單純性肥胖兒童血清25-羥維生素D水平及意義

，，

(1.成都市龍泉驛區(qū)婦幼保健院，四川 成都 610100；2.四川省達(dá)州市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心，四川 達(dá)州 635000)

單純性肥胖的發(fā)生率具有逐年上升趨勢(shì)，流行病學(xué)研究提示，兒童單純性肥胖的發(fā)病率可達(dá)213萬(wàn)～373/萬(wàn)人[1]，特別是在具有肥胖家族史的兒童中，單純性肥胖的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)更高[2]。對(duì)于單純性肥胖病因機(jī)制的研究較少，一般認(rèn)為脂肪細(xì)胞的過(guò)度生成或者代謝活性的下降等，均是影響單純性肥胖發(fā)生的主要因素。近年來(lái)生物學(xué)相關(guān)指標(biāo)在單純性肥胖的研究中逐漸得到重視，生物學(xué)因子的波動(dòng)能夠影響脂肪細(xì)胞的分化，抑制脂肪細(xì)胞的凋亡，進(jìn)而參與到單純性肥胖的發(fā)生過(guò)程中。既往認(rèn)為25-羥維生素D[25-(OH)D3]作為體內(nèi)重要的維生素，主要參與患者體內(nèi)鈣磷代謝過(guò)程，影響骨質(zhì)疏松等疾病的發(fā)生。有研究發(fā)現(xiàn)，血清25-(OH)D3還能夠通過(guò)穩(wěn)定前體脂肪細(xì)胞向脂肪細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，抑制轉(zhuǎn)化的速率，進(jìn)而降低脂肪細(xì)胞的合成和脂肪組織的新生[3-4]，但缺乏臨床研究。為了進(jìn)一步揭示單純性肥胖兒童血清25-(OH)D3水平及意義，為兒童肥胖的防治提供參考，本研究選取了單純性肥胖癥患兒104例，探討25-(OH)D3的表達(dá)及其與兒童血脂、體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)、BMI標(biāo)準(zhǔn)差積分(BMI-standard deviation score，BMISDS)等指標(biāo)的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年1月至2017年12月在成都市龍泉驛區(qū)婦幼保健院及四川省達(dá)州市婦幼保健計(jì)劃生育服務(wù)中心就診的單純性肥胖癥患兒104例，按照超過(guò)同性別、同年齡、同身高健康兒童標(biāo)準(zhǔn)體重20%為肥胖，20%～49%為輕中度肥胖；≥50%為重度肥胖，將其分為輕中度肥胖組64例，重度肥胖組40例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)制定的標(biāo)準(zhǔn)[5]；②患兒監(jiān)護(hù)人知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他原因引起的繼發(fā)性肥胖；②有佝僂病、哮喘、糖尿病、高血壓及肝腎疾??；③近3個(gè)月內(nèi)有維生素D服藥史。同時(shí)選取健康體檢正常體重兒童60例作為對(duì)照。各組性別、年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，見(jiàn)表1，具有可比性。

表1 各組一般資料比較結(jié)果[n(%)，χ±S]

1.2檢測(cè)方法

生化指標(biāo)的檢測(cè)：采用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，檢測(cè)儀器為MAGLUMI化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)25-(OH)D3，檢測(cè)儀器為美國(guó)Bio-Bad全自動(dòng)酶標(biāo)儀，試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。

T淋巴細(xì)胞的檢測(cè)：采集患者靜脈空腹血5mL，加入0.2mL的氯仿，2℃～8℃冰凍離心機(jī)中離心(12 000g/min，15min)，反復(fù)一次洗滌RNA，棄上清，在管底部可見(jiàn)一乳白色小沉淀物，加入1mL 75%乙醇，0.1%蒸餾水水溶解。加入甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GADPH)上下游引物、0.1% DEPC使其終濃度均為20pmol/μL，制備反應(yīng)體系，RT-PCR擴(kuò)增的條件與參數(shù)：48℃ 45min，94℃ 2min；94℃ 30s，58℃ 60s，68℃ 2min，共40個(gè)循環(huán)；循環(huán)完畢后68℃延伸7min。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用(χ±S)表示，多組間比較使用方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較使用χ2檢驗(yàn)；相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析；檢驗(yàn)水準(zhǔn)=0.05，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1各組25-(OH)D3、BMI及BMISDS的比較

輕中度肥胖組和重度肥胖組的25-(OH)D3均明顯低于對(duì)照組，而B(niǎo)MI和BMISDS均明顯高于對(duì)照組(均P<0.05)；重度肥胖組的25-(OH)D3均明顯低于輕中度肥胖組和對(duì)照組(均P<0.05)，而B(niǎo)MI和BMISDS均明顯高于輕中度肥胖組和對(duì)照組(均P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 各組25-(OH)D3、BMI及BMISDS的比較結(jié)果(χ±S)

注：a與對(duì)照組比較P<0.05；b與輕中度肥胖組比較P<0.05。

2.2各組血脂水平的比較

輕中度肥胖組和重度肥胖組的TC、TG和LDL-C均明顯高于對(duì)照組(均P<0.05)，輕中度肥胖組和重度肥胖組的HDL-C均低于對(duì)照組(P>0.05)；重度肥胖組的TC、TG和LDL-C均明顯高于輕中度肥胖組和對(duì)照組(均P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 各組血脂水平的比較結(jié)果(mmol/L，χ±S)

注：a與對(duì)照組比較P<0.05；b與輕中度肥胖組比較P<0.05。

2.3各組T淋巴細(xì)胞亞群的比較

輕中度肥胖組和重度肥胖組的CD3+和CD4+均明顯低于對(duì)照組(均P<0.05)，CD8+均明顯高于對(duì)照組(P>0.05)；重度肥胖組的CD3+和CD4+均明顯低于輕中度肥胖組和對(duì)照組(均P<0.05)，見(jiàn)表4。

表4 各組T淋巴細(xì)胞亞群的比較結(jié)果(%，χ±S)

注：a與對(duì)照組比較P<0.05；b與輕中度肥胖組比較P<0.05。

2.4相關(guān)性分析

對(duì)肥胖癥患兒血清25-(OH)D3與BMI、BMISDS、血脂及T淋巴細(xì)胞亞群進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示25-(OH)D3與BMI、BMISDS和TG呈負(fù)相關(guān)性(r分別為-0.403、-0.398、-0.311，均<0.05)，與CD3+和CD4+呈正相關(guān)性(r分別為0.344、0.321，均P<0.05)。

3討論

3.1兒童單純性肥胖的研究背景

不良飲食習(xí)慣、平素體能鍛煉不足等均能導(dǎo)致兒童單純性肥胖的發(fā)生，特別是在年齡小于14歲缺乏體育鍛煉的人群中，兒童單純性肥胖的發(fā)病率可平均上升7%以上[6]。單純性肥胖的發(fā)生能夠在下列幾個(gè)方面影響兒童的遠(yuǎn)期結(jié)局：①兒童單純性肥胖能夠增加患兒的心肺功能負(fù)擔(dān)，增高兒童遠(yuǎn)期心腦血管疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)；②兒童單純性肥胖能夠?qū)е伦陨泶x性疾病，特別是2型糖尿病或者高血脂癥的發(fā)生，增加其自身免疫性疾病或者慢性炎癥性疾病發(fā)生的可能。但現(xiàn)階段臨床上缺乏對(duì)兒童單純性肥胖有效的預(yù)防措施，本研究通過(guò)對(duì)25-(OH)D3水平的研究，能夠?yàn)榭诜S生素D預(yù)防兒童單純性肥胖提供理論基礎(chǔ)，并為臨床上高危人群的篩查提供參考。

3.2 25-(OH)D3生理作用與肥胖的關(guān)系

25-(OH)D3可以通過(guò)7-脫氫膽固醇經(jīng)日光中的紫外線照射轉(zhuǎn)化而來(lái)，其能夠促進(jìn)骨鈣沉積和骨的形成，增強(qiáng)骨的溶解，參與到骨質(zhì)代謝過(guò)程中。近年來(lái)基礎(chǔ)領(lǐng)域的研究提示，25-(OH)D3還廣泛參與細(xì)胞代謝、細(xì)胞生物學(xué)形態(tài)的維持、腫瘤細(xì)胞的早期調(diào)控過(guò)程。25-(OH)D3的表達(dá)能夠調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞對(duì)于三磷酸腺苷(ATP)的利用能力，穩(wěn)定細(xì)胞膜上ATP的濃度，穩(wěn)定脂肪細(xì)胞的能量供應(yīng)，降低持續(xù)性的脂肪細(xì)胞擴(kuò)增和分化成熟的風(fēng)險(xiǎn)[7-8]。部分研究者報(bào)道發(fā)現(xiàn)，在兒童單純性肥胖人群中，25-(OH)D3的表達(dá)濃度可明顯下降，因此認(rèn)為25-(OH)D3的下降是促進(jìn)單純性肥胖BMI上升的重要因素[9-10]，但對(duì)于25-(OH)D3的表達(dá)與兒童T淋巴細(xì)胞亞群或者血脂水平的關(guān)系研究不足。

3.3 25-(OH)D3在兒童單純性肥胖中的表達(dá)及其與免疫功能的關(guān)系

本研究中輕中度肥胖組和重度肥胖組兒童的BMI及BMISDS明顯升高，提示了其體重的顯著改變，而在輕中度肥胖組和重度肥胖組兒童中，血清中25-(OH)D3的表達(dá)明顯下降，特別是隨著肥胖程度的增加，血清中25-(OH)D3的表達(dá)進(jìn)一步下降，提示25-(OH)D3與肥胖的發(fā)生可能有密切的關(guān)系。25-(OH)D3的下降能夠通過(guò)下列機(jī)制促進(jìn)兒童單純性肥胖的發(fā)生[11-13]：①25-(OH)D3的低表達(dá)失去了其對(duì)脂肪細(xì)胞分化成熟能力的調(diào)控作用，導(dǎo)致脂肪細(xì)胞的分化成熟明顯增強(qiáng)；②25-(OH)D3的表達(dá)影響到脂肪細(xì)胞的基礎(chǔ)代謝水平，導(dǎo)致脂肪細(xì)胞的凋亡明顯減少。2017年趙曉玲等認(rèn)為在單純性肥胖兒童中，25-(OH)D3的表達(dá)可平均下降25%以上，同時(shí)隨訪BMI上升，25-(OH)D3的表達(dá)具有進(jìn)一步下降趨勢(shì)，同時(shí)認(rèn)為通過(guò)口服補(bǔ)充生理性劑量的維生素D，能夠有效地控制肥胖病情的進(jìn)展。TC、TG和LDL-C是評(píng)估患者血脂代謝的重要指標(biāo)。本研究重度肥胖組兒童中，TC、TG和LDL-C的表達(dá)濃度均明顯上升，高于正常對(duì)照兒童或輕度肥胖組，差異較為明顯，提示了血脂代謝紊亂與肥胖有關(guān)。這主要由于肥胖兒童的飲食結(jié)構(gòu)不合理，多為高脂高熱量食物，增加了血脂代謝的負(fù)擔(dān)，導(dǎo)致了肝臟對(duì)血脂代謝作用的下降。CD3+和CD4+T淋巴細(xì)胞是評(píng)估免疫功能的指標(biāo)，免疫功能的紊亂能夠通過(guò)脂肪代謝因子影響到脂肪細(xì)胞膜表面受體的敏感性，導(dǎo)致脂肪細(xì)胞的分解代謝異常。本研究中輕中度肥胖組和重度肥胖組兒童的CD3+和CD4+T淋巴細(xì)胞明顯下降，提示其T淋巴細(xì)胞免疫抗原提呈功能下降，具體機(jī)制不清，考慮可能與肥胖或高脂血癥導(dǎo)致的T淋巴細(xì)胞功能損傷有關(guān)。經(jīng)相關(guān)關(guān)系分析發(fā)現(xiàn)，25-(OH)D3與BMI、BMISDS和TG呈負(fù)相關(guān)性，而與CD3+和CD4+呈正相關(guān)性，提示了25-(OH)D3與血脂代謝、BMI或T淋巴細(xì)胞的關(guān)系，進(jìn)一步表明25-(OH)D3與單純性肥胖的病情密切相關(guān)。

3.4總結(jié)

本研究的創(chuàng)新性在于分析了25-(OH)D3的表達(dá)與單純性肥胖兒童的T淋巴細(xì)胞或血脂水平的關(guān)系。綜上所述，單純性肥胖兒童血清25-(OH)D3水平明顯降低，與患兒肥胖程度、血脂及免疫功能有一定的關(guān)系，值得進(jìn)一步研究。