心肌梗死是冠狀動(dòng)脈閉塞，血流中斷，使部分心肌因嚴(yán)重的持久性缺血而發(fā)生局部壞死。人類疾病動(dòng)物模型是指生物醫(yī)學(xué)研究過程中所建立起來的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對象及相關(guān)實(shí)驗(yàn)材料。一個(gè)好的疾病動(dòng)物模型須盡可能滿足與人類疾病比較的“三性”特征，即發(fā)病機(jī)理同源性、行為表象一致性、藥物治療預(yù)見性，同時(shí)具有創(chuàng)建易行性，重現(xiàn)性與經(jīng)濟(jì)性的特點(diǎn)。而心肌梗死大鼠模型是研究人類急性心肌梗死的通用路徑。在大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目實(shí)施中需要教師在模型建立上給予學(xué)生教學(xué)指導(dǎo)，這樣更有利于科研工作的實(shí)施。鑒于此，以下針對該方法進(jìn)行深入探討。

1 材料與方法

1.1 儀器和藥品

生物安全柜（SW-CJ-1F型，蘇凈安泰空氣技術(shù)有限公司）、生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)（RM6240B/C型，成都儀器廠）、動(dòng)物呼吸機(jī)（HX-300S型，成都泰盟軟件有限公司）、狗兔二用解剖臺(tái)，手術(shù)燈、電子秤、雙凹夾、三通閥、灌胃器、止血帶、大鼠固定用泡沫磚、大頭針、固定線、注射器、針頭、手術(shù)刀、眼科剪、蚊式止血鉗、開瞼器、培養(yǎng)皿、縫針、非吸收性外科縫線、無菌紗布、無菌棉球、一次性使用滅菌橡膠外科手套、生理鹽水、20%烏拉坦（0.5 mL/100 mg，上海山浦化工有限公司）[1]。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

10只清潔大鼠均由牡丹江醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，雌雄隨機(jī)，2.5月齡，體質(zhì)量為200～250 g。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 大鼠的捉拿、麻醉和固定 先用右手提起大鼠尾后部，旋轉(zhuǎn)至?xí)?，隨后將其置于電子秤上稱重，讀取數(shù)值。用注射器抽取事先配置好的麻醉藥物備用。麻醉時(shí)用右手提起大鼠尾巴將其置于鼠籠蓋或其他粗糙表面上，使其后肢懸空，僅允許其前肢著地，在大鼠向前掙扎爬行時(shí)，左手握拳，用左手拇指和食指抓緊大鼠雙耳和頭頸部的被毛。手背向下，使大鼠仰臥位固定于左手中，并確保大鼠頭部向下傾斜。本實(shí)驗(yàn)采用腹腔注射，穿刺部位選擇在下腹部左側(cè)，該部位無重要器官。麻醉前使其腹部向上，將注射器針頭與腹中線成45度角，在選定的部位刺入腹腔，刺入時(shí)需與腹部皮膚呈20°角。如針頭與腹腔內(nèi)小腸接觸，一般小腸會(huì)自動(dòng)避開，故腹腔注射較為安全。刺入腹腔時(shí)，術(shù)者會(huì)有阻力突然減小的感覺，再抽回針?biāo)?，確定針頭未刺入小腸、膀胱或血管后，緩慢注入藥物。若采用20%烏拉坦0.5 mL/100 mg蘇醒較慢，而采用1%戊巴比妥0.4 mL/100 mg則蘇醒較快。固定前先用醫(yī)用膠帶將大鼠固定，用泡沫磚固定于狗兔二用解剖臺(tái)上，然后將四只大頭釘分別固定于泡沫磚的兩個(gè)側(cè)面，作為大鼠的手術(shù)臺(tái)。將大鼠仰臥位固定于泡沫磚上，四肢用固定線分別系于泡沫磚側(cè)面的四只大頭釘上。頭部用固定線系住大鼠門齒固定于泡沫磚頂端大頭釘上[2]。

1.3.2 系統(tǒng)連接 首先啟動(dòng)計(jì)算機(jī)和生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)硬件部分，然后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)RM6240軟件操作界面。設(shè)置好實(shí)驗(yàn)參數(shù)后打開心電圖實(shí)時(shí)測量選擇第一通道檢測。將正、負(fù)和接地電極插入大鼠雙側(cè)下肢和一側(cè)上肢皮下固定。啟動(dòng)動(dòng)物呼吸機(jī)調(diào)整呼吸頻率、潮氣量和呼吸比等設(shè)置參數(shù)（事先將灌胃器、三通閥、動(dòng)物呼吸機(jī)的乳膠管連接在一起），使用灌胃器進(jìn)行氣管插管。

1.3.3 手術(shù)操作 調(diào)整潮氣量數(shù)值為6，避免因潮氣量過大導(dǎo)致開胸后肺泡遮擋心臟外觀，在第四肋間隙距胸骨柄0.5 cm處，縱向切開1 cm備皮，然后距胸骨柄0.5 cm處鈍性分離肋間隙1 cm，不能刺穿壁層胸膜，用蚊式止血鉗在壁層胸膜中間處刺穿壁層胸膜，將開瞼器置于第三肋間即可觀察到心臟結(jié)構(gòu)，于左心耳和心大靜脈間結(jié)扎。完成后，肋間縫合一針，肋間肌不予縫合，被毛縫合兩針[3-5]。術(shù)者在操作熟練情況下于十分鐘內(nèi)即可完成手術(shù)，從而提高實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷拇婊盥省?/p>

2 造模結(jié)果和檢測方法

判斷急性心肌梗死模型成功建立的檢測方法包括心電圖、血清生物標(biāo)志物或超聲心動(dòng)圖等，每一種方法都有其重要的診斷意義。此次研究采用觀察模型復(fù)制過程中動(dòng)物體征和心電圖相結(jié)合的方法作為檢測急性心肌梗死模型成功建立的標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果顯示，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支后，左室前壁心肌組織變蒼白，收縮減弱。生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)軟件系統(tǒng)顯示心電圖R波振幅增加，ST段升高。這些結(jié)果表明，急性心肌梗死模型建立成功[6-9]。

3 討論

以上針對心肌梗死大鼠模型建立的方法進(jìn)行了深入探討，此次研究在RM6240系列生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)和HX-300動(dòng)物呼吸機(jī)輔助下，無需對大鼠進(jìn)行氣管插管術(shù)，成功建立了急性心肌梗死模型，并提高了模型制備的成功率和存活率。該模型的建立可以為后續(xù)進(jìn)行急性心肌梗死的基礎(chǔ)研究提供有力的平臺(tái)。今后可以依據(jù)此模型獲得基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，明確在急性心肌梗死模型中發(fā)生顯著變化的指標(biāo)，以期尋找出具有臨床診斷價(jià)值的新的生物標(biāo)志物，探討其在臨床診斷方面應(yīng)用的前景以及與急性心肌梗死發(fā)生機(jī)制的關(guān)系[10-12]。