏障系統(tǒng)。
SPF 動(dòng)物飼養(yǎng)區(qū)及配套設(shè)施啟用前,需經(jīng)過(guò)多次清潔、除塵、清洗、抹拭。然后用甲醛+高錳酸鉀煙熏 24~48h 后,開啟送風(fēng)排風(fēng)系統(tǒng)24~48h,將殘留的刺激氣味排凈,工作人員換上高壓消毒的凈化防塵服到飼養(yǎng)區(qū)內(nèi),將煙熏用的用具清理好,用草酸液將濺出的高錳酸鉀污跡抹去,搞好衛(wèi)生。并通過(guò)省級(jí)動(dòng)物監(jiān)測(cè)部門的技術(shù)監(jiān)測(cè),獲得設(shè)施合格證后方可使用。嚴(yán)格控制動(dòng)物質(zhì)量,一定要在國(guó)家動(dòng)物種子庫(kù)引種,以保證動(dòng)物的質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)化要求。
飼料應(yīng)無(wú)菌、高營(yíng)養(yǎng),每次投放3~4d 的飼料量;按雄:雌比例為1:4~5,隨機(jī)同籠;每只動(dòng)物均有記錄掛卡,詳細(xì)記錄動(dòng)物的種屬、品系、代號(hào) (名字)、出生日期、留種日期、交配日期和與配動(dòng)物代號(hào)、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)仔數(shù)、存活狀況、斷奶日期,正在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)有實(shí)驗(yàn)記錄卡,記錄動(dòng)物的種屬、品系、性別、實(shí)驗(yàn)性質(zhì)、組別和編號(hào)、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮瓦M(jìn)行結(jié)果,并將記錄卡完整保存。飼養(yǎng)管理人員如發(fā)現(xiàn)有死亡的動(dòng)物時(shí),應(yīng)立即取出動(dòng)物尸體并及時(shí)處理后記錄,同時(shí)將死亡動(dòng)物所用物品消毒處理。