宋岱松 陳煥昌 劉媛媛 李月田 張 強(qiáng) 金梅林*
1.環(huán)山集團(tuán)養(yǎng)豬事業(yè)部健康管理部,山東青島 266706;2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,武漢 430070
沙門(mén)氏菌是一種重要的人畜共患病原菌,可導(dǎo)致多種動(dòng)物發(fā)病,也可通過(guò)污染的食物感染人類(lèi),對(duì)人類(lèi)的健康造成極大威脅。沙門(mén)氏菌血清型眾多,導(dǎo)致豬發(fā)病的沙門(mén)氏菌主要為豬霍亂沙門(mén)氏菌和鼠傷寒沙門(mén)氏菌,前者的主要臨床表現(xiàn)為敗血癥,后者主要表現(xiàn)為壞死性腸炎[1]。
2018年2月5日,山東煙臺(tái)某育肥豬場(chǎng)(存欄1 063頭,92日齡)農(nóng)場(chǎng)主反饋豬突然發(fā)生腹瀉,筆者于2月7日對(duì)該農(nóng)場(chǎng)進(jìn)行了調(diào)查。臨床癥狀:腹瀉傳播迅速,腹瀉比例已經(jīng)達(dá)到70%;采食量下降60%左右;豬只扎堆,被毛臟亂,體溫39.5℃以上的豬只約占40%(圖1);糞便呈水樣,顏色較復(fù)雜,為灰黑色、黃色、綠色等,個(gè)別豬只糞便中帶有紅色血液及腸道脫落物(圖2)。瀕臨死亡的豬只體溫較低,為36.0~37.5℃;2月6日死亡2頭,2月7日死亡8頭。
圖1 被毛粗亂、扎堆
圖2 糞便黃色或帶有血液
脾臟略微腫大(圖3);肺水腫(圖4);全身淋巴結(jié)腫大、出血(圖5);小腸各部可見(jiàn)明顯充血、腸壁增厚(圖6);結(jié)腸內(nèi)容物呈水樣,有纖維素性滲出物(圖6),部分豬只結(jié)腸內(nèi)容物呈現(xiàn)血色(圖7),盲腸、結(jié)腸有偽膜覆蓋(圖8)。
圖3 脾臟略微腫大
圖5 淋巴結(jié)腫大、出血
圖7 腸道內(nèi)血色內(nèi)容物
2月5日至2月20日,筆者共計(jì)剖檢34頭豬,其中急性死亡豬21頭,慢性病例13頭(自然死亡與安樂(lè)死),隨后對(duì)剖檢病變進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)與分析(表1)。
疾病發(fā)生初期,送檢肛拭子進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè),結(jié)果顯示:豬流行性腹瀉病毒(PEDV)和豬傳染性胃腸炎病毒(TGE)均為陰性。
圖4 肺水腫
圖6 腸壁增厚、結(jié)腸內(nèi)水樣內(nèi)容物
圖8 結(jié)腸內(nèi)偽膜覆蓋
表1 剖檢病變統(tǒng)計(jì)
2月7日,采集新鮮的結(jié)腸內(nèi)容物及腹瀉豬只肛拭子送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定,2月9日出具的結(jié)果顯示:SS瓊脂培養(yǎng)基可見(jiàn)黑色菌落,符合沙門(mén)氏菌生長(zhǎng)特性(圖9)。隨后,選取2個(gè)菌株進(jìn)行藥敏試驗(yàn),結(jié)果顯示:該菌株對(duì)恩諾沙星最為敏感(表2、圖10)。
表2 菌株藥敏試驗(yàn)結(jié)果
圖9 細(xì)菌鑒定培養(yǎng)
圖10 藥敏試驗(yàn)
以P1:GTGAAATTATGGCCACGTTCGGGCAA、P2:TCATCGCACCGTCAAAGGAACC為引物,以細(xì)菌培養(yǎng)液為模板,進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳,約在284 bp有一可見(jiàn)條帶,可確定該菌株為沙門(mén)氏菌(圖11)。
圖11 PCR產(chǎn)物瓊脂糖電泳圖
經(jīng)農(nóng)場(chǎng)主反饋,2月2日起,豬群中零星出現(xiàn)腹瀉豬只,2~3 d內(nèi)腹瀉比例已經(jīng)達(dá)到了40%以上,采食量降低50%。2月5日,筆者通過(guò)農(nóng)場(chǎng)主的信息反饋,將其診斷為某種病毒感染導(dǎo)致的腹瀉,同時(shí)要求農(nóng)場(chǎng)主采集腹瀉豬只肛拭子,送相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)PEDV和TGEV。
2月7日,筆者對(duì)該農(nóng)場(chǎng)進(jìn)行了調(diào)查。極為重要的信息是:2月6日夜間至2月7日凌晨,有8頭豬只因腹瀉死亡。筆者立即否定了之前的診斷,排除了病毒感染的可能性。與此同時(shí),實(shí)驗(yàn)室反饋,PEDV和TGEV陰性,診斷方向指向了細(xì)菌感染。通過(guò)臨床癥狀和剖檢診斷的信息匯總,筆者判定該案例為疑似沙門(mén)氏菌感染導(dǎo)致的出血性腹瀉,但胞內(nèi)勞森氏菌和豬痢疾密螺旋體感染的可能性沒(méi)有排除。對(duì)死亡豬只結(jié)腸內(nèi)容物進(jìn)行細(xì)菌分離鑒定,2月9日實(shí)驗(yàn)室出具的結(jié)果顯示沙門(mén)氏菌陽(yáng)性;同時(shí)藥敏試驗(yàn)表明,該菌株對(duì)恩諾沙星最為敏感。
1)藥物干預(yù)。2月7日起,10%硫酸粘桿菌素500 g/t,飲水給藥,連續(xù)使用 5 d;80%泰妙菌素120 g/t,飲水給藥,連續(xù)使用7 d。2月9日,10%恩諾沙星注射液 0.025 mL/kg(約 1.0~1.5 mL/頭),全群注射1次。2月12日起,給予體況較差的豬只飲用電解多維、補(bǔ)液鹽等。
2)飼養(yǎng)管理。要求農(nóng)場(chǎng)主及時(shí)清理豬舍內(nèi)的排泄物,保證豬舍內(nèi)環(huán)境干燥;略微提高豬舍內(nèi)溫度,并保證溫度盡可能恒定。
3)2月11日起,豬群急性死亡數(shù)量明顯降低,采食量明顯升高(圖12),之后死亡的豬只多數(shù)為慢性病例(圖13)。
圖12 豬群日采食量變化曲線(xiàn)
圖13 豬群日死亡數(shù)量曲線(xiàn)
沙門(mén)氏菌感染在豬群中相當(dāng)普遍,但未必造成嚴(yán)重的臨床癥狀,毒力較強(qiáng)的菌株大劑量感染是導(dǎo)致急性沙門(mén)氏菌腸炎的主要原因。豬群飼養(yǎng)密度過(guò)大、豬舍衛(wèi)生差、豬舍內(nèi)濕度過(guò)大均可導(dǎo)致環(huán)境中沙門(mén)氏菌載量增加,日糧更換、豬只混群會(huì)導(dǎo)致豬群抵抗力下降,增加發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)。此案例中,豬舍漏糞地板面積較小,大部分為水泥地面,豬只排泄物清理不及時(shí),這2個(gè)方面的因素是導(dǎo)致發(fā)病的最主要原因。干燥的環(huán)境、良好的衛(wèi)生條件是預(yù)防該病的有效手段。
本案例診斷初期,鑒于腹瀉癥狀發(fā)展十分迅速,筆者將該案例判定為病毒感染導(dǎo)致。隨后2~3 d豬群出現(xiàn)大量急性死亡豬只,這與病毒性腹瀉的臨床表現(xiàn)相悖,與此同時(shí),病原學(xué)診斷顯示,PEDV和TGEV都為陰性,因此,診斷指向細(xì)菌性腹瀉。本案例診斷后期,發(fā)現(xiàn)血性下痢、結(jié)腸壞死灶等癥狀,同時(shí)細(xì)菌分離鑒定顯示沙門(mén)氏菌呈陽(yáng)性,給予了確診。以往經(jīng)驗(yàn),豬流行性腹瀉(PED)和豬傳染性胃腸炎(TGE)在抗體陰性的豬群中發(fā)病極為迅速,發(fā)病率可高達(dá)80%以上,而細(xì)菌性腹瀉往往起病略緩,發(fā)病率略低。本案例的發(fā)生啟示,某些情況下,沙門(mén)氏菌導(dǎo)致的腹瀉發(fā)病速度亦較快,發(fā)病率與病毒性腹瀉相差不大。PED和TGE僅可以造成哺乳仔豬的大量死亡,保育豬群發(fā)生時(shí)死亡率極低,在育肥豬群中,死亡率幾乎為零[2]。本案例診斷后期通過(guò)死亡率的分析和病原學(xué)診斷,否定了病毒性腹瀉的診斷。
本案例的后期診斷依然存在疑點(diǎn),通常情況下育肥豬出血性下痢由沙門(mén)氏菌、胞內(nèi)勞森氏菌、豬痢疾密螺旋體感染導(dǎo)致。本案例中通過(guò)臨床癥狀、剖檢診斷以及細(xì)菌分離鑒定,綜合診斷為沙門(mén)氏菌感染。由于實(shí)驗(yàn)室條件的限制,并沒(méi)有從病原學(xué)層面排除胞內(nèi)勞森氏菌和豬痢疾密螺旋體感染的可能性。胞內(nèi)勞森氏菌感染可引起豬的急性回腸炎,導(dǎo)致豬小腸急性出血(偶見(jiàn)結(jié)腸出血),糞便呈亮黑色,最急性案例可呈現(xiàn)鮮血便;剖檢可見(jiàn)小腸充滿(mǎn)出血,結(jié)腸內(nèi)容物呈亮黑色,最急性案例可見(jiàn)小腸內(nèi)充滿(mǎn)大量血液,結(jié)腸內(nèi)容物正常[3];豬痢疾密螺旋體感染可導(dǎo)致結(jié)腸出血,糞便往往呈鮮紅色,剖檢可見(jiàn)盲腸、結(jié)腸內(nèi)大量充滿(mǎn)血液,回腸以上部位正常[4]。
本案例中,可見(jiàn)的剖檢病變包括:脾臟腫大、淋巴結(jié)腫大、腸道充血、腸壁增厚、腸道出血與潰瘍。脾臟腫大在急性病例和慢性病例中都較為常見(jiàn),淋巴結(jié)腫大、出血也較為常見(jiàn),但主要表現(xiàn)在腸系膜淋巴結(jié);腸道充血、腸壁增厚在急性病例中較為常見(jiàn);回腸、盲腸、結(jié)腸出血在急性病例中零星可見(jiàn),在慢性病例中罕見(jiàn);盲腸、結(jié)腸潰瘍?cè)诩毙圆±邪l(fā)生機(jī)率很小,但是慢性病例中極為常見(jiàn),且病變非常典型。
在本案例中,發(fā)病十分迅速,快速干預(yù)十分重要。以往經(jīng)驗(yàn),粘桿菌素、恩諾沙星、氟苯尼考、新霉素、頭孢噻呋、鏈霉素等對(duì)沙門(mén)氏菌均有效,快速篩選最為敏感藥物相當(dāng)重要。注射給藥相對(duì)于口服給藥,藥效迅速,急性案例可保證快速干預(yù)。因此,在急性沙門(mén)氏菌案例中,需要格外注意干預(yù)速度、藥物選擇、給藥方式。
本案例共計(jì)有54頭育肥豬死亡(35~45 kg),直接經(jīng)濟(jì)損失為4.0~4.5萬(wàn)元;由于疫病的發(fā)生,該育肥豬群上市時(shí)間至少延遲10 d,多余的飼料成本為6.5~7.0萬(wàn)元。因此,此次疫情損失約為11萬(wàn)元。
該案例中,農(nóng)場(chǎng)主與獸醫(yī)的溝通方面尚存在可提高改善的空間,農(nóng)場(chǎng)主對(duì)信息反饋的準(zhǔn)確性有待提高,獸醫(yī)對(duì)于疫病診斷的及時(shí)性還有提升的空間,這可為疾病的控制爭(zhēng)取時(shí)間。因此,良好的疫情預(yù)警、匯報(bào)、診療機(jī)制是豬場(chǎng)降低疾病損失的重要措施。