葉麗珍

（廣東省廣州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科 510260）

研究目的：本研究通過檢測子宮內(nèi)異癥的異位內(nèi)膜及對照組在位內(nèi)膜組織的E-cad啟動子區(qū)甲基化狀況與其蛋白表達關(guān)系，探索內(nèi)異癥可能的發(fā)病機制，以及在發(fā)生、發(fā)展中的作用，為子宮內(nèi)膜異位癥的治療找到新的突破點，并為進一步可能的臨床治療建立理論基礎(chǔ)。

研究方法：

1.樣本資料：采用隨機對照法，收集廣州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院婦科2013年1月至2015年1月手術(shù)治療的并經(jīng)病理證實的標本共65例，其中異位內(nèi)膜組織（巧克力囊腫囊腫）45例為研究組，對照組為20例同期因診刮、子宮切除而取到的正常子宮內(nèi)膜組織。

2.方法：通過免疫組化、Western Blotting檢測E-cad異位與在位內(nèi)膜表達情況；并采用甲基化特異性PCR檢測異位與在位內(nèi)膜E-cad啟動子甲基化狀況。

3.統(tǒng)計學分析：采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析。用X2和Spearman's等級相關(guān)性分析比較異位內(nèi)膜與正常子宮內(nèi)膜E-cad蛋白表達及甲基化情況。P＜0.05有統(tǒng)計學意義。

對比結(jié)果：

1.內(nèi)異癥組E-cad蛋白陽性率為40%，對照組中E-cad蛋白陽性率為 100%。Χ2=20.526，P=0.000，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。

2.內(nèi)異癥組13例I-II期樣本中，E-cad蛋白陽性率為61%，17例III期樣本中，E-cad蛋白陽性率為41%，15例IV期樣本中，E-cad陽性表達率降低為2%，內(nèi)異癥組E-cad蛋白陽性率在不同的臨床分期呈直線相關(guān)，Χ2=5.023,P=0.081，P>0.05，無統(tǒng)計學意義。

3.45 例內(nèi)異癥組中甲基化例數(shù)為26例，甲基化率為58%；20例對照組中甲基化例數(shù)為0，甲基化率為0%。X2=19.259,P=0.000，P＜0.05。有統(tǒng)計學意義。

4.內(nèi)異癥組I-II期E-cad啟動子甲基化率為23%，III期甲基化率為 59%，IV 期甲基化率為 86%。Χ2=9.702，P=0.008，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。

5.Spearman's等級相關(guān)分析顯示在內(nèi)異癥不同臨床分期中E-cad啟動子甲基化與蛋白表達之間相關(guān)系數(shù)，分別是I-II期r=-0.850，III期 r=-0.842，IV 期 r=-0.961，P=0.000，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。

（一）內(nèi)異癥組異位內(nèi)膜和對照組在位內(nèi)膜組織中E-cad蛋白表達情況分析

把收取的45例內(nèi)異癥異位內(nèi)膜和20例對照組正常子宮內(nèi)膜樣本為對照分別石蠟包埋切片，以E-cad為一抗，進行免疫組化試驗，得到每個樣本的免疫組化的組織切片，按照上面試驗方法介紹的E-cad蛋白表達陽性與陰性判定方法，判定E-cad蛋白是否表達。按照要求讀片，根據(jù)文獻報道正常的子宮內(nèi)膜腺上皮有E-cad表達，而內(nèi)異癥中E-cad蛋白有低表達或者不表達。實驗結(jié)果見表1內(nèi)異癥組、對照組E-cad蛋白陽性率表達比較。（n,%）

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E-cadheri n基因啟動子CpG島的異常甲基化可能是導致蛋白表達下調(diào)的原因之一。諸多惡性腫瘤中，E-cad基因啟動子區(qū)域呈現(xiàn)高度甲基化引致的E-cad表達喪失是腫瘤侵襲性的可能機制，那么，在具有與惡性腫瘤相似遠處種植行為的內(nèi)異癥發(fā)病中，E-cad啟動子甲基化也可能是引起該基因表達下降或喪失的關(guān)鍵原因。

結(jié)論

E-cad在子宮內(nèi)膜異位癥中呈低表達，E—Cad啟動子5端CpG島甲基化可能是內(nèi)異癥中該基因失活的機制之一。E-cad啟動子區(qū)域5’CpG島在內(nèi)異癥中呈高甲基化狀態(tài)，而在正常內(nèi)膜組織則為非甲基化狀態(tài)，E-cad基因啟動子異常甲基化可能與為內(nèi)異癥有密切相關(guān)性，可能參與內(nèi)異癥的發(fā)生、發(fā)展。E-cad基因啟動子區(qū)域5’CpG島在III、IV期內(nèi)異癥者中的甲基化率顯著高于I、II期，而E-cad蛋白表達率則相反。E-cad啟動子甲基化程度越高，其蛋白表達越低，內(nèi)異癥臨床分期越晚。