賈英杰

上海冠生園蜂制品有限公司（上海 201419）

近年來，中國蜂蜜年產量呈現(xiàn)穩(wěn)步上升趨勢，年消費量不斷提升，行業(yè)規(guī)模不斷擴大。國家統(tǒng)計局數(shù)據(jù)顯示，2008年全國蜂蜜產量38.47萬 t，2013年為43.66萬 t，2017年為54.25萬 t，其中2017年天然蜂蜜出口數(shù)量12.93萬 t，蜂蜜產量不斷攀升，反映消費端旺盛的蜂蜜需求，隨著消費量不斷增加，蜂蜜作為天然的健康產品，影響日趨擴大，引起監(jiān)管部門和消費者對蜂產品行業(yè)的廣泛關注。

從全球來看，中國是養(yǎng)蜂大國，聯(lián)合國糧食與農業(yè)組織統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示，2017年中國養(yǎng)蜂規(guī)模達915.6萬群，僅次于印度的1 276.4萬群，占全球蜂群數(shù)量的10%；從蜂蜜產量來看，2017年全球蜂蜜產量186.9萬 t，其中中國蜂蜜產量占全球的比重近30%，蜂群單產蜂蜜量處于世界前列，反映中國整體的蜜蜂飼養(yǎng)技術處于較高水平。從養(yǎng)蜂產業(yè)模式來看，歐美發(fā)達國家通過養(yǎng)蜂授粉實現(xiàn)增產的現(xiàn)象較為普遍，中國養(yǎng)蜂多以生產蜂蜜等蜂產品為主。從全球情況來看，中國養(yǎng)蜂技術水平較高，這與養(yǎng)蜂過程中的精細化管理分不開，這種情形帶來單產較高的同時，也會帶來一些負面效應，如養(yǎng)蜂過程中獸藥使用問題，加之養(yǎng)蜂環(huán)節(jié)較為分散，養(yǎng)蜂過程中獸藥的不合理使用對行業(yè)下游環(huán)節(jié)形成為挑戰(zhàn)。

目前國內外在檢測蜂蜜中獸藥殘留常見的方法主要有高效液相色譜-串聯(lián)質譜法[4]、液相色譜法[5]、常規(guī)理化檢測法[6]、酶聯(lián)免疫法[7-8]、毛細管電泳法等[9]。

液相色譜串聯(lián)質譜技術是國內外在動物源性食品中獸藥殘留檢測技術使用最常見的技術方法之一[10]。該項技術能同時獲得定性、定量的指標，而且在實現(xiàn)獸藥殘留色譜峰分離的情況下，利用各檢測獸藥化合物物質之間質荷比的差別進行高靈敏度的檢測。中國在蜂蜜及蜂產品中獸藥殘留的檢測標準中也采用相關技術方法。采用液相色譜串聯(lián)質譜能應用于同一類獸藥殘留的檢測，并能對不同種類獸藥實現(xiàn)同時檢測[11]。

1 蜂蜜中主要存在的獸藥殘留

蜂蜜中獸藥殘留問題主要是因為蜜蜂在生長過程中會出現(xiàn)不同的疾病，蜂農在養(yǎng)殖過程中使用或濫用一些獸藥[1]，獸藥殘留的問題嚴重阻礙中國蜂產業(yè)發(fā)展，也是國際貿易中經常面臨的困境之一。

中國蜂農在預防蜜蜂疾病的常用獸藥主要有硝基咪唑類藥物、氯霉素抗生素、四環(huán)素類抗生素、大環(huán)內酯類、喹諾酮類藥物、磺胺類、頭孢類、硝基呋喃及其代謝物[2]。這些獸藥因在人體中具有潛在的安全隱患，而且國內外對獸藥殘留都有制定殘留限度[3]。因此對蜂蜜中獸藥殘留的檢測技術尤為重要。

2 液相色譜-串聯(lián)質譜在蜂蜜中獸藥殘留的應用

2.1 液相色譜-串聯(lián)質譜在蜂蜜中硝基呋喃類藥物殘留檢測中的應用

因為硝基呋喃類藥物能夠對人體造成不同程度的損害，2002年中國對硝基呋喃類藥物實行禁令。因此蜂蜜產品中硝基呋喃類藥物的檢測是行業(yè)面臨的問題之一。張平安等[12]利用液質聯(lián)用技術在多反應模式下對蜂蜜中呋喃唑酮進行測定，發(fā)現(xiàn)使用乙酸乙酯在液-液萃取條件下，可達0.5 μg/kg；余建新等[13]通過微量化樣品前處理，對蜂蜜及水產品中的硝基呋喃類藥物進行測定，發(fā)現(xiàn)蜂蜜樣品中呋喃唑酮代謝物和呋喃西林代謝物存在污染的可能性。蔣原等[14]通過液相色譜-電噴霧質譜技術對蜂蜜中硝基呋喃類藥物進行測定，發(fā)現(xiàn)Agilent Extend C18色譜柱有較好的分離效果，同時甲醇流動相具有較高的分離度和分辨率。祝偉霞等[15]通過固相支撐萃取-平行前處理方法，同位素內標法定量，對蜂種4種硝基呋喃類藥物進行測定，發(fā)現(xiàn)通過使用硅藻土作為固相支撐物能夠對蜂蜜中的硝基呋喃類藥物進行凈化和富集，同時利用高效液相色譜-串聯(lián)質譜技術能夠快速對食品中的殘留藥物進行檢測。

2.2 液相色譜-串聯(lián)質譜在蜂蜜中硝基咪唑類藥物殘留檢測中的應用

張璐等[16]通過使用在線凈化裝置，利用超高效液質聯(lián)用儀器對蜂蜜中硝基咪唑類藥物進行測定，其建立以Cyclone-P為凈化柱、Hypersil GOLD aQ為色譜分析柱的分析方法，能夠快速有效檢測出蜂蜜中殘留的硝基咪唑類藥物。劉永明等[17]通過液相色譜-串聯(lián)質譜法對蜂蜜中3種硝基咪唑類藥物進行測定，發(fā)現(xiàn)使用HLB固相萃取柱能夠富集3種硝基咪唑類藥物，進行LC-MS測定可以達到國外硝基咪唑類藥物的檢測要求。殷局易等[18]對蜂產品中9種硝基咪唑類藥物進行測定，發(fā)現(xiàn)乙腈提取后使用MCX固相萃取柱凈化，在蜂蜜和蜂王漿樣品中使用高效液相串聯(lián)質譜法測定其定量限可達0.5 μg/kg，凍干粉樣品中其定量限可達1.0 μg/kg。郭少飛等[19]使用乙腈-氯仿-異丙醇體系對蜂蜜中的硝基咪唑類藥物進行提取，使用高效液相-串聯(lián)質譜法測定，發(fā)現(xiàn)經此方法前處理能夠快速有效地測定出蜂蜜中3種硝基咪唑類藥物殘留。

2.3 液相色譜-串聯(lián)質譜在蜂蜜中喹諾酮類藥物殘留檢測中的應用

丁濤等[20]利用高效液相串聯(lián)質譜方法對蜂蜜中19種喹諾酮類藥物殘留進行測定，同時比較3種不同固相萃取柱的提取凈化方法，發(fā)現(xiàn)強陰離子固相萃取柱能較好地富集凈化蜂蜜中的藥物殘留，同時發(fā)現(xiàn)該方法的定量限達1.0 μg/kg。曹彥忠等[21]通過使用磷酸鹽緩沖液提取喹諾酮藥物，使用HLB固相萃取柱凈化，建立蜂蜜中14種喹諾酮藥物的檢測方法，其檢測限達1.0 μg/kg。陳曉紅等[22]對蜂蜜中4種喹諾酮藥物進行質譜測定，發(fā)現(xiàn)使用磷酸鹽緩沖液溶解提取喹諾酮藥物，使用MAX固相萃取柱凈化，建立質譜方法其檢出限達到0.5 μg/kg。何強等[23]使用超高效液相-串聯(lián)質譜法對蜂蜜中15種喹諾酮藥物殘留進行測定，其使用C18色譜柱進行分離，其建立方法檢出限1.0 μg/kg。

2.4 液相色譜-串聯(lián)質譜在蜂蜜中磺胺類獸藥殘留檢測中的應用

徐慧等[24]通過使用CAPCELL PAK C18色譜柱，利用液相色譜-串聯(lián)質譜儀建立檢出限0.1 μg/kg的17種磺胺類藥物測定方法。盛雪飛等[25]通過使用超快速液相色譜-串聯(lián)質譜對蜂蜜中磺胺類藥物殘留進行方法建立，可在短時間內同時測定20種磺胺類藥物殘留。李小運等[26]使用乙腈快速提取蜂蜜中磺胺類藥物殘留，使用液相色譜-串聯(lián)質譜法建立11種磺胺類藥物殘留快速檢測技術，方法定量限2.0 μg/kg。容裕棠等[27]通過鹽析、胺丙基鍵合硅膠萃取凈化蜂蜜，利用QuEChERS技術，使用超高效液相色譜-串聯(lián)質譜法對蜂蜜中21種磺胺類藥物殘留進行快速測定，方法檢出限為0.12～2.46 μg/kg，達到快速檢測要求。

2.5 液相色譜-串聯(lián)質譜在蜂蜜中多類別獸藥殘留檢測中的應用

王偉等[28]通過使用QuEChERS方法對蜂蜜中60種獸藥殘留進行質譜測定，發(fā)現(xiàn)使用此前處理方法并用乙腈提取能夠得到較好的回收率。何強等[29]通過使用HLB和PSA固相萃取柱對蜂蜜中硝基咪唑類、喹諾酮類、磺胺類藥物進行凈化富集，建立超高效液相-串聯(lián)質譜方法，其檢測限達0.4～4.0 μg/kg。圖雅等[30]使用同位素內標法，對蜂蜜中氯霉素和甲硝唑藥物殘留進行質譜測定，通過MCS固相萃取柱凈化，其方法檢出限達0.05 μg/kg。王建妹等[31]使用HLB固相萃取柱凈化，超高效液相色譜-串聯(lián)質譜分析蜂蜜中39種抗生素和25種農藥，其建立方法檢出限為0.2～3.8μg/kg。徐瀟穎等[32]利用磁性多壁碳納米管作為固相萃取，使用高效液相色譜-串聯(lián)質譜對蜂蜜中44種獸藥殘留進行測定，其建立的方法檢出限為0.2～2.0 μg/kg。

3 展望

國內越來越多標準和法規(guī)開始使用質譜檢測技術作為內在方法之一，同時國際上越來越多國家建立以高效液相色譜-串聯(lián)質譜技術為基礎的標準，實現(xiàn)蜂蜜中獸藥殘留能夠更快、更精確檢測，同時由于質譜檢測技術的發(fā)展，該技術可更高效檢測多種獸藥種類，高效液相色譜-串聯(lián)質譜技術在蜂蜜檢測領域中的作用更加凸顯。隨著社會各方對食品安全方面投入的不斷加大，高效液相色譜-串聯(lián)質譜技術在蜂產品企業(yè)和地方性檢測機構中將得到越來越多的應用。

解決蜂蜜中獸藥抗生素殘留問題，除了監(jiān)管部門的大力監(jiān)管外，還需企業(yè)通過快速有效的檢測技術手段做好蜂原料的篩選工作，并通過檢測信息不斷向蜂產品行業(yè)上游進行壓力傳導，輔助市場化的原料采收機制，督促養(yǎng)蜂科學用藥，通過各方努力與實踐，取得較好效果。