劉麗霞 劉丹
(1 昆明市食品藥品檢驗研究所 云南 昆明 650034)
(2 云南省第二人民醫(yī)院藥劑科 云南 昆明 650051)
小果蕁麻(Urtica atrichocaulis(Hand.-Mazz.)C.J.Chen)為蕁麻科蕁麻屬、多年生野生草本植物,有木質化的根狀莖,分布于貴州西南部、四川和云南海拔300-2600米山腳路旁、山谷或溝邊[1]。蕁麻全草富含多種維生素、鞣質。莖皮主要含蟻酸、丁酸及有刺激作用的酸性物質[2]。莖皮纖維可供紡織用;全草可入藥,具有祛風除濕、解痙、活血和止咳之功效,主要用于小兒高熱驚風,痙攣抽搐,角弓反張,跌打損傷,扭傷,閃挫傷,金傷,風熱濕痹,關節(jié)疼痛,四肢拘攣,腰膝疼,手足麻木,骨痛;外用疹出不暢,痘疹不透[3]。不同的提取溶媒得到的提取液有效成分存在差異,抑菌作用也隨之改變。目前國內外主要針對同屬的異株蕁麻、麻葉蕁麻等的研究,尚無關于小果蕁麻的研究,對其抑菌特性也未見報道。
供試菌種為表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)、淺黃假單胞菌(Pseudomonas luteola)、腸膜明串珠菌乳脂亞種(Leuconostoc mesenteroides ssPcremoris)、緩慢芽孢桿菌(Bacillus lentus)、中間葡萄球菌(Staphylococcus intermedius)、無乳鏈球菌(Streptococcus agalactiae)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、福氏志賀氏菌(Shigella fushigella)、大腸埃希氏菌(Escherichia coli)、乙型副傷寒沙門氏菌(Salmonella Paratyphi B)、銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、奇異變形桿菌(Proteus mirabilis)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、藤黃微球菌 (Micrococcus luteus)、溶血性葡萄球菌(Staphylococcus haemolyticus)、小牛葡萄球菌(Staphylococcusvitulinus),菌株均來自中國醫(yī)學菌種保藏中心或實驗室環(huán)境中分離后經鑒定的菌株。
小果蕁麻[Urtica atrichocaulis(Hand.-Mazz.)C.J.Chen]于9月在盤龍區(qū)阿子營山坡旁采收地上部分,經過鑒定。
乙酸乙酯、無水乙醇,均為分析純。
游標卡尺、MLS-3781L-PC壓力蒸汽滅菌器、PYXDHS·500-BS-Ⅱ隔水式恒溫培養(yǎng)箱、生物安全柜、電子天平。
胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)
稱取3份干燥小果蕁麻全草,每份10g,分別置于圓底燒瓶中,分別加入10倍量的純化水、70%乙醇、乙酸乙酯,浸泡2h,加熱回流提取30min,趁熱過濾,濾液濃縮至10ml,作為供試品溶液;同法制備空白溶液。
取實驗菌株接種至營養(yǎng)瓊脂斜面上,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,取斜面上菌落至無菌生理鹽水中,制成0.5麥氏單位的菌懸液,備用。
取適量菌懸液,用無菌棉簽均勻涂布于無菌TSA平板上,取6mm直徑的無菌濾紙于帶菌平板上,每個平板放5張,4張加入15μl的供試液,1張加入空白對照溶液,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,測量并記錄抑菌圈直徑,計算平均值。
空白對照均無抑菌作用,不同溶媒提取的小果蕁麻提取液的抑菌作用及抑菌圈均有所差異,結果見表1、表2。
表1 小果蕁麻提取物的抑菌作用
表2 不同小果蕁麻提取液抑菌圈直徑
從表1可以看出小果蕁麻的醇提取液及水提取液對大多數(shù)革蘭氏陽性、陰性菌均有抑制作用,與醇提取液相比,水提取液對金黃色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、大腸埃希氏菌、乙型副傷寒沙門菌無抑菌作用;乙酸乙酯提取液對革蘭氏陽性、陰性菌均無抑制。從表2可知,小果蕁麻醇提取液比水提取液抑菌效力強。本次實驗證明小果蕁麻有明顯的抑菌作用,為臨床應用提供了科學依據(jù),但小果蕁麻提取液抑菌作用機制有待進一步研究。