陳麗萍,韋體生,陳志洪,伍校軍,蔣榮成
(1.廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)有限公司良圻原種豬場,南寧 530317;2.南寧市江南區(qū)江西鎮(zhèn)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站,南寧530047;3.南寧市新世豐農(nóng)業(yè)科技有限責(zé)任公司,南寧 530047;4.廣西大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,南寧 530004;5.廣西南寧同慶生物科技有限公司,南寧 530047)
古典豬瘟(Classicalswinefever,CSF)主要是一種經(jīng)過黃病毒科瘟病毒屬中的豬瘟病毒(Classicalswinefevervirus,CSFV)直接導(dǎo)致的烈性致病性傳染病,這種傳染病也被稱為豬霍亂(Hogcholera)。古典豬瘟有很鮮明的特殊性,它的發(fā)病特別迅速,明顯內(nèi)熱淤積,毛細(xì)血管出現(xiàn)變性,造成發(fā)病豬體皮膚呈現(xiàn)出十分明顯的泛發(fā)性出血點,另外,還會出現(xiàn)脾臟梗死等生理特征,這是一種在世界范圍內(nèi)被定性為A類動物傳染疾病,在中國也把這類疾病劃歸到一類動物傳染病范圍。盡管在世界范圍內(nèi)很多國家都針對豬瘟采取了各種各樣的撲殺、隔離等相關(guān)措施,根據(jù)目前養(yǎng)殖行業(yè)特點分析,其養(yǎng)豬場存在密集度極高的現(xiàn)象,如果出現(xiàn)豬瘟則可能會出現(xiàn)大規(guī)模傳播,為養(yǎng)殖業(yè)帶來極為嚴(yán)重的影響。因此,必須針對豬場實際情況進(jìn)行豬瘟防疫,并根據(jù)豬瘟疫苗的實際效用進(jìn)行選擇,確保豬瘟防疫工作的開展可以有效提升豬場免疫效果[1]。
豬瘟疫苗的質(zhì)量對于疫苗的免疫效果有至關(guān)重要的影響,因此,科學(xué)合理地選擇疫苗顯得至關(guān)重要。試驗為在最大程度上有效探討同一個廠家生產(chǎn)的不同批次豬瘟疫苗,對于仔豬呈現(xiàn)的豬瘟抗體效果的效價,進(jìn)而通過試驗結(jié)果有效明確批次疫苗的免疫效果,為選擇科學(xué)合理的適用豬瘟疫苗提供有效依據(jù)[2]。
(1)時間與地點。起止時間:2018年7月15日至9月16日;試驗地點:南寧市新世豐農(nóng)業(yè)科技有限責(zé)任公司;試驗用豬:55~60日齡未接受豬瘟疫苗免疫的保育豬208頭。
(2)試驗疫苗。疫苗為某廠生產(chǎn)的不同批次的豬瘟活疫苗(兔源脾淋苗),A組免疫舊批號為1605003-2,B組免疫新批號為1608006-1。
(3)檢測試劑與器材。豬瘟病毒抗體檢測試劑盒,購自北京愛德士元亨生物股份有限公司,由美國IDEXX公司生產(chǎn),批號:99-43220-H251。根據(jù)豬瘟疫苗的應(yīng)用要求在對豬瘟病毒抗體檢測試劑進(jìn)行應(yīng)用前需要將其放置于室溫環(huán)境內(nèi),使試劑的溫度恢復(fù)到常溫狀態(tài),并將選用的樣品試劑進(jìn)行混合。檢測儀器包括不同規(guī)格的微量移液器(SOCOREX、EPPENDORF等)、美國BiotekELX800酶標(biāo)儀,微量振蕩器(IKA)、高速離心機、離心管、一次性采血器等。
(1)試驗分組。隨機選取未免疫豬瘟疫苗的10欄仔豬,分為2個組,每組分成5欄,每欄有20~22頭仔豬,即每個試驗組120~130頭仔豬。
(2)免疫方法。試驗在55~60日齡進(jìn)行免疫,具體分組如下:A組為按本場的免疫程序,一次免疫舊批號為1605003-2,免疫劑量為2頭份/頭。用A表示;B組為按本場的免疫程序,一次免疫新批號為1608006-1,免疫劑量為2頭份/頭。用B表示。
(3)血樣采集方法。試驗豬免后6周前腔靜脈采血3~5 mL,分離血清備用。每個場每組試驗分組隨機采血20頭左右,A組共采血119份,B組共采血123份。
(4)ELISA操作步驟。在此次試驗中采用的方法為阻斷ELISA試驗,在檢測的過程中其操作方法、操作步驟需要按照本次選用的豬瘟免疫試劑說明書進(jìn)行。
同時滿足陰性對照的平均OD450值大于0.500,陽性對照的阻斷值>50,檢測結(jié)果才有效。如果被檢樣本的阻斷值≥40,該樣本被判定為陽性;如果被檢樣本的阻斷值≤30,該樣本被判定為陰性;如果被檢樣本的阻斷值為30~40,該樣本被判定為可疑;如果被檢樣本的的阻斷值≥50,該樣本則可以被判定為合格。
試驗利用阻斷ELISA原理檢測豬血清中豬瘟病毒抗體的方法,比較不同疫苗及不同免疫劑量的免疫效果。試驗結(jié)果見表1。
表1 豬瘟抗體水平檢測結(jié)果
用舊批號1605003-2的豬瘟苗免疫的A組豬群產(chǎn)生的抗體陽性率、合格率水平和平均值都略高于新批號168006-1的豬瘟苗B組。但這2組豬瘟苗的抗體陽性率水平差異不顯著(P>1.0)。兩組豬瘟苗免疫的豬群產(chǎn)生的抗體平均值和離散系數(shù)相差不大。試驗結(jié)果分析,A組(舊批號1605003-2)的免疫效果與B組(新批號168006-1)產(chǎn)生的免疫效果都能達(dá)到較為理想的水平,2個批次的免疫效果差異不顯著。
(1)仔豬在55~60日齡免疫1次某廠生產(chǎn)的不同批次的豬瘟活疫苗(兔源脾淋苗)都能使仔豬產(chǎn)生較高水平的豬瘟抗體。
(2)同一廠家不同批次生產(chǎn)的細(xì)胞苗對仔豬抗體水平差異不明顯。
(3)在豬瘟免疫中需要在養(yǎng)豬場內(nèi)長期開展豬瘟凈化活動,確保豬瘟控制及凈化工作的開展可以達(dá)到規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)要求。在本次研究中對55~60日齡的豬群進(jìn)行免疫,通常只接種1次疫苗,同時在豬瘟免疫中應(yīng)針對豬場實際情況選用疫苗,確保豬瘟疫苗的應(yīng)用符合豬場實際情況,通過研究探索確認(rèn)豬瘟疫苗的適用性[3]。
某廠生產(chǎn)的不同批次的豬瘟活疫苗(兔源脾淋苗)在此次豬瘟免疫工作中的應(yīng)用效果較為理想,其在實際中有效提升了豬場的免疫水平。在保育豬免疫中必須要結(jié)合豬場的實際情況、實際條件、實際環(huán)境選用相應(yīng)的豬瘟疫苗,并對不同批次豬瘟疫苗進(jìn)行試驗,確保其免疫效果可以達(dá)到預(yù)期的水平。