■ 歐陽(yáng)依娜 李銀江 李衛(wèi)娟 薛 白 王思宇 梁家充 廖錫鴻 洪瓊花*

（1.云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，云南昆明650224；2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所，四川成都611130；3.永善縣畜牧技術(shù)推廣站，云南昭通657300）

云南半細(xì)毛羊是由云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院經(jīng)過(guò)多年培育而成的毛肉兼用型新品種，是南方高寒濕潤(rùn)山區(qū)農(nóng)民重要的經(jīng)濟(jì)來(lái)源之一，目前人們對(duì)其營(yíng)養(yǎng)代謝規(guī)律知之甚少。鈣是飼糧中必需且含量最多的礦物質(zhì)元素，可以影響體內(nèi)其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝[1]。當(dāng)飼糧中鈣供給長(zhǎng)期不足或鈣磷比例不當(dāng)可引起羊一系列骨骼疾病、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、飼料利用率低、繁殖力下降等情況，尤其妊娠期母羊可導(dǎo)致其難產(chǎn)、胎衣不下、子宮脫出、產(chǎn)后癱瘓甚至死亡[1-2]；相反，當(dāng)飼糧中鈣攝取量超過(guò)需要量時(shí)，鈣吸收率將隨其添加含量增加而下降，既會(huì)降低能量和蛋白質(zhì)的消化利用率，還會(huì)導(dǎo)致磷、鎂、鋅等元素發(fā)生代謝紊亂[3-4]。目前，國(guó)內(nèi)外研究人員袁浩容等[5]、王勇等[6]、王浩等[7]和Liesegang等[8]探討了不同鈣水平及鈣磷比例飼糧對(duì)歐拉型后備母羊、牧巴音布魯克哺乳母羊、陜北白絨山羊斷奶羔羊、東弗里西亞奶羊和薩能奶山羊生產(chǎn)性能、養(yǎng)分消化代謝、血清指標(biāo)及骨代謝的影響。在已知的營(yíng)養(yǎng)素對(duì)能量代謝的影響方面，日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)動(dòng)物能量代謝的影響已有較多研究，但尚未見(jiàn)到關(guān)于飼糧不同鈣水平對(duì)妊娠期母羊能量代謝影響的研究報(bào)道。為加快整個(gè)烏蒙山區(qū)和藏區(qū)養(yǎng)羊產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，半細(xì)毛羊營(yíng)養(yǎng)需要量研究將成為提高產(chǎn)業(yè)關(guān)鍵技術(shù)支撐水平的重點(diǎn)之一。目前針對(duì)云南半細(xì)毛羊營(yíng)養(yǎng)需要量的研究才剛剛開(kāi)始[9-10]，而關(guān)于云南半細(xì)毛羊妊娠期能量代謝及其影響因素的研究尚未開(kāi)展。本試驗(yàn)旨在探討飼糧中不同鈣水平對(duì)云南半細(xì)毛羊妊娠期能量代謝的影響，以便充分了解日糧能量水平與鈣水平間的合理搭配，為制定云南半細(xì)毛羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)及提高云南半細(xì)毛羊養(yǎng)殖效益提供理論依據(jù)和科學(xué)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇50只體況良好、體重[(60.95±4.05)kg]相近、年齡一致的經(jīng)產(chǎn)兩胎妊娠期云南半細(xì)毛羊?yàn)樵囼?yàn)動(dòng)物，隨機(jī)分為Ⅰ～Ⅴ組，每組10個(gè)重復(fù)。Ⅰ～Ⅴ組試驗(yàn)羊分別飼喂5個(gè)不同鈣水平的飼糧，妊娠前期和中期鈣水平分別為0.42%、0.45%、0.56%、0.65%和0.82%，妊娠后期鈣水平分別為0.40%、0.50%、0.60%、0.69%和0.87%，日糧其它營(yíng)養(yǎng)成分保持一致，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1和表2。所有試驗(yàn)羊進(jìn)行104 d飼養(yǎng)試驗(yàn)，其中妊娠第46 d至第60 d為預(yù)試期，妊娠第61 d至第150 d為正試期，包括妊娠第61 d至第90 d為前期、妊娠第91 d至第120 d為中期、妊娠第121 d至第150 d為后期。

1.2 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)于2017年10月～2018年1月在云南省昆明易興恒畜牧科技有限公司進(jìn)行。試驗(yàn)開(kāi)始前將羊舍地面、羊欄、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)等打掃干凈和嚴(yán)格消毒，并檢查食槽和水槽有無(wú)異常。對(duì)試驗(yàn)羊進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)，單欄飼養(yǎng)，每天08:00和17:00各飼喂1次，自由飲水。對(duì)妊娠第46 d云南半細(xì)毛羊稱重分組，隨后進(jìn)入14 d預(yù)試期。在預(yù)試期，熟悉試驗(yàn)羊飼養(yǎng)管理流程，并記錄各組試驗(yàn)羊的采食量，根據(jù)前1 d的采食量調(diào)整第2 d飼喂量，以確保其自由采食，即飼槽內(nèi)有10%左右的剩料。正試期開(kāi)始后，每天準(zhǔn)確記錄每只羊的采食量。

表1 妊娠前期和中期試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

表2 妊娠后期試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 消化代謝試驗(yàn)樣品采集與處理

在妊娠71～75 d（妊娠前期）、101～105 d（妊娠中期）、131～135 d（妊娠后期）分別從各試驗(yàn)組中選擇體重相近、健康的5只羊置于消化代謝籠中進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)。采用全收糞尿法，連續(xù)收集5 d，每天稱取并記錄每只羊的排糞量和排尿量，糞樣按20%取樣，平均分成2份，-20℃保存?zhèn)溆茫渲幸环莅?%的比例加入10%稀HCl固氮，用于測(cè)定粗蛋白含量，另一份則按3%的比例加入10%甲醛溶液殺滅微生物，用于測(cè)定能量及其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量；尿樣充分混勻，用紗布過(guò)濾后按10%取樣，并加入10%稀HCl，使其pH值低于3.0固氮，于-20℃保存用于測(cè)定尿能及其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量。飼喂前，每天采集各組混合精料200 g，剩余粗料200 g，-20℃保存用于測(cè)定營(yíng)養(yǎng)成分。

1.4 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.4.1 飼糧、糞和尿中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

粗蛋白質(zhì)含量使用KT200 KjeltecTM型凱氏定氮儀測(cè)定(丹麥FOSS)；粗灰分、粗脂肪、中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維、鈣、磷等含量參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》[11]測(cè)定；能量用氧彈測(cè)熱量法測(cè)定。

1.4.2 能量代謝

本試驗(yàn)飼糧攝入總能（GE）、消化能（DE）、代謝能（ME）、GE消化率、GE代謝率和DE代謝率計(jì)算公式如下：

其中，甲烷能參照Blaxter等[12]的方法估算，甲烷能占GE百分比（%）=3.67+0.062×GE消化率+0.05×GE消化率-2.37。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2007進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)初步統(tǒng)計(jì)，采用SPSS 19.0軟件中ANOVA程序進(jìn)行單因素方差分析及Duncan's法多重比較，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，當(dāng)P＜0.05時(shí)為差異顯著，當(dāng)P＜0.01時(shí)為差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 不同日糧鈣水平對(duì)妊娠前期云南半細(xì)毛羊能量代謝的影響(見(jiàn)表3)

由表3可知，妊娠前期0.45%鈣水平組妊娠母羊的總能攝入量極顯著高于0.56%、0.65%和0.82%鈣水平組（P＜0.01），且該組糞能排泄量顯著高于0.42%、0.65%和0.82%鈣水平組（P＜0.05）；0.56%鈣水平組尿能排泄量顯著高于其他4個(gè)鈣水平組（P＜0.05）；甲烷能、DE、ME、總能消化率（DE/GE）和總能代謝率（ME/GE）在不同鈣水平組間無(wú)顯著差異（P＞0.05）；0.42%鈣水平組消化能代謝率（ME/DE）最高，且極顯著高于0.56%鈣水平組（P＜0.01），而0.42%、0.45%、0.65%和0.82%鈣水平組間差異不顯著（P＞0.05），消化能代謝率隨鈣水平的升高先下降后升高。

表3 不同鈣水平飼糧對(duì)妊娠前期云南半細(xì)毛羊能量代謝的影響

2.2 不同日糧鈣水平對(duì)妊娠中期云南半細(xì)毛羊能量代謝的影響（見(jiàn)表4）

從表4可知，妊娠中期母羊的總能攝入量為0.42%鈣水平組最高，但該組與其它組間差異不顯著（P＞0.05）；0.56%鈣水平組糞能排泄量極顯著高于0.65%和0.82%鈣水平組（P＜0.01），而其尿能排泄量則顯著高于其他4個(gè)鈣水平組（P＜0.05）；0.82%鈣水平組甲烷能、DE、ME、總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率最高，其中其總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率顯著高于0.45%和0.56%鈣水平組（P＜0.05），與0.42%和0.65%組差異不顯著（P＞0.05）。

表4 不同鈣水平飼糧對(duì)妊娠中期云南半細(xì)毛羊能量代謝的影響

2.3 不同日糧鈣水平對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊能量代謝的影響(見(jiàn)表5)

由表5可知，妊娠后期母羊的總能攝入量和糞能排泄量均為0.50%鈣水平組最高，但組間差異不顯著（P＞0.05）；0.40%鈣水平組的尿能排泄量、甲烷能、DE和ME最高，但與其它組間差異不顯著（P＞0.05）；0.40%鈣水平組總能消化率極顯著高于0.50%鈣水平組（P＜0.01），顯著高于0.87%鈣水平組（P＜0.05），且該組總能代謝率顯著高于0.50%和0.87%鈣水平組（P＜0.05），而與0.60%和0.69%鈣水平組間差異不顯著（P＞0.05）；0.60%鈣水平組消化能代謝率最高，但與其它組間差異未達(dá)到顯著水平（P＞0.05）。

表5 不同鈣水平飼糧對(duì)妊娠后期云南半細(xì)毛羊能量代謝的影響

2.4 不同日糧鈣水平對(duì)云南半細(xì)毛羊整個(gè)妊娠期能量代謝的影響（見(jiàn)表6）

如表6可知，整個(gè)妊娠期飼糧不同鈣水平顯著或極顯著影響了云南半細(xì)毛羊各能量代謝指標(biāo)。0.52%鈣水平組總能攝入量顯著高于0.66%和0.78%鈣水平組（P＜0.05）；0.52%鈣水平組糞能排泄量則顯著高于0.48%、0.78%和0.95%鈣水平組（P＜0.05），而0.48%、0.66%、0.78%和0.95%鈣水平組組間差異不顯著（P＞0.05）；0.66%鈣水平組尿能排泄量最高，顯著高于0.95%鈣水平組（P＜0.05）；0.48%鈣水平組甲烷能、DE和ME顯著高于0.66%鈣水平組（P＜0.05），與其它組間差異不顯著（P＞0.05）；0.48%和0.78%鈣水平組總能消化率和代謝率顯著高于0.52%和0.66%鈣水平組（P＜0.05），而0.52%、0.66%和0.95%鈣水平組間差異不顯著（P＞0.05）；0.95%鈣水平組消化能代謝率顯著高于0.66%鈣水平組（P＜0.05），與0.48%、0.52%和0.78%鈣水平組差異不顯著（P＞0.05）。

表6 不同鈣水平飼糧對(duì)云南半細(xì)毛羊整個(gè)妊娠期能量代謝的影響

3 討論

能量是維持動(dòng)物體內(nèi)一切新陳代謝和生產(chǎn)活動(dòng)的基礎(chǔ)，近年來(lái)大量研究發(fā)現(xiàn)，動(dòng)物的年齡、品種、性別、飼糧營(yíng)養(yǎng)水平和結(jié)構(gòu)、環(huán)境因素等均可影響反芻動(dòng)物的能量代謝[13-15]。研究在不同鈣水平飼糧條件下，云南半細(xì)毛羊妊娠母羊?qū)δ芰康睦眯?，?duì)研究云南半細(xì)毛羊在特定生理階段的鈣營(yíng)養(yǎng)需要量及充分利用本地飼料資源配制飼糧具有重要意義。

糞能是反芻動(dòng)物飼料能量損失最大的部分，當(dāng)飼喂精料時(shí)糞能損失為20%～30%，飼喂粗飼料時(shí)為40%～50%[16]。本研究中，云南半細(xì)毛羊妊娠前期、中期、后期糞能損失平均值分別為44.14%、43.33%和37.39%，其中在妊娠前期和中期，云南半細(xì)毛羊的糞能損失占總能的比例處于同一水平（P＞0.05），極顯著高于妊娠后期（P＜0.01）。崔璨[17]研究發(fā)現(xiàn)，杜蒙F1雜交母羊糞能占總能之比在空懷期和妊娠期為35%～43%，而哺乳期僅有27%～34%。樓燦等[18]則報(bào)道不同飼養(yǎng)水平杜寒雜交母羊妊娠前期、中期和后期的糞能損失平均值分別為42.52%、37.10%和35.81%，隨著妊娠時(shí)間延長(zhǎng)，糞能有不同程度的減少，這與本研究發(fā)現(xiàn)的妊娠顯著提高了云南半細(xì)毛羊母羊?qū)δ芰康南眯式Y(jié)果一致。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)0.52%和0.66%鈣水平對(duì)云南半細(xì)毛羊整個(gè)妊娠期糞能損失影響最大，其中妊娠前期糞能不易受飼糧鈣水平的影響；妊娠中期0.82%鈣水平組糞能所占總能比例最低，0.56%鈣水平組則最多；而妊娠后期0.40%鈣水平組糞能損失最少，0.50%鈣水平組則最多。樓燦等[18]和張少豐[19]報(bào)道了杜寒雜交母羊、薩阿雜交綿羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平（0.80%、0.85%）糞能損失平均值分別為37.10%和31.13%，分別比本研究的結(jié)果低（6.22%和12.19%）；本研究結(jié)果與樓燦等[18]和李蕓等[20]關(guān)于杜寒雜交母羊、道寒雜交母羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平（0.80%、0.83%）對(duì)糞能損失的影響相似。

反芻動(dòng)物的尿能損失則較穩(wěn)定，飼料中的蛋白質(zhì)水平、氨基酸平衡狀況及有害成分含量等因素均可影響尿氮的排泄量，從而增加或減少尿能損失，最終促使機(jī)體代謝能值發(fā)生改變。通常反芻動(dòng)物尿能損失為4%～5%[16]。李蕓等[20]研究發(fā)現(xiàn)，不同飼養(yǎng)水平道寒母羊尿能占總能的比例妊娠前期為1.47%～1.89%，妊娠后期為1.69%～2.49%。馬鐵偉等[21]研究表明，杜湖雜交F1代母羊妊娠前期、中期和后期的尿能損失分別為3.98%、3.55%和4.26%。樓燦等[18]則發(fā)現(xiàn)杜寒雜交母羊妊娠前期、中期和后期的尿能損失分別為3.05%、3.49%和3.00%。本試驗(yàn)中，云南半細(xì)毛羊妊娠前期、中期和后期尿能損失平均值分別為1.18%、1.84%和1.20%，遠(yuǎn)低于其他學(xué)者的報(bào)道。本研究還發(fā)現(xiàn)，0.66%鈣水平對(duì)云南半細(xì)毛羊整個(gè)妊娠期尿能損失影響最大，其中隨著飼糧中鈣水平不斷升高，妊娠前期和中期尿能呈先升高后降低的趨勢(shì)，0.56%鈣水平組尿能所占總能比例顯著高于其它4組，其它4組間差異不顯著，樓燦等[18]和張少豐[19]報(bào)道了杜寒雜交母羊、薩阿雜交綿羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平（0.80%、0.85%）尿能損失平均值分別為3.49%和4.38%，分別比本研究的結(jié)果高1.65%和2.54%；而妊娠后期提高飼糧鈣水平并不能顯著增加尿能排出量，即飼糧Ca水平不影響云南半細(xì)毛羊妊娠后期的尿能排泄率。

反芻動(dòng)物由于瘤胃發(fā)酵過(guò)程會(huì)釋放甲烷，以甲烷形式損失的能量占飼糧總能的6%～10%[22-23]。甲烷的排放量受到采食量[24]、飼糧精粗比[25-26]、碳水化合物含量等因素的影響。云南半細(xì)毛羊妊娠前期、中期、后期甲烷占總能平均值為7.55%、7.65%、8.31%，妊娠后期甲烷能極顯著高于前期和中期，可能與妊娠后期營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率增高有關(guān)。該結(jié)果與空懷期陜北絨山羊（7.78%）[27]、杜泊雜交羊（7.64%～8.64%）[28]的研究結(jié)果一致，但比限飼杜湖雜交F1代妊娠期母羊（7.42%～15.43%）[21]和杜寒雜交妊娠中、后期母羊（10.68%～11.50%）[18]的研究結(jié)果略低。本研究中云南半細(xì)毛羊整個(gè)妊娠期甲烷能排放量受0.48%和0.78%鈣水平飼糧影響最大，其中飼糧鈣水平對(duì)妊娠前期甲烷能排放量影響不顯著，妊娠中期、后期分別以0.82%、0.40%鈣水平組甲烷能占總能比例最高，而0.56%和0.50%鈣水平組甲烷能損失最少。樓燦等[18]報(bào)道的杜寒雜交母羊妊娠中、后期飼糧適宜鈣水平（0.80%）甲烷能損失平均值分別為11.15%和11.00%，均比本研究的結(jié)果高3.50%和2.69%；張少豐[19]報(bào)道了薩阿雜交綿羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平0.85%甲烷能損失平均值為4.90%，比本研究的結(jié)果低2.75%；李蕓等[20]研究發(fā)現(xiàn)道寒雜交母羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平0.83%甲烷能損失平均值為14.49%，比本研究的結(jié)果高6.18%；本研究結(jié)果與王惠[29]報(bào)道的陜北白絨山羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平（0.50%）對(duì)甲烷能損失影響相似。

本研究中，云南半細(xì)毛羊在妊娠前期、中期、后期的總能消化率分別為54.66%～57.33%、54.86%～58.21%和61.17%～64.46%，總能代謝率分別為46.15%～48.38%、45.14%～48.84%和51.75%～54.53%，消化能代謝率則分別為83.79%～84.60%、82.26%～83.91%和84.53%～85.02%。結(jié)果表明，隨著妊娠周期的延長(zhǎng)，總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率逐漸增加，這可能與妊娠后期胎兒迅速生長(zhǎng)及母羊哺乳期所需營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)備有關(guān)，使其能量需要量不斷增大以滿足機(jī)體的基礎(chǔ)代謝。張崇玉等[30]報(bào)道了大尾寒羊妊娠中期總能消化率和代謝率分別為66.6%和54.6%，妊娠后期則分別為68.5%和56.2%。樓燦等[18]研究發(fā)現(xiàn)杜寒雜交母羊在妊娠40、100、130 d時(shí)總能消化率分別為57.05%～58.43%、61.26%～64.53%和63.29%～66.49%。馬鐵偉等[21]研究發(fā)現(xiàn)杜湖雜交母羊在妊娠40、100、130 d時(shí)總能消化率分別為51.18%～64.25%、60.86%～66.17%、63.20%～67.36%。以上研究報(bào)道與本試驗(yàn)中妊娠顯著提高了云南半細(xì)毛羊母羊?qū)︼暭Z能量的消化利用趨勢(shì)相一致。

同時(shí)，低鈣水平（0.48%）飼糧顯著提高了云南半細(xì)毛羊整個(gè)妊娠期的總能消化率和總能代謝率，而高鈣水平（0.95%）飼糧則顯著提高了其消化能代謝率，其中由于糞能和尿能的減少，妊娠前期0.42%鈣水平飼糧提高了云南半細(xì)毛羊消化能代謝率，但沒(méi)有影響其總能消化率和總能代謝率，該結(jié)果與樓燦等[18]和李蕓等[20]報(bào)道的杜寒雜交母羊、道寒雜交母羊妊娠前期飼糧適宜鈣水平（0.57%、0.48%）對(duì)總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率影響相似；張少豐[19]報(bào)道薩阿雜交綿羊妊娠前期飼糧適宜鈣水平（0.85%）總能消化率和總能代謝率平均值分別為67.2%和58.19%，王惠[29]關(guān)于陜北白絨山羊妊娠前期飼糧適宜鈣水平（0.50%）總能消化率和總能代謝率平均值分別為65.31%和54.67%，均比本研究相近鈣水平的結(jié)果高。同時(shí)，妊娠中期0.82%鈣水平飼糧則顯著提高了云南半細(xì)毛羊的總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率，該結(jié)果與樓燦等[18]研究的杜寒雜交母羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平（0.80%）總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率相似；張少豐[19]報(bào)道了薩阿雜交綿羊妊娠中期飼糧適宜鈣水平（0.85%）總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率平均值分別為68.69%、59.29%和86.34%，均比本研究相近鈣水平（0.82%）的結(jié)果高。此外，妊娠后期0.40%鈣水平飼糧提高了云南半細(xì)毛羊的總能消化率和總能代謝率，且總能消化率和總能代謝率隨飼糧添加鈣水平的升高有降低趨勢(shì)，這與樓燦等[18]、李蕓等[20]和王惠[29]報(bào)道的杜寒雜交母羊、道寒雜交母羊和陜北白絨山羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平（0.80%、0.83%和0.50%）總能消化率、總能代謝率和消化能代謝率研究結(jié)果一致，但云南半細(xì)毛羊妊娠后期飼糧適宜鈣水平偏低。

綜上所述，在云南半細(xì)毛羊妊娠前期、中期、后期，飼糧中分別含0.42%、0.82%、0.40%鈣時(shí)對(duì)能量利用最有利，此時(shí)代謝能占總能的比例最高。

4 結(jié)論

①本試驗(yàn)條件下，云南半細(xì)毛羊妊娠前期、中期、后期對(duì)能量的平均消化率分別為54.66%～57.33%、54.86%～58.21%和61.17%～64.46%（DE/GE），對(duì)能量的代謝率分別為46.15%～48.38%、45.14%～48.84%和 51.75%～54.53%（ME/GE），或 83.79%～84.60%、82.26%～83.91%和84.53%～85.02%（ME/DE）。

②云南半細(xì)毛羊妊娠前期、中期、后期母羊飼糧中分別含0.42%、0.82%、0.40%鈣時(shí)能量利用率最佳。