王萬興 ，房 巖 ，張樹敏

（1.長春師范大學，吉林 長春 130032；2.吉林省農(nóng)業(yè)科學院，吉林 長春 130124）

繁殖性狀是豬重要的經(jīng)濟性狀，繁殖性狀的高低可直接影響?zhàn)B豬業(yè)的生產(chǎn)效益和經(jīng)濟利益。近年來，如何提高豬的繁殖性狀備受豬育種學家和養(yǎng)豬生產(chǎn)者的關(guān)注。但繁殖性狀的遺傳力極低，通過傳統(tǒng)的育種方法對其進行改良進展十分緩慢。隨著分子遺傳學和現(xiàn)代生物技術(shù)的蓬勃發(fā)展，豬重要經(jīng)濟性狀的標記輔助選擇（Marker Assisted Selection，MAS）技術(shù)不斷興起。

由于視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）與維生素A在動物體內(nèi)的轉(zhuǎn)運及吸收有關(guān)，視黃酸受體γ（RARG）與上皮細胞的生長、分化及胎兒發(fā)育和繁殖等過程相關(guān)，因此二者在動物繁殖過程中扮演者重要角色。目前已有大量研究表明，RBP4和RARG基因?qū)ωi的產(chǎn)仔數(shù)等性狀具有一定影響，可作為豬繁殖性能相關(guān)的候選基因。文章綜述了RBP4和RARG基因與豬繁殖性狀關(guān)系的研究進展，以期為豬繁殖性狀的標記輔助選擇提供參考。

1 視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）基因

1.1 視黃醇結(jié)合蛋白（RBP）

視黃醇（維生素A）具有促進精子和卵子形成、生長、發(fā)育等作用，對動物繁殖過程至關(guān)重要。Brief等[1]研究表明為妊娠母豬補充維生素A可以增加其產(chǎn)仔數(shù)。視黃醇對孕體能否發(fā)揮作用決定于其是否能從母體毛細血管跨越上皮細胞的幾層邊界傳遞到子宮腔[2]，其通過與視黃醇結(jié)合蛋白（Retinol-Binding Protein，RBP）結(jié)合傳遞至靶細胞發(fā)揮作用。Trout等[3]研究顯示，RBP在豬妊娠的第12天左右高度表達，提示此時期視黃醇和RBP發(fā)揮重要作用。

1.2 RBP4基因與母豬繁殖性狀

視黃醇結(jié)合蛋白4（RBP4）基因在豬妊娠的關(guān)鍵時期表達[4]。Messer等[5]將RBP4基因定位于豬的第14號染色體上，并在法國2個大白豬品系中研究了該基因的基因型與繁殖性能的關(guān)系，結(jié)果顯示，在法國超高產(chǎn)大白豬（LWH）中，該基因在窩產(chǎn)仔數(shù)上的加性效應(yīng)為0.52±0.3頭/窩，在法國對照組大白豬（LW）中窩產(chǎn)仔數(shù)的加性效應(yīng)為0.45±0.43頭/窩，表明RBP4基因?qū)ωi繁殖性能有顯著影響。之后，Drogemuller等[6]研究證實，RBP4基因MSPⅠ位點A等位基因能顯著增加德系長白和杜洛克的產(chǎn)仔數(shù)。

Rothschild[7]利用PCR-RFLP法將RBP4基因進行基因分型，共得到3種基因型，其與母豬產(chǎn)仔數(shù)的關(guān)聯(lián)分析表明，在3種基因型中，TNB和NBA均為11＞12＞22基因型，所有品系中，等位基因1的作用都是有利的。TNB上每窩具有0.28頭的加性效應(yīng)，NBA上每窩具有0.15頭的加性效應(yīng)，表明RBP4基因?qū)@些商品系的產(chǎn)仔數(shù)具有顯著影響。并指出從該研究中很難確定RBP4是否是影響豬產(chǎn)仔數(shù)的主效基因，亦或是它與具有該效應(yīng)的基因或基因座連鎖。

趙偉[8]采用PCR-RFLP法對民豬等6個品種的母豬RBP4基因MSPⅠ多態(tài)位點進行檢測，發(fā)現(xiàn)該多態(tài)位點位于豬RBP4基因外顯子2-5的區(qū)域內(nèi)，有3種基因型（AA，AB，BB），且不同基因型頻率及等位基因頻率在不同群體間的分布差異極顯著。在民豬群體中，RBP4基因MSPⅠ位點多態(tài)性對其總產(chǎn)仔數(shù)、21日齡仔豬數(shù)及斷奶仔豬數(shù)均有顯著影響，并進一步確定MSPⅠ位點的AA基因型是民豬產(chǎn)仔數(shù)的有利基因型。

翟騰蛟等[9]采用PCR-RFLP技術(shù)在大白豬RBP4基因MSPⅠ酶切位點上檢測到三種基因型，不同基因型與繁殖性狀關(guān)系的分析結(jié)果顯示，RBP4基因多態(tài)性對大白豬產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、健仔數(shù)及初生窩重的影響表現(xiàn)為顯著或極顯著。表明該突變位點可用于大白豬的標記輔助選擇。

朱朋[10]通過PCR-SSCP法對長白豬、大白豬及皖南黑豬的RBP4基因多態(tài)性進行檢測，在RBP4基因第三內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)一多態(tài)位點，該多態(tài)位點有3種基因型，分別為AA，AB和BB。關(guān)聯(lián)分析表明，RBP4基因第三內(nèi)含子突變位點多態(tài)性對長白豬、大白豬及皖南黑豬的總產(chǎn)仔數(shù)和產(chǎn)活仔數(shù)均具有重要影響，并指出RBP4基因可作為這3個品種母豬產(chǎn)仔數(shù)相關(guān)的候選基因。

然而，也有研究表明RBP4基因?qū)δ肛i繁殖性狀無顯著影響。Linville[11]在對長白豬和大白豬的研究中，沒有檢測到MSPⅠ位點對繁殖性能的影響。李隱俠[12]利用PCR-RFLP法分析蘇淮母豬RBP4基因的多態(tài)性，并研究其不同基因型與總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、仔豬初生重、20日齡重等繁殖性狀的關(guān)系，結(jié)果顯示RBP4基因多態(tài)性對蘇淮豬繁殖性能無顯著影響。楊國偉[13]采用同種方法分析野豬×大白豬F1代母豬的RBP4基因多態(tài)性，同時研究不同基因型之間仔豬初生重和30日齡重的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)RBP4基因多態(tài)性對這兩個性狀的影響均不顯著。此外，馬力鵬[14]通過PCR-RFLP技術(shù)檢測了685頭大白豬的RBP4基因多態(tài)性，共發(fā)現(xiàn)3種基因型，將各基因型與大白豬產(chǎn)仔數(shù)進行關(guān)聯(lián)分析，結(jié)果表明大白豬RBP4基因多態(tài)性對初產(chǎn)母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、健仔數(shù)均無顯著影響。

2 視黃酸受體γ（RARG）基因

2.1 視黃酸（RA）及其受體

視 黃 酸（Retinol Acid，RA）屬于維生素A 衍生物的一種。在細胞分化、組織維持及動物繁殖等過程中具有重要作用[15]。視黃酸受體家族（RARs）是由視黃酸誘導的轉(zhuǎn)錄增強因子，屬于類固醇和甲狀腺激素受體的超家族。視黃酸受體 γ（retinoic acid receptor- gamma，RARG）屬于視黃酸受體家族中的一員。對RAR mRNA在豬囊胚（妊娠第10～12天）中的表達研究顯示，mRARG在胚泡生長的所有階段中均有表達，其中在28 mm至早期管狀階段中表達水平最高[16]。小鼠RARG也在小鼠增殖的胚胎癌細胞中高度表達[17]。此外，有研究表明，RARG可以在豬胚泡發(fā)育的快速形態(tài)發(fā)生時期調(diào)節(jié)基因表達[16]，而這是胚胎存活的關(guān)鍵時期。

2.2 RARG基因與母豬繁殖性狀

RARG基因已被定位于人的12號染色體q13區(qū)域，小鼠的15號染色體F帶和大鼠的7號染色體[18]。基于人和小鼠RARG基因的位置，將豬RARG基因定位在5號染色體上[19]。

楊國偉等[20]采用RT-PCR方法研究不同日齡大白豬RARG基因表達規(guī)律，發(fā)現(xiàn)在大白豬整個生長發(fā)育期內(nèi)，RARG基因在子宮和卵巢中均有表達，且在子宮中持續(xù)表達高水平的RARG。提示該基因可能參與豬的生殖激素的分泌與功能行使，也為該基因作為豬繁殖性狀相關(guān)的候選基因提供了理論依據(jù)。

李俊[21]通過PCR-SSCP法在從江香豬母豬RARG基因中篩選出4個SNP位點（C201T，A55G，C1646T和 C128T）， 在 C201T位點，EE為優(yōu)勢基因型，E為優(yōu)勢等位基因；在A55G位點上，AG基因型頻率最高，為優(yōu)勢基因型，G為優(yōu)勢等位基因；在C1464T位點，CT基因型為優(yōu)勢基因型，T為優(yōu)勢等位基因；在C128T位點，AB基因型為優(yōu)勢基因型，等位基因B為優(yōu)勢基因。關(guān)聯(lián)分析結(jié)果顯示，RARG基因C201T和A55G 位點不同基因型對從江香豬的總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)及乳頭數(shù)均無顯著影響；而C1464T、C128T位點多態(tài)性對從江香豬總產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)及乳頭數(shù)均有顯著影響，并推測等位基因C和等位基因A可能為有利等位基因，CC基因型和AA基因型為有利基因型。

趙偉[8]通過PCR-SSCP技術(shù)，研究民豬、長白豬等6個品種的RARG基因多態(tài)性及其與繁殖性能的關(guān)系，結(jié)果顯示，在豬RARG基因內(nèi)含子3上存在1個SNP位點，該位點的多態(tài)性是由A突變?yōu)镚引起的，有三種基因型。檢測發(fā)現(xiàn)，RARG基因內(nèi)含子3多態(tài)位點在不同群體間的基因型頻率和等位基因頻率差異極顯著。相關(guān)性分析表明，RARG基因第三內(nèi)含子多態(tài)性對民豬的21日齡仔豬均勻度具有顯著影響，其中AA基因型為有利基因型。該位點多態(tài)性對大白豬的產(chǎn)活仔數(shù)具有顯著影響，AA基因型為有利基因型；對長民雜交豬的仔豬初生窩重具有極顯著影響，BB基因型為有利基因型；但在長白、杜洛克及長大二元群體中，不同基因型之間的產(chǎn)活仔數(shù)及仔豬初生窩重均無顯著差異。

3 小結(jié)

綜上可知，RBP4和RARG基因?qū)δ肛i繁殖性狀的影響在不同的試驗群體及研究品種（品系）中存在一定差異。由于繁殖性狀受多種因素的共同影響，因此由上述研究尚不能確定RBP4和RARG基因是否為影響豬繁殖性狀的主效基因，在利用這兩個基因?qū)δ肛i繁殖性狀進行標記輔助選擇時應(yīng)在具體的群體或品種中作前期驗證。