王侃

紹興市人民醫(yī)院設(shè)備處 （浙江紹興 312000）

早期的免疫組化通過(guò)手工操作完成，由于整個(gè)制片過(guò)程復(fù)雜，耗時(shí)較長(zhǎng)，技術(shù)人員在手工操作中對(duì)標(biāo)本前處理的試劑孵育溫度和時(shí)間難以準(zhǔn)確把握，導(dǎo)致染色效果和重復(fù)性都較差[1-2]。近期醫(yī)院引進(jìn)1臺(tái)Bond-Max全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)，免疫組化的所有步驟（烤片、脫蠟、抗原修復(fù)、阻斷、標(biāo)記一抗、二抗、顯色直到復(fù)染）都可以自動(dòng)完成，真正實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)操作，不僅節(jié)省人力，也確保免疫組化染色質(zhì)量恒定。現(xiàn)分享我們對(duì)全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)在使用和維護(hù)中的體會(huì)和認(rèn)識(shí)。

1 檢測(cè)原理

免疫組化是利用抗體和抗原特異性結(jié)合的原理，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記顯色劑的抗體來(lái)標(biāo)定細(xì)胞內(nèi)抗原的成分，并對(duì)抗原進(jìn)行分析與研究。免疫組化技術(shù)是一項(xiàng)綜合定性、定量、定位分析，結(jié)合形態(tài)、功能、代謝為一體的檢測(cè)技術(shù)[3]。在原位檢測(cè)出病原的同時(shí)，還能觀察到組織病變與該病原的關(guān)系，確認(rèn)受染細(xì)胞類型，從而有助于了解疾病的發(fā)病機(jī)制和病理過(guò)程，已廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)與病理分析。

2 操作特點(diǎn)

（1）Bond-Max全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)有3個(gè)樣品架，每個(gè)樣品架上最多可容納30張玻片，且每個(gè)樣品架可獨(dú)立執(zhí)行不同程序，具有玻片的連續(xù)上載功能。技術(shù)員只需根據(jù)實(shí)際工作流程選擇整批上載或小批次連續(xù)上載，后者的優(yōu)點(diǎn)可減少等待時(shí)間，提高實(shí)驗(yàn)室效率。（2）Bond-Max所有操作均由電腦設(shè)定的程序控制儀器執(zhí)行，計(jì)算機(jī)連接玻片標(biāo)簽打印機(jī)，同時(shí)與醫(yī)院信息系統(tǒng)相聯(lián)，實(shí)現(xiàn)病例和患者之間信息的雙向傳輸和索引追蹤。（3）Bond-Max利用其專利技術(shù)，在標(biāo)本的玻片表面增加一個(gè)塑料罩，防止試劑揮發(fā)，為抗體與抗原免孵育時(shí)的免疫反應(yīng)提供一個(gè)獨(dú)立、封閉環(huán)境，這樣既確保樣品的安全，也節(jié)省試劑的成本。在滴加試劑時(shí)，加樣針將液滴鋪散到玻片的反應(yīng)區(qū)域上，試劑用量由注射模塊精確控制，確保試劑完全均勻覆蓋組織，染色結(jié)果可靠。（4）Bond-Max的排廢采用真空抽吸法排放，所有漂洗液、緩沖液、染色液等廢液由真空泵的直接抽吸，避免試劑的相互污染，降低試劑的使用量，但大吸力排廢也存在損壞標(biāo)本的風(fēng)險(xiǎn)。（5）Bond-Max針對(duì)一抗完全開(kāi)放，用戶可以根據(jù)開(kāi)展的項(xiàng)目使用任何品牌的一抗。二抗需使用封閉試劑，檢測(cè)系統(tǒng)包含Compact Polymer專利技術(shù)，相比傳統(tǒng)方法而言，信號(hào)放大作用強(qiáng)，組織穿透性強(qiáng)，敏感性高，定位準(zhǔn)確，背景更清晰，提高診斷質(zhì)量。一般的全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)均采用儀器的專用試劑，試劑成本與所做項(xiàng)目密切相關(guān)，醫(yī)院如需考核設(shè)備的消耗，應(yīng)對(duì)各項(xiàng)成本做嚴(yán)格測(cè)算。

3 日常維護(hù)

全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)雖然可部分替代煩瑣的人工操作，但日常的維護(hù)保養(yǎng)必不可少，只有按照操作規(guī)程做好保養(yǎng)才能確保設(shè)備始終有一個(gè)良好的運(yùn)行狀態(tài)。

3.1 開(kāi)機(jī)檢查

確保系統(tǒng)（液流系統(tǒng)）已灌注；檢查連接到抽吸探針的管路是否有堵塞或氣泡；檢查Covertile固定夾是否處在固定位置；檢查大容器和有害廢液容器是否有足夠的空間，必要時(shí)清空；檢查大試劑容器是否有足夠的試劑用于日常操作；必要時(shí)重新灌滿。

3.2 關(guān)機(jī)檢查

清洗抽吸探針；檢查管路是否堵塞或有氣泡；清潔標(biāo)本架及染色裝置。

3.3 周保養(yǎng)

清洗防護(hù)帶和儀器蓋；清潔下層托盤；加滿緩沖液、乙醇和去離子水；清潔機(jī)械臂上的ID掃描儀；清潔玻片標(biāo)簽儀；檢查注射器緊密度。

3.4 月保養(yǎng)

更換混合站，以每天60個(gè)玻片的使用率為標(biāo)準(zhǔn)，每月更換1次；清潔所有大容器，特別是廢液瓶。

3.5 年保養(yǎng)

更換抽吸探針和針管；更換注射器和針頭；檢查加熱模塊。

4 小結(jié)

全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)可以有效避免人工操作的錯(cuò)誤和誤差，染色片的標(biāo)準(zhǔn)化強(qiáng)、重復(fù)性好。同時(shí)，機(jī)器制作統(tǒng)一規(guī)格的玻片便于歸檔，安全環(huán)保，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加客觀、更加科學(xué)，因此，全自動(dòng)免疫組化染色機(jī)在病理檢測(cè)等領(lǐng)域的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。