萬順之

【摘 要】 手性藥物在現(xiàn)代藥物中所占比例較大，手性藥物的拆分對(duì)近現(xiàn)代的醫(yī)學(xué)藥物研究有著至關(guān)重要的影響。在手性藥物的拆分研究中，色譜技術(shù)一直都是不可或缺的一項(xiàng)技術(shù)，因此本文特將一些主流的色譜技術(shù)進(jìn)行羅列，并分析其在手性藥物拆分中實(shí)踐與應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】 手性藥物；色譜技術(shù)；藥理活性

【中圖分類號(hào)】

R749.053 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】

B 【文章編號(hào)】1005-0019（2019）07-223-02

前言：

手性藥物主要是指藥物分子結(jié)構(gòu)中心具有手性特征的藥物，比較常見的有維生素、甾體、生物堿類藥物，這些藥物的分子立體結(jié)構(gòu)無法與自身鏡像重合，因而被稱為手性藥物。手性藥物分解難度大，而為了更好的了解手性藥物特性，必須要完成其拆分工作，為此，研究人員發(fā)明出了多種拆分方法，包括生物拆分、晶體拆分、機(jī)械拆分、色譜拆分等，其中尤以色譜拆分法最為理想。

1 手性藥物色譜拆分的意義

手性藥物自身先天條件特殊，因此在藥理活性、機(jī)體循環(huán)方面有別于其他藥物且各自差異較大[1]。手性新藥與人民群眾的用藥關(guān)系密切，因而其研發(fā)與生產(chǎn)必須要做到安全穩(wěn)定，這就要求藥品生產(chǎn)企業(yè)必須要快速準(zhǔn)確的了解手性藥物成分特征，而色譜技術(shù)便能夠幫助企業(yè)快速完成藥物分析工作，提高藥物質(zhì)量與安全性[2]?，F(xiàn)階段，手性藥物拆分技術(shù)種類較多，包括薄層色譜技術(shù)、高效液相色譜技術(shù)、氣相色譜技術(shù)以及超臨界流體色譜技術(shù)等，這些技術(shù)彼此之間存在一定差異，同時(shí)還能夠做到優(yōu)缺互補(bǔ)。

2 色譜拆分法羅列

2.1 薄層色譜

薄層色譜技術(shù)誕生于上世紀(jì)三十年代，隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步，該技術(shù)已發(fā)展為高效薄層色譜、離心薄層色譜技術(shù)、梯度展開技術(shù)等，在手性藥物拆分上取得了較好的成績(jī)。薄層色譜技術(shù)在手性藥物的拆分研究中具有諸多優(yōu)勢(shì)，包括色譜參數(shù)調(diào)整簡(jiǎn)易、分析速度快、效率高、設(shè)備要求低、操作簡(jiǎn)單等，因而在手性藥物拆分中應(yīng)用較多[3]。但值得注意的是，該技術(shù)仍有著靈敏度偏低的缺陷，因此在使用范圍上仍局限于定性分析手性藥物。薄層色譜技術(shù)在手性藥物拆分中的應(yīng)用方法大致分為三類，分別是手性固定相法、手性流動(dòng)相添加劑法、手性試劑衍生化法。其中，手性固定相法主要以手性試劑浸漬性固定相、手性氨基酸金屬配體交換、纖維素及其衍生物等為主，國(guó)外有學(xué)者以微晶三乙酰纖維素作為薄層板對(duì)卡洛芬、苯氧布洛芬、氟比洛芬等藥進(jìn)行拆分。手性流動(dòng)相添加劑法主要以添加手性離子對(duì)試劑及其衍生物為主，國(guó)外有學(xué)者將含有樟腦酸銨的對(duì)試劑為展開劑，對(duì)含苯基-α-氨基醇的8類藥物進(jìn)行了拆分。

2.2 高效液相色譜

高效液相色譜技術(shù)起步于上世紀(jì)七十年代，雖然較薄層色譜技術(shù)晚了四十年，但在手性藥物拆分的應(yīng)用范圍上卻要廣于波層色譜技術(shù)，并在當(dāng)今已發(fā)展為應(yīng)用最廣的手性藥物拆分技術(shù)[4]。高效液相色譜技術(shù)在拆分藥物上主要分為兩種類型，一種直接拆分類型，包括手性固定相法和手性流動(dòng)相添加劑法，另一種則是間接類型，只有一種，即手性衍生化試劑法。這三種方法在拆分原理上各不相同，其中手性固定相法和手性流動(dòng)相添加劑法是把不對(duì)稱中心置入分子之間，而手性衍生化試劑法是把不對(duì)稱中心引入分子內(nèi)部。

2.2.1 手性固定相法：

手性固定相法使用起來較為簡(jiǎn)單方便，并且不需要高光學(xué)純度的衍生化試劑，但是在通用性上稍顯不足，因而有時(shí)會(huì)將樣品進(jìn)行柱前衍生化處理，以確保拆分效果。手性固定相法的構(gòu)成為單體鍵合高光學(xué)純度的手性異構(gòu)體，在進(jìn)行拆分時(shí)，手性異構(gòu)體會(huì)同對(duì)映體產(chǎn)生反應(yīng)，其中一個(gè)便會(huì)生成不穩(wěn)定對(duì)應(yīng)體復(fù)合物，這種復(fù)合物的存在時(shí)間較短，正是因此才能夠使兩種物質(zhì)因存在時(shí)間不同而完成分離[5]?，F(xiàn)代的研究方法中比較常用的手性固定相法有以下幾類：冠醚類固定相、蛋白質(zhì)鍵合固定相、纖維素及多糖衍生物固定相、環(huán)糊精類固定相。

2.2.2 手性流動(dòng)相添加劑法

手性流動(dòng)相添加劑法同樣屬于直接拆分類型，因而在操作上亦較為便捷，在拆分期間很少會(huì)出現(xiàn)消旋化，可用的添加劑范圍也比較寬泛，并且能夠從柱后洗脫中回收一定量的純對(duì)映體，但相應(yīng)的，該種技術(shù)所需要的添加劑劑量較大，要保證系統(tǒng)長(zhǎng)時(shí)間處于平衡狀態(tài)。手性流動(dòng)相添加劑法是把手性試劑加入流動(dòng)相中，使其能夠與溶質(zhì)生成以金屬離子配位鍵、氫鍵的非對(duì)應(yīng)體締合物，隨后施以常規(guī)的高效液相色譜進(jìn)行分離。手性流動(dòng)相添加劑法在現(xiàn)代研究中的應(yīng)用主要以以下幾類為主，手性誘導(dǎo)吸附、手性包含復(fù)合、手性離子對(duì)、蛋白質(zhì)復(fù)合物、手性配合交換[6]。

2.2.3 手性衍生化試劑法

手性衍生化試劑法屬于間接拆分型，對(duì)分離條件要求不高，并且分離效果較為理想，但是在具體操作上較為麻煩，在分離時(shí)還需要純度較高的衍生化試劑，并且容易出現(xiàn)消旋化現(xiàn)象。手性衍生化試劑法是把藥物對(duì)映體進(jìn)行衍生，使其生成非對(duì)映異構(gòu)體，然后再實(shí)施色譜分離[7]。

2.3 氣相色譜

氣相色譜技術(shù)在拆分手性藥物上應(yīng)用較早，它需要選擇合適的吸附劑作為固定相，這些吸附劑一般都具有手性特征，這樣便能夠有選擇性的進(jìn)行吸附，故而在分離效率上表現(xiàn)較好，并且具有較高的精度和靈敏度，在面對(duì)一些易揮發(fā)的手性藥物時(shí)能夠保持更高的分離效率，但相應(yīng)的，在面對(duì)一些不具熱穩(wěn)定或揮發(fā)性的手性藥物時(shí)無法達(dá)到最佳分離效率，因而對(duì)樣品類型有著一定的要求。比較常見的氣相色譜拆分技術(shù)主要有三種，分別是環(huán)糊精衍生物固定相、手性金屬配合物固定相、氫鍵手性固定相，在這三種類型中，尤以環(huán)糊精衍生物固定相的發(fā)展速度最快、適用范圍更廣。氣相色譜技術(shù)在進(jìn)行手性藥物拆分時(shí)，需要先合成合格的手性試劑，然后制柱，再使樣品衍生化，隨后為其設(shè)定準(zhǔn)確的色譜條件。但需要注意的是，氣相色譜技術(shù)在進(jìn)行手性藥物的拆分時(shí)容易受到一些條件的影響，如色譜條件選擇、樣品衍生方法差異、手性固定相差異等。

2.4 超臨界流體色譜

超臨界流體色譜技術(shù)發(fā)源于上世紀(jì)八十年代，屬于比較前沿的對(duì)映體拆分技術(shù)，它的流動(dòng)相是臨近或超過臨界壓力、溫度的高壓流體。超臨界流體色譜技術(shù)在手性藥物的拆分上具有許多不可比擬的優(yōu)勢(shì)，它可以達(dá)到與梯度淋洗相似的效果，它的流動(dòng)相是超臨界流體，在粘度上與氣體較為接近，因此在分離阻力上相對(duì)較小，同時(shí)還能夠以細(xì)長(zhǎng)色譜柱來提高柱效，另外，超臨界流體密度同液體無較大差別，溶解能力表現(xiàn)十分良好，因此對(duì)于熱穩(wěn)定性差以及難揮發(fā)的手性物質(zhì)也能夠起到較好的分離效果。除此以外，超臨界流體色譜在手性藥物拆分上還擁有高效、便捷、操作條件要求簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)，能夠很好的完成多種手性藥物的拆分工作。超臨界流體色譜技術(shù)依照手性選擇劑的種類差異可以分為多種分離形式，分別是多糖型手性固定相、環(huán)糊精型鍵合固定相、氨基酸和酰胺類手性固定相等，這些不同類型的分離技術(shù)可以滿足不同手性藥物的分離要求。超臨界流體色譜技術(shù)在現(xiàn)階段正處于摸索發(fā)展階段，關(guān)于流動(dòng)相構(gòu)成、流動(dòng)相密度、壓力、溫度等參數(shù)對(duì)分離結(jié)果的影響仍需要深入研究，不過人們可以將過往的波層色譜、高效液相色譜等技術(shù)作為參照，研制出不同類型的流動(dòng)相，以豐富和發(fā)展超臨界流體色譜技術(shù)，為不同手性藥物的拆分提供恰當(dāng)?shù)募夹g(shù)支持。

3 結(jié)束語(yǔ)

隨著近些年來人們生活水平的提高，人們對(duì)于藥物質(zhì)量和藥物安全性的要求也越來越高，其中手性藥物作為與人們關(guān)系比較密切的一類藥物，逐漸成為人們關(guān)心的重點(diǎn)。手性藥物的研發(fā)與藥物分析都離不開拆分技術(shù)的發(fā)展，色譜拆分作為主流拆分選擇，一直都是研發(fā)機(jī)構(gòu)的關(guān)注重點(diǎn)，通過對(duì)幾項(xiàng)色譜拆分技術(shù)進(jìn)行羅列可以知道，各個(gè)色譜拆分技術(shù)都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，需正確認(rèn)識(shí)每一項(xiàng)技術(shù)的

適用范圍，合理科學(xué)的應(yīng)用，以確保手性藥物拆分效果。

參考文獻(xiàn)

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