王彩云， 侯 俊， 王 永， 張翔宇， 阮培均*

(1.畢節(jié)市中藥研究所， 貴州 畢節(jié) 551700; 2.大方縣扶貧開發(fā)辦公室， 貴州 畢節(jié) 551700)

白鬼筆(Phallusimpudicus)屬鬼筆目(Phallales)鬼筆科(Phallaceae)鬼筆屬(Phallus)真菌[1]，別名鬼筆菌、竹菌、竹下菌及無裙蓀，由于其在冰凍雪雨季節(jié)也能較好地出菇，因此又被稱為冬蓀，主要分布于山東、山西、貴州、廣東和安徽等地[2]，在歐洲和北美也廣泛分布。白鬼筆與紅托竹蓀(Dictyophoraechinoyolya)、長裙竹蓀(Dictyophoraindusiata)及短裙竹蓀(Dictyophoraduplicate)均是著名的藥食兩用菌[3-7]，含有麥甾醇、糖醛酸聚糖、甲醛、苯基巴豆油醛、硫化氫、二氫查耳酮、苯乙酸和乙酸等多種活性成分[8]，具有活血祛痛作用，入藥可治風濕[9]，對治療癌癥[10-15]、激發(fā)性欲[16]、抗凝血[17]、抗癌[18-19]及消水腫[20]也有一定的療效。白鬼筆子實體香味濃郁，營養(yǎng)豐富，富含包括人體必需8種氨基酸在內(nèi)的21種氨基酸、多種維生素、微量元素及多糖等活性物質(zhì)，為蔬菜與水果所不及，具有較高的食藥用價值。此外，白鬼筆還含有能抑制腐敗菌生長的物質(zhì)，可作為食品的短期防腐劑[1]。我國白鬼筆的人工栽培起源于貴州省大方縣，自20世紀80年代起就銷往四川和江浙一帶；90年代初期，大方縣鳳山、星宿和百納等鄉(xiāng)鎮(zhèn)開始自行分離菌種栽培；2015年貴州織金縣、納雍縣、安龍縣和習水縣等地開始引進試種并獲得成功；2016年，“大方冬蓀”獲得國家地理標志產(chǎn)品認證，同年貴州省人民政府將冬蓀作為特色品種列入全省食用菌產(chǎn)業(yè)裂變式發(fā)展方案[21]。目前，國內(nèi)外對白鬼筆的研究主要集中于栽培技術(shù)、分類鑒定、形態(tài)學、組織分離培養(yǎng)、重金屬及農(nóng)藥殘留、生化特性及藥理作用研究等方面[22-24]，國外有關(guān)白鬼筆栽培研究的報道很少，且尚未形成規(guī)模。從白鬼筆的生物學特性、組織分離培養(yǎng)、出菇特性、化學成分、人工栽培及藥理作用等方面綜述其研究進展，以期為白鬼筆的深入研究提供參考。

1生物學特性

1.1形態(tài)特征

1.1.1菌落與菌絲體白鬼筆子實體的菌蓋、菌柄和菌髓經(jīng)組織分離培養(yǎng)均能萌發(fā)形成菌落，而菌托未萌發(fā)形成菌落；不同組織形成的菌落形態(tài)具有差異性。菌蓋形成的菌絲細絨狀、無菌絲束，菌落白色，培養(yǎng)11 d后菌落直徑為2～2.6 cm；菌柄形成的菌絲呈束狀，密集放射狀分布，菌落潔白，培養(yǎng)11 d后菌落直徑為1.4～2 cm；菌髓形成的菌絲呈放射狀，菌落為白色，培養(yǎng)11 d后菌落直徑為1.4～2.0 cm。菌絲體為營養(yǎng)器官，呈線狀、絲狀或索狀，有分解基質(zhì)，吸收、貯存和運輸營養(yǎng)的作用。菌絲束由平行排列的營養(yǎng)菌絲和粗糙菌絲組成。其中，營養(yǎng)菌絲具隔，有明顯鎖狀聯(lián)合，光滑無色，寬1.53～5.08 μm；粗糙菌絲細胞壁具疣狀或分枝狀突起，菌絲具鎖狀聯(lián)合，有隔，寬1.27～5.08 μm，且該菌絲含有膨大的紡錘狀細胞(紡錘狀細胞內(nèi)含直徑為5.08～15.24 μm球狀體)，大小為(27.94～30.48) μm×(16.51～19.05) μm[25]。

1.1.2子實體白鬼筆子實體未開傘前呈球形至卵圓形，俗稱菌蕾，地上生或半埋土生，白色、灰色、褐色或粉白色，直徑5.2～6.0 cm，基部有白色或淺黃色菌索，后期表面有皺紋。菌蕾的橫切面結(jié)構(gòu)由外至內(nèi)含外部的土黃色膠質(zhì)菌幕、黑色子實層、白色軸狀結(jié)構(gòu)和中央的淡灰色菌髓[25]；菌蕾生長成熟后，菌托層由上部裂開開傘，形成子實體。白鬼筆子實體由菌蓋、孢子、菌柄及包被和菌托組成，成熟子實體單株重69.9～120.0 g，高14.8～20.8 cm。子實體菌蓋有深網(wǎng)格，褐色，呈鐘形，寬3.5～4.4 cm，高4.8～6.2 cm，成熟后有穿孔，頂平，并產(chǎn)生粘而臭的暗綠色孢子液；菌蓋髓部由厚壁菌絲和囊狀細胞組成，厚壁菌絲粗5.35～9.89 μm；囊狀細胞大小為(10.43～19.78) μm×(7.98～11.16) μm。白鬼筆子實層由擔子、擔孢子及幼擔子組成，每擔子具4個擔孢子，擔孢子桿狀、無色、平滑，孢子大小為(2.34～3.81) μm×(1.07～1.27)μm。菌柄海綿狀，白色，近圓筒形，中空，粗2.8～3.2 cm，長8.0～10.5 cm，由無色的柱狀及泡狀細胞組成，柱狀細胞(6.15～12.46) μm×(31.75～38.56) μm，泡狀細胞(18.03～35.75) μm×(19.05～40.1) μm[25]；孢子長橢圓形至橢圓形，平滑，(2.8～4.5)μm×(31.75～38.56)μm[21]。菌托厚且有彈性，白色苞狀，大小為(7.1～9.0) cm×(5.8～6.2) cm，基部有不分枝或分枝的長為7.0～10.8 cm的菌索；菌托內(nèi)壁膠質(zhì)狀，由螺旋狀菌絲組成，該菌絲無色，具明顯鎖狀聯(lián)合，壁厚，寬2.14～3.87 μm，部分菌絲具直徑為5.48 μm的厚壁球狀細胞；菌托外壁由厚壁菌絲組成，菌絲有隔、彎曲，寬3.51～7.82 μm，具鎖狀聯(lián)合。

1.2生長條件

1.2.1溫度李能章等[26]研究發(fā)現(xiàn)，菌蕾生長發(fā)育到一定大小，即無土栽培條件下菌蕾直徑為2.0～6.0 cm時，有土栽培條件下菌蕾直徑為0.2～6.0 cm時，4℃低溫條件下均能出菇；且其長出孢托與有土或無土栽培的關(guān)系不大。李文力等[27-28]研究表明，白鬼筆不同品種不同生長時期需要的最適溫度不同，菌絲最適生長溫度為20～22℃；原基分化最適溫度為20～25℃，溫度太高易造成原基干癟死亡，溫度過低導致分化數(shù)量少及原基減少；菌蕾生長最適溫度為18～25℃，溫度過高易導致菌蕾失水或死亡，溫度過低菌蕾生長緩慢；子實體開傘最適溫度為18～20℃，溫度越低開傘速度越慢、時間越長，而溫度過高則導致子實體失水難以開傘。

1.2.2水分白鬼筆子實體和菌蕾的含水量較大，菌托含水量高達97%，子實體的含水量為92%左右。白鬼筆菌種培養(yǎng)料的含水量以65%～70%為宜，水分過少不發(fā)菌，水分過多易在瓶底積水，菌絲無法生長。菌絲培養(yǎng)空氣濕度55%～60%即可，濕度過高易感染雜菌。在子實體原基分化和生長階段，空氣相對濕度以80%～90%為宜，低于50%原基不分化，即使分化也會缺水枯萎死亡。子實體開傘濕度以70%～90%為宜，濕度過低菌蕾容易失水不開傘，濕度過高菌蕾頂端容易發(fā)霉感染[21]。

1.2.3氧氣白鬼筆為好氧菇，對氧氣的需求量較大。菌絲生長階段需保證透氣性良好，因此裝料不能太緊，需要在瓶子里留少量的空間，否則菌絲容易缺氧衰退。白鬼筆原基分化和生長階段需加強通風，尤其是大棚層架式栽培，在加強通風、保持空氣新鮮的同時降低二氧化碳濃度，否則易造成菌蕾生長緩慢，嚴重時菌蕾會缺氧死亡[21]。

1.2.4光照由于強光會抑制菌絲生長，因此白鬼筆菌種培養(yǎng)時需要遮光。光線對白鬼筆的原基分化影響不大，原基一般形成于遮蓋物下方，要求光強為400～600 Lx；白鬼筆菌蕾生長和開傘階段不需要光照，有光照反而降低其生長和開傘速度，因此，白鬼筆白天開傘較少，多在夜間開傘[21]。

1.2.5生長環(huán)境白鬼筆是一種低溫型菌類，適宜在海拔1 500～2 000 m且濕度較大的冷涼地區(qū)栽培[21]。盧東升等[25，21]研究發(fā)現(xiàn)，白鬼筆多發(fā)生于春秋季節(jié)，單生或群生，比較適宜微酸性、腐殖質(zhì)深厚的土壤環(huán)境，菌絲最適pH 5.5～6.5，過酸和過堿均不利于其生長發(fā)育[21]。多生于以泡桐(Paulowniatomentosa)、淡竹(Phyllostachysglauca)、構(gòu)樹(Broussonetiapapyrifera)、麻櫟(Quercusacutissi)、牡荊(Vitexnegundo)、楓楊(Pterocaryastenoptera)或衛(wèi)矛(Euonymusalatus)等植被為主的雜木林內(nèi)。

2白鬼筆的栽培

2.1離體培養(yǎng)

葛臺明[29]研究表明：菌蕾太嫩，則菌絲萌發(fā)較慢且弱，菌絲呈細絨毛狀；菌蕾太老，則組織塊膨大呈海綿狀，與培養(yǎng)基接觸不緊密，組織塊易失水枯萎，因此，白鬼筆的組織分離培養(yǎng)以選用成熟度達80%～90%的菌蕾為好。葉家棟等[30]取不同大小的白鬼筆菌蛋以及菌蛋的上、中、下部位進行組織分離培養(yǎng)試驗，結(jié)果表明：22～25℃的恒溫箱中培養(yǎng)，PDA綜合培養(yǎng)基(馬鈴薯150 g+葡萄糖/瓊脂各15 g+磷酸二氫鉀2.3 g+硫酸鎂1.2 g)的發(fā)菌效果最好，菌絲于接種后3 d開始萌發(fā)，約35 d長滿試管斜面，且菌絲粗壯、濃白；發(fā)菌能力隨著菌蛋的增大呈增長趨勢；菌蛋上端部位的發(fā)菌能力最好，中間次之，下端最弱。

2.2人工栽培

2.2.1栽培種白鬼筆主要栽培品種有光滑肉質(zhì)型、短柄肉質(zhì)型、長柄蜂窩型及厚孢長角型4種[21]。其中，前2種味道較好，產(chǎn)量稍低但價格稍高；長柄蜂窩型單產(chǎn)高，但味道較差，市場價格較低；厚孢長角型菌蓋孢子較厚難以清洗，且菌蛋大菌柄小，品相差。白鬼筆栽培時需選用菌齡3～4個月的優(yōu)質(zhì)菌種，此時的菌種污染少，外觀菌絲白色、濃密，生長好，無老化和萎縮現(xiàn)象。

2.2.2栽培方法白鬼筆的栽培方法多種多樣。 按栽培環(huán)境可分為層架式栽培、大田栽培和林下仿野生栽培，其中層架式栽培和仿野生栽培是白鬼筆2種主要的栽培模式[21]。層架式栽培即搭建大棚進行栽培，該方法不受地理空間限制，能集約化生產(chǎn)，便于集中管理，是白鬼筆栽培工廠化的首選方法；大田栽培一般采用溝式栽培法，常與玉米、火麻等農(nóng)作物進行套種，農(nóng)作物能為白鬼筆遮陰，同時提供充足的氧氣，白鬼筆能充分利用作物間土地資源，節(jié)約土地，但必須做好排水和澆水工作；林下仿野生栽培一般為小窩式栽培法，該種植方法簡單易行，能充分利用荒地、荒山資源，取材方便，是在農(nóng)村山區(qū)推廣比較可行的方法。按栽培基質(zhì)可分為純木塊栽培法、木塊秸稈栽培法和木塊木屑栽培法等[21]。最傳統(tǒng)的是木塊栽培法，即將木材切成小塊栽培，此法木材消耗量大，容易破壞生態(tài)環(huán)境，栽培地有限，不適合規(guī)模化推廣應用；木塊秸稈栽培法和木塊木屑栽培法，即將木塊打成木屑和用秸稈代替木材用于栽培白鬼筆，是在木塊栽培法上提升的技術(shù)；此外，還可利用林下枯枝落葉和雜草等作為栽培原料。另外，還有立體式栽培、盆栽及脫袋覆土出菇等栽培方法。

2.2.3營養(yǎng)需求白鬼筆屬木腐真菌，自然狀態(tài)下以枯枝、落葉和竹根等為營養(yǎng)源，其碳源有蔗糖、葡萄糖、淀粉、木質(zhì)素及纖維素等，白鬼筆菌絲能夠直接吸收葡萄糖作碳源。白鬼筆菌種培養(yǎng)基一般以木屑培養(yǎng)基為主，栽培基質(zhì)一般以木屑、農(nóng)作物秸稈為主。氮源是白鬼筆生長不可或缺的，主要氮源為米糠或麥麩。碳氮比(C/N)直接影響白鬼筆生長時間和產(chǎn)量[21]。氮源不足會影響產(chǎn)量，氮源過多不但造成浪費，還會造成菌絲過度生長，影響原基分化，導致出菇量少。白鬼筆菌種培養(yǎng)料適宜碳氮比為(15～20)∶1，栽培料適宜碳氮比為(30～40)∶1。一般麥麩的碳氮比為20∶1，玉米稈為97∶1，木屑為300∶1，花生餅為8∶1。

2.2.4出菇特性桂陽等[31]研究白鬼筆的出菇特性發(fā)現(xiàn)，白鬼筆在破殼生長過程中存在具有不同生長特性的3個生長階段：菌蕾破殼到全部露出孢子體的孢子體裸露階段，此階段平均生長速度差異不顯著；子實體長出3 cm左右，此時生長速度最快，白鬼筆整個生長期的平均生長速度由該階段決定；子實體成型的成熟階段，該階段孢子微臭、變濕呈黑褐色，子實體生長速度很慢，后期趨于停止。

2.2.5采收、加工和貯藏

1) 采收。白鬼筆于每年10～12月采收，由于其菌柄較脆、易斷，采收時需特別小心。另外，不同品種采摘方式不同，一般品種輕旋菌柄即可直接將菌柄完整取出；菌托菌柄難以分離的品種需先將菌托去掉得到菌柄；若是孢子較多的品種應將菌蓋單獨放置集中處理。

2) 加工。不同品種白鬼筆清洗方法不同。菌蓋容易清洗的品種可直接用水槍沖洗；菌蓋難以洗凈的品種可將菌蓋摘下用冷水浸泡過夜后單獨清洗。白鬼筆子實體清洗晾干后應及時進行烘干，否則會影響品質(zhì)。烘干白鬼筆不能用煤火直接烘烤，需用熱風烘干或者電熱烘箱烘干?？党萚32]研究表明，持續(xù)增溫熱風干燥6 h，溫度為70℃時效果較好，菇體形態(tài)好，顏色變化小。

3) 貯藏。白鬼筆應置于陰涼干燥的冷庫貯存，一般要求倉庫濕度低于30%，避免白鬼筆干品回潮發(fā)黃；暫時不銷售的白鬼筆需定時晾曬或排濕，以防腐爛。

3化學成分

目前，國內(nèi)外對鬼筆屬真菌有效成分的研究較少，且因白鬼筆多生于深秋，受地理分布及季節(jié)等因素的限制，測出的成分不全面。BORG-KARLSON等[33]用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定白鬼筆菌柄鮮品，檢出成分為苯乙醛、α-蒎烯、月桂烯、苯甲醛、α-金合歡烯、乙酸、甲苯、2-苯乙醇、苯甲醇、二甲基二硫、二甲基三硫、芳樟醇和反-羅勒烯。菊地徹等[8]用硅膠柱對白鬼筆菌蓋的乙醚提取物進行分離，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進行檢測，除檢出上述苯乙醛、苯甲醛和苯甲醇3種成分外，還檢測到紫蘇烯、苯甲醚、乙酸、鄰苯二甲醚、苯酚、β-苯乙醇及鄰甲氧基苯酚等7種成分。PUDIL等[34]利用HS-SPME技術(shù)結(jié)合GC-MS方法對不同生長期白鬼筆進行揮發(fā)性化合物檢測，共鑒定出59種化學成分，且發(fā)現(xiàn)白鬼筆不同生長階段主要成分含量差異較大，即成熟白鬼筆中含量最高的揮發(fā)性成分有二甲基三硫醚、順式-β-羅勒烯、反式-β-羅勒烯、二苯基乙醛和2-苯乙醇，是白鬼筆散發(fā)惡臭氣味的主要原因，這幾種成分在白鬼筆蛋型階段和過成熟階段均不存在。李文力等[27]研究貴州都勻白鬼筆子實體干品的菌托、菌蓋、菌柄的乙醇和石油醚提取物，并用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀對提取物進行化學成分研究的結(jié)果表明，2種提取物共檢出67種成分，除苯乙醛外其余66種成分在白鬼筆成分研究中未見報道；石油醚提取物共檢測出35種化學成分，其中菌托、菌蓋和菌柄的檢出成分分別為18種、18種和24種；乙醇提取物共檢出38種成分，菌托、菌蓋和菌柄檢出成分分別為12種、26種和28種，其中，異山梨醇、順,順-9,12-十八碳二烯酸、鄰苯二甲酸二異丁酯、二丁基羥基甲苯、1,2-環(huán)戊二酮、煙酰胺、9,12-十八碳二烯酸乙酯及α-吡咯烷酮等成分極具利用價值，而白鬼筆獨特的白蘿卜清香則有可能由5-甲基糠醛、己酸、1-己醇、1-庚醇、苯乙醛、1-辛醇、1-壬醇、十六酸乙酯及2-呋喃甲醇等9種風味物質(zhì)構(gòu)成[27]。因此，可根據(jù)白鬼筆不同部位中各有效成分的分布情況指導白鬼筆的利用，以提高其利用率。如，可根據(jù)異山梨醇、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)、α-吡咯烷酮、順,順-9,12-十八碳二烯酸、鄰苯二甲酸二異丁酯(DIBP)、鄰苯二甲酸二丁酯(DBP)和煙酰胺等成分在菌蓋、菌柄及菌托中含量的差異性，將具有保健功能的菌柄和菌蓋列入食用，而菌托則可考慮制作爬行類昆蟲的趨避劑[28]。

4展望

白鬼筆是一種重要的藥食兩用菌，但目前尚無大規(guī)模栽培利用的研究報道。因此，在對其進行形態(tài)、生態(tài)、分類等研究的同時對其馴化，并研究其栽培技術(shù)、化學成分及藥理活性，才能達到充分利用該資源的目的。KARO等[35]用干朽菌(Meruliuslacrymans)和白鬼筆等的發(fā)酵物通過紫外線照射解毒后加入金屬鹽，用于治療癌癥患者，獲得主觀癥狀改善。白鬼筆折干率很低，僅為5%左右，且子實體的可利用部分不足30%，大部分菌托和孢子體被作為廢品丟棄，但菌托含有豐富的動植物生長所必需的氨基酸、多糖及維生素等物質(zhì)[29]，其中，多糖類物質(zhì)具有抗腫瘤的作用。因此，可進一步研究白鬼筆有效成分及其在白鬼筆生長發(fā)育過程中的作用機制，以期有效地提高白鬼筆的利用率，且通過對調(diào)控機制的研究有望實現(xiàn)白鬼筆不可利用部分向可利用部分的轉(zhuǎn)化，并為白鬼筆的深入研究及開發(fā)利用提供依據(jù)。