王麗娜 張勤 閆燁 林常青 呂毅

Kidd血型系統(tǒng)是目前已知人類紅細(xì)胞血型系統(tǒng)之一，該血型系統(tǒng)包括JKa、JKb、JK33種抗原，Kidd抗體在臨床上常會(huì)引起遲發(fā)性溶血輸血反應(yīng)，對(duì)診斷新生兒溶血?。╤emolytic disease of the newborn，HDN）有重要意義。筆者在常規(guī)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽(yáng)性并鑒定出抗-JKa抗體，篩選出相合性血液制品進(jìn)行輸注，確保臨床輸血安全，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 病例介紹

患者男性，6歲8個(gè)月。確診遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥6年，血型為O型Rh（D）陽(yáng)性，給予間斷輸血支持治療，血紅蛋白（hemoglobin，Hb）維持在80～90 g/L。

患者3 d前無(wú)明顯誘因出現(xiàn)發(fā)熱，最高體溫為38.4 ℃，于2018年5月8日收入本院。入院查血常規(guī)：Hb為35 g/L，血細(xì)胞比容（red blood cell specific volume，HCT）為0.123，申請(qǐng)用血。常規(guī)采用微柱凝膠卡式法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽(yáng)性，并鑒定出特異性抗-JKa抗體。篩選出JKa抗原陰性懸浮紅細(xì)胞4 U給患者輸注后，患者自覺尿液顏色變淺，乏力心慌好轉(zhuǎn)，家屬要求出院。6月7日患者因咳嗽、乏力、心悸明顯再次入院，查血常規(guī)：Hb為42 g/L，HCT為0.143，不規(guī)則抗體篩查呈陰性。6月8日篩選Jka抗原陰性的O型懸浮紅細(xì)胞2 U給患者輸注，無(wú)輸血不良反應(yīng)，同時(shí)給予抗感染、清熱解毒、止咳等藥物治療，Hb上升。至6月15日患者已無(wú)發(fā)熱、咳嗽、咳痰癥狀，故出院。

2 血型血清學(xué)檢查

2.1 檢測(cè)試劑 單克隆抗-A血清、抗-B血清、抗-D免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）血清，抗人球蛋白試劑，人ABO反定型用紅細(xì)胞試劑，譜細(xì)胞，均由上海血液生物醫(yī)藥公司提供；凝聚胺試劑由珠海貝索生物技術(shù)公司提供；抗人球蛋白卡、不規(guī)則抗體檢測(cè)試劑由長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)公司提供；抗JKa、抗JKb試劑由荷蘭Sanquin公司提供。所有試劑均在有效期范圍內(nèi)使用。

2.2 檢測(cè)方法及結(jié)果 血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查、吸收放散試驗(yàn)、交叉配血試驗(yàn)等均參照《人類紅細(xì)胞血型學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)技術(shù)》[1]的要求操作，凝聚胺法試驗(yàn)參照說(shuō)明書操作。

2.2.1 血型鑒定 患者血型為O型Rh（D）陽(yáng)性，Kidd血型為 JK（a-b+）。

2.2.2 直接抗人球蛋白試驗(yàn) 患者的直接抗人球蛋白試驗(yàn)結(jié)果為陰性。

2.2.3 不規(guī)則抗體篩查與鑒定 患者血漿與不規(guī)則抗體篩選細(xì)胞在鹽水和凝聚胺介質(zhì)中均不凝集，在抗人球蛋白卡中與Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ號(hào)篩選細(xì)胞發(fā)生凝集，自身對(duì)照均為陰性。見表1。進(jìn)一步抗體鑒定，患者血漿與譜細(xì)胞反應(yīng)，符合抗JKa抗體格局情況。見表2。

2.2.4 吸收放散試驗(yàn) 將患者血漿分別與O型JKa陽(yáng)性和O型JKa陰性細(xì)胞在37 ℃下進(jìn)行吸收反應(yīng)，用吸收后的細(xì)胞進(jìn)行放散試驗(yàn)。陽(yáng)性細(xì)胞吸收后放散液在抗人球蛋白介質(zhì)中與JKa陽(yáng)性細(xì)胞凝集，與JKa陰性細(xì)胞不凝集；陰性細(xì)胞吸收后放散液與JKa陽(yáng)性、JKa陰性細(xì)胞均不凝集。再次證明患者血漿中存在抗JKa抗體。

2.2.5 抗體效價(jià)測(cè)定 5月9日患者抗人球蛋白試驗(yàn)效價(jià)為8，6月7日抗人球蛋白試驗(yàn)效價(jià)＜1。

2.2.6 交叉配血試驗(yàn) 使用抗Jka試劑從6份供血者血液制品中篩選出2份〔即無(wú)Jka抗原的懸浮紅細(xì)胞（4 U）〕，采用鹽水法、凝聚胺法和抗人球蛋白卡式法進(jìn)行交叉配血，主次側(cè)配血均相合，無(wú)輸血不良反應(yīng)。見表3。6月8日篩選Jka抗原陰性的O型懸浮紅細(xì)胞2 U輸注，患者無(wú)輸血不良反應(yīng)。

表1 患者血漿與Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ號(hào)篩選細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果

表2 抗體鑒定試驗(yàn)格局

表3 5月9日患者交叉配血試驗(yàn)結(jié)果

3 臨床輸血療效

輸血前患者查血常規(guī)：Hb為35 g/L，HCT為0.123；輸血后5月10日查血常規(guī)：Hb為61 g/L，HCT：0.203；5月12日查血常規(guī)：Hb為107 g/L，HCT為0.339。說(shuō)明輸血治療有效。再次入院時(shí)患者查血常規(guī)：Hb為42 g/L，HCT為0.143，輸血后6月10日查血常規(guī)：Hb為91 g/L，HCT為0.267；6月11日復(fù)檢血常規(guī)：Hb為98 g/L，HCT為0.309。說(shuō)明再次輸血治療有效。

4 討論

Kidd血型是一種重要的血型系統(tǒng)，亞洲人Jka抗原頻率約占73%[2]。中國(guó)漢族人Jka基因頻率為0.422 5，Jkb為0.577 5[3]。Kidd抗體多為免疫性抗體，臨床上并不多見，僅對(duì)外來(lái)抗原免疫力敏感的人才產(chǎn)生抗Jka和抗Jkb[4]；Jka抗體可以結(jié)合補(bǔ)體發(fā)生溶血，引起急、慢性溶血性輸血反應(yīng)[5]，據(jù)文獻(xiàn)[6]報(bào)道，Kidd抗體引起慢性輸血反應(yīng)的主要原因?yàn)榭贵w產(chǎn)生后其效價(jià)或反應(yīng)活性維持時(shí)間較短，且消失極快，再次輸血時(shí)容易漏檢，若輸入含有對(duì)應(yīng)抗原的紅細(xì)胞就可能發(fā)生機(jī)體回憶性反應(yīng)，從而引起慢性輸血反應(yīng)，還能引起交叉配血困難和HDN[7]，在臨床上具有重要意義。

本例患者Kidd血型為JK（a-b+），缺少JKa抗原，抗人球蛋白卡式法抗體鑒定符合抗-JKa。抗人球蛋白法效價(jià)為8，吸收放散試驗(yàn)驗(yàn)證為JKa抗體，所以檢測(cè)出特異性抗-JKa抗體是符合的。JKa抗體抗球蛋白法明顯高于聚凝胺法，與文獻(xiàn)[7-8]報(bào)道的結(jié)果相符。張俊玲等[9]研究表明，紅細(xì)胞上血型抗原量的多少和抗體效價(jià)的高低，在不同的檢測(cè)方法中有不同的凝集強(qiáng)度，交叉配血過程中采用不同的方法結(jié)果也有差異。本例患者抗體對(duì)抗人球蛋白試驗(yàn)敏感，篩選Kidd血型均為JK（a-b+）懸浮紅細(xì)胞，選擇鹽水法、凝聚胺法和抗人球蛋白卡式法進(jìn)行交叉配血[10]，配血均相合?；颊咴俅巫≡?，篩查不規(guī)則抗體陰性。為避免輸血后激發(fā)再次免疫，保障輸血安全，仍篩選Jka抗原陰性的懸浮紅細(xì)胞進(jìn)行輸用，患者Hb和體征恢復(fù)后出院。綜上所述，本例患者因遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥造成貧血，既往有多次紅細(xì)胞輸注史，JKa抗原陰性，常規(guī)輸血時(shí)并未要求對(duì)供血者進(jìn)行Kidd系統(tǒng)分型，因此多次輸血可能輸入含有JKa抗原的紅細(xì)胞刺激機(jī)體產(chǎn)生抗JKa抗體。對(duì)于此類患者，在進(jìn)行輸血相容性檢測(cè)時(shí)一定要注意選擇合適的方法，采用不同的方法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查及交叉配血試驗(yàn)，建議使用抗人球蛋白試驗(yàn)，防止抗體漏檢，對(duì)供者Kidd系統(tǒng)也進(jìn)行分型，選擇完全相合的血液輸注。對(duì)反復(fù)多次輸血患者交叉配血前應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定做不規(guī)則抗體篩查，為確保輸血安全，建議對(duì)有不規(guī)則抗體的輸血者建立詳細(xì)記錄，為患者之后輸血提供依據(jù)，避免輸血反應(yīng)的發(fā)生。