王 薇，郭 健，陸海濤，李雪飛，劉利君，段昕所

（承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，河北承德 067000）

宮頸癌是女性生殖系腫瘤中發(fā)病率較高的惡性腫瘤之一[1]，高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染是宮頸癌的主要致病因素[2-3]。本研究分析了河北省承德地區(qū)2014年8月到2018年10月13120例女性生殖道HPV感染者的基因型分布、年齡分布等情況，以期為本地區(qū)HPV的篩查和宮頸癌的防治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 病例來(lái)源 2014年8月至2018年10月，于承德醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院就診、自愿進(jìn)行HPV分型檢測(cè)的13120例女性，均已有性生活史，年齡14歲～90歲，平均年齡41.04歲。

1.2 儀器與試劑 宮頸刷，江蘇健友醫(yī)療科技有限公司；離心機(jī)，北京雷勃爾醫(yī)療器械有限公司；干式恒溫器，杭州奧盛儀器有限公司；PCR擴(kuò)增儀，上海透景生命科技股份有限公司；多功能流式點(diǎn)陣儀（Luminex 200），美國(guó)Luminex公司。

細(xì)胞保存液、核酸提取試劑、人乳頭瘤病毒核酸分型檢測(cè)試劑盒（流式熒光雜交法），上海透景生命科技股份有限公司。檢測(cè)的基因亞型包括17種高危型：16、18、26、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、82型，10種低危型：6、11、40、42、43、44、55、61、81、83型。

1.3 標(biāo)本的采集、檢測(cè)HPV分型 所有入選者使用宮頸刷取宮頸脫落細(xì)胞，所取標(biāo)本放入裝有細(xì)胞保存液的洗脫管中，直立放置4℃冰箱待檢。樣本離心后吸棄上清，加入核酸提取試劑后孵育，離心后取上清，作為PCR擴(kuò)增反應(yīng)的樣品核酸模板，然后進(jìn)行擴(kuò)增。向每個(gè)雜交孔中加入22μl微球雜交液和3μl PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，放入干式恒溫器95℃孵育，使擴(kuò)增產(chǎn)物變性（5min）、雜交（45min）后，加入75μl鏈霉素親和素-藻紅蛋白再于48℃孵育15min，使用多功能流式點(diǎn)陣儀分析HPV的基因型。

2 結(jié)果

2.1 HPV感染情況 13120例女性中HPV陽(yáng)性4238例，感染率為32.30%；27種基因亞型均有檢出，以16型最多，其次為58型、52型、6型。見(jiàn)表1：

表1 HPV各基因型別感染率

2.2 HPV感染類(lèi)別 4238例HPV感染陽(yáng)性病例中，高危感染的比例是60.85%，單一感染的比例64.51%，以高危型、單一型別感染為主。見(jiàn)表2：

表2 感染類(lèi)別及構(gòu)成比（n/4238）

2.3 HPV單一感染的基因型別分布 4238例HPV感染陽(yáng)性病例中，單一感染女性為2734例，全部基因型別均檢出，其中以16型最常見(jiàn)，其次為58型、6型、52型、56型。見(jiàn)圖1：

圖1 單一感染HPV各型別構(gòu)成比

2.4 HPV感染的年齡分布 將12993例有年齡數(shù)據(jù)的HPV陽(yáng)性病例分為11個(gè)年齡段，分別為＜20歲、20～24歲、25～29歲、30～34歲、35～39歲、40～44歲、45～49歲、50～54歲、55～59歲、60～64歲、≥65歲，其中＜20歲、20～24歲，60～64歲年齡段的感染率居前3位，各年齡段感染率呈U形分布。見(jiàn)圖2：

圖2 各年齡段HPV感染陽(yáng)性率

3 討論

宮頸癌是危害女性生命健康的惡性腫瘤，大量研究證實(shí)高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的首要病因[4]。目前研究表明，高危型HPV可通過(guò)降解腫瘤抑制因子、調(diào)節(jié)細(xì)胞周期等機(jī)制導(dǎo)致宿主細(xì)胞發(fā)生變化，且大多數(shù)HPV感染無(wú)明顯癥狀[5]。因此，HPV感染的篩查尤為重要，但我國(guó)婦女對(duì)宮頸癌與HPV關(guān)系的了解尚未普及。

本研究分析了河北省承德地區(qū)13120例女性生殖道HPV感染情況，發(fā)現(xiàn)HPV感染率為32.30%（4238/13120），低于北京（63.10%）[6]、長(zhǎng)沙（44.45%）[7]的HPV感染率，接近天津（31.6%）[8]，高于重慶（19.20%）[9]和福州（17.18%）[10]。承德地區(qū)HPV感染率較高的高危型是16型、58型、52型，與石家莊（16型、58型、52型）的檢測(cè)結(jié)果相同[11]，不同于重慶（16型、43型、58型）[9]，因此提示，HPV感染的亞型分布存在明顯的地區(qū)差異。本研究還顯示，承德地區(qū)HPV感染以單一感染、高危型為主，而HPV高危型持續(xù)性感染是宮頸癌發(fā)生的重要原因，加強(qiáng)HPV感染的監(jiān)測(cè)可為篩查宮頸癌提供依據(jù)，從而做到早預(yù)防、早發(fā)現(xiàn)、早治療。

本研究還分析了河北省承德地區(qū)HPV感染的年齡分布，陽(yáng)性率居前3位的年齡段分別是＜20歲（63.59%，117/184）、20～24歲（44.11%，191/433）、60～64歲（38.40%，134/349），承德地區(qū)HPV感染的年齡分布總體呈U型分布。本研究中20～24歲年齡段女性HPV的感染率最高，根據(jù)研究顯示的從HPV感染到發(fā)生宮頸癌的平均時(shí)間為(12.0±2.9)年[12]，該年齡段HPV感染者可能發(fā)生宮頸癌的年齡為32～38.9歲，與宮頸癌的高發(fā)年齡（35～45歲）部分重合。雖然青年女性HPV感染存在一定的自然消除率，但仍提示在積極開(kāi)展中老婦女防癌篩查的同時(shí)，也要重視青年女性HPV感染的檢測(cè)，以便更有效地降低宮頸癌的發(fā)病率。

高危型HPV持續(xù)感染是宮頸癌的重要危險(xiǎn)因素，HPV疫苗能從根本上降低宮頸癌的發(fā)病率，但由于HPV結(jié)構(gòu)的特殊性，只能針對(duì)某一亞型或某些亞型研發(fā)針對(duì)性的疫苗[13]。本研究顯示承德地區(qū)HPV感染的主要型別是16型、58型、52型、6型。目前已上市的HPV九價(jià)疫苗主要針對(duì)6型、11型、16型、18型、31型、33型、45型、52型和58型，HPV四價(jià)疫苗主要針對(duì)6型、11型、16型、18型，均不能完全覆蓋本地區(qū)HPV感染的主要型別。全國(guó)各地感染HPV的型別存在地區(qū)差異，因此，除了依據(jù)型別的危險(xiǎn)程度研發(fā)疫苗外，若能考慮HPV感染的地區(qū)差異，針對(duì)某地區(qū)HPV的主要感染型別研發(fā)針對(duì)性的疫苗，將有望降低該地區(qū)的HPV感染率，進(jìn)而降低宮頸癌的發(fā)病生率。