江蘇省丹陽(yáng)市65歲以上老年人結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)和γ干擾素體外釋放試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果分析

作者單位：210009江蘇省南京市,江蘇省疾病預(yù)防控制中心慢性傳染病防制所

結(jié)核病一直是嚴(yán)重危害人類健康的呼吸道傳播疾病[1],可侵犯人體除牙齒和頭發(fā)以外的所有器官[2]。2017年WHO發(fā)布的《2017年全球結(jié)核病報(bào)告》顯示,我國(guó)依然是結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國(guó)家。報(bào)告指出，大多數(shù)結(jié)核病死亡病例可以通過(guò)早期診斷和適當(dāng)治療來(lái)預(yù)防,但因缺乏有效的實(shí)驗(yàn)室工具,早期診斷一直是結(jié)核病防治工作的重點(diǎn)和難點(diǎn)[3]。

結(jié)核桿菌進(jìn)入人體會(huì)發(fā)生一系列復(fù)雜的細(xì)胞免疫過(guò)程,結(jié)核感染者篩查的主要手段有γ干擾素體外釋放試驗(yàn)(TB-IGRA)和結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)(TST)[4]。本研究比較分析了2013年江蘇省丹陽(yáng)市≥65歲老年人TST和IGRA檢測(cè)結(jié)果,探究基層≥65歲老年人篩查結(jié)核感染的適宜技術(shù)。

1 材料與方法

1.1 樣本資料 本研究資料來(lái)源于結(jié)核病流行與干預(yù)模式研究(2013ZX10003004)子課題:結(jié)核分枝桿菌感染流行病學(xué)調(diào)查和隊(duì)列研究。

1.2 IGRA試劑檢測(cè) 使用澳大利亞IGRA提供的3種采血管(Nil對(duì)照,YB抗原,Mitogen)采集靜脈血。每管0.8～1.2 mL血液。上下充分振搖10次搖勻。混勻后的血樣必須在16 h內(nèi)移至37 ℃條件下孵育 20 h,切勿冷藏或冷凍樣本。樣本孵育完成后,將樣本以2000～3000 r/min,離心15 min,取上層血漿,并于48 h內(nèi)完成檢測(cè)。檢測(cè)采用QFT-GIT試劑盒(澳大利亞Cellestis公司)，所有操作按照說(shuō)明書的規(guī)定進(jìn)行。

1.3 TST檢測(cè) 用75%酒精對(duì)左前臂掌側(cè)中、下1/3交界處的皮膚進(jìn)行局部皮膚消毒,待酒精蒸發(fā)干燥后,用結(jié)核菌素注射器緩慢注入 0.1 mL(含 5 個(gè)結(jié)核菌素單位)的 PPD。于注射后48～72 h查驗(yàn)注射部位反應(yīng)。以硬結(jié)的橫徑和縱徑的平均直徑進(jìn)行結(jié)果判斷。陰性結(jié)果(-):硬結(jié)平均直徑<5 mm或無(wú)反應(yīng)者。陽(yáng)性結(jié)果(+):硬結(jié)平均直徑≥5 mm者(以下稱PPD5)，硬結(jié)平均直徑5～9 mm為一般陽(yáng)性;10～19 mm為中度陽(yáng)性(以下稱PPD10);≥20 mm或局部出現(xiàn)水泡、壞死及淋巴管炎者為強(qiáng)陽(yáng)性(以下稱PPD15)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 使用EpiData 3.1軟件對(duì)調(diào)查結(jié)果進(jìn)行雙錄入并核查校對(duì);采用SPSS 18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)(百分?jǐn)?shù))描述,組間比較采用卡方檢驗(yàn),采用一致性檢驗(yàn)比較TST和IGRA的檢測(cè)結(jié)果,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況 本研究選取2013年丹陽(yáng)市≥65歲老年人共計(jì)1109例,年齡65～94歲,中位年齡71歲, 其中男508例,女601例。IGRA方法檢測(cè)出陽(yáng)性339例,陽(yáng)性率為30.6%。TST方法中,PPD5 382例(34.4%);PPD10 319例(28.8%);PPD15 205例(18.5%)。

2.2 接種卡介苗對(duì)檢出率的影響 選取的樣本中有83例有卡介苗接種史(接種組),1026例未接種卡介苗(未接種組)。2組間IGRA陽(yáng)性率、TST陽(yáng)性率差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.3 性別對(duì)檢出率的影響 男性組IGRA、PPD5、PPD10、PPD15陽(yáng)性率均顯著高于女性組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見(jiàn)表2。

表1 卡介苗接種組和未接種組間TST和IGRA陽(yáng)性率比較(n)

表2 男女組間TST和IGRA陽(yáng)性率比較(n)

注：與男性組比較,*P<0.05

2.4 評(píng)價(jià)TST與IGRA診斷一致性 以IGRA技術(shù)為金標(biāo)準(zhǔn)，PPD5檢測(cè)結(jié)核感染的靈敏度為71.09%，特異度為81.69%，Kappa值為0.510(P<0.05)；PPD10靈敏度為65.49%，特異度為87.40%，Kappa值為0.538(P<0.05)；PPD15靈敏度為48.08%，特異度為94.55%，Kappa值為0.479(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 TST和IGRA兩種檢測(cè)方法結(jié)果比較分析(n)

3 討論

全球有大約1/3的人感染結(jié)核分枝桿菌,其中絕大部分的人長(zhǎng)期處于潛伏感染狀態(tài),約10%的潛伏感染者可能在一生中發(fā)展為結(jié)核病[5]。老年人因身體抵抗力下降及糖尿病等基礎(chǔ)疾病,更容易罹患結(jié)核病。2010 年全國(guó)結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查顯示,結(jié)核病隨著年齡增長(zhǎng),發(fā)病率也不斷增加,≥60歲老 年 肺 結(jié) 核 病人約占≥15歲全人群患病例數(shù)的50%,且該人群在 65 歲后出現(xiàn)發(fā)病高峰, 但同期老年肺結(jié)核病人登記數(shù)僅占20%[6];所以對(duì)≥65歲老年人的重點(diǎn)篩查對(duì)于結(jié)核病防控工作有著重要的意義。

2017年國(guó)務(wù)院頒發(fā)的《“十三五”全國(guó)結(jié)核病防治規(guī)劃》也明確提出針對(duì)≥65歲老年人開(kāi)展結(jié)核病重點(diǎn)人群的主動(dòng)篩查工作。目前基層對(duì)≥65歲老年人的肺結(jié)核篩查主要依賴于問(wèn)診及X光片或DR影像學(xué)檢測(cè),其靈敏度和特異度都不理想,且影像學(xué)檢測(cè)成本較高,在基層實(shí)施起來(lái)也受設(shè)備及人員不足等條件限制[7]。

結(jié)核病潛伏感染目前尚無(wú)診斷金標(biāo)準(zhǔn),IGRA作為一種體外特異性T細(xì)胞免疫應(yīng)答檢測(cè)技術(shù),因較高的靈敏度和特異度近年來(lái)作為輔助手段在臨床診斷中得到了廣泛應(yīng)用,但其成本較高,且對(duì)實(shí)驗(yàn)室及實(shí)驗(yàn)人員都有較高的要求[8],不宜在基層開(kāi)展使用。TST檢測(cè)技術(shù)成本低廉,且操作簡(jiǎn)單,但由于TST所用的刺激原PPD與卡介苗具有相似的組分[9],在我國(guó)TST篩查結(jié)果容易受到卡介苗接種的影響[10],隨著卡介苗接種普及,臨床上為了排除其干擾，將判斷結(jié)核桿菌感染的TST紅腫硬塊直徑提高到15 mm以增加特異性,但同時(shí)靈敏度降低。本研究表明,≥65歲老年人TST檢測(cè)基本不受卡介苗影響,同時(shí)與IGRA檢測(cè)方法相比,PPD10靈敏度為65.49%,特異度為87.40%,Kappa值為0.538,略高于PPD5和PPD15。

本研究提示，男性結(jié)核感染率高于女性,以IGRA檢測(cè)結(jié)果判定，男性感染率為37.4%(190/508),女性為24.8%(149/601),這與男性人群發(fā)病率高于女性一致,這種現(xiàn)象的發(fā)生可能與男性外出務(wù)工工作環(huán)境差、時(shí)間長(zhǎng)、勞動(dòng)強(qiáng)度大，吸煙酗酒等因素相關(guān),所以針對(duì)≥65歲老人重點(diǎn)篩查中應(yīng)對(duì)男性多加關(guān)注。

綜上所述, TST檢測(cè)技術(shù)操作簡(jiǎn)單,成本低且不需要實(shí)驗(yàn)室,適合在基層開(kāi)展實(shí)施,可作為≥65歲老年人的篩查手段,另外本研究提示,針對(duì)≥65歲老年人群體,可采用PPD10為參考標(biāo)準(zhǔn)判斷,適當(dāng)提高檢出率。