術(shù)瑞吉對(duì)預(yù)防術(shù)后腹腔粘連的效果觀察

王久成,于世明,喬茂強(qiáng),范宏剛

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150030)

隨著人們生活需求的改變,越來越多的伴侶動(dòng)物走進(jìn)了人們的生活,伴侶動(dòng)物的診療行業(yè)也得到了快速的發(fā)展,但是在伴侶動(dòng)物手術(shù)過程中快速有效止血和防止術(shù)后粘連一直都是急需解決的問題,特別是沒有明顯出血點(diǎn)的大面積組織廣泛的滲血和腹腔術(shù)后導(dǎo)致的腹腔粘連。市面上常見的止血材料和防粘連材料包括沸石、殼聚糖、膠原蛋白和纖維素基等,都是應(yīng)用于人。大多數(shù)只有單一的止血功能或者防粘連功能,而且價(jià)格昂貴,有些材料在止血的同時(shí)還導(dǎo)致粘連的發(fā)生。到目前為止,應(yīng)用于伴侶動(dòng)物的止血材料的相關(guān)報(bào)道少之又少,此方面仍處于空白階段。術(shù)瑞吉生物流體膜是由羧甲基纖維素鈉和海藻酸鈉組成的天然復(fù)合材料,解決了使用單一材料時(shí)的不足。適用于組織的廣泛滲血,同時(shí)起到預(yù)防粘連的作用。本研究建立腸粘連模型[1]。將術(shù)瑞吉生物流體膜應(yīng)用于該模型,并與其他材料作對(duì)比,驗(yàn)證其止血、預(yù)防粘連的效果。為其在伴侶動(dòng)物的臨床應(yīng)用中提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康實(shí)驗(yàn)犬30只,雌雄各半,年齡12～14月齡,體重5.5±0.5 kg,由哈爾濱市青喜養(yǎng)殖場(chǎng)提供,檢疫合格符合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物要求,均無凝血異常,在相同環(huán)境下飼養(yǎng)2周無異常情況進(jìn)行試驗(yàn)。

1.2 設(shè)備、藥品和試劑 Datex呼吸監(jiān)護(hù)儀S/5、TGL-16B普通離心機(jī)、DK-S22恒溫水浴鍋、Matrx小動(dòng)物專用吸入麻醉機(jī)等。

異氟烷(深圳市瑞沃德生命科技有限公司,批號(hào)20170201)；丙泊酚注射液(四川國瑞藥業(yè)有限責(zé)任公司,批號(hào)20170524)；術(shù)瑞吉生物流體膜(哈爾濱礎(chǔ)潤醫(yī)療器械有限責(zé)任公司)；Seprafilm(美國強(qiáng)生(Johnson&Johnson)公司,批號(hào)20170415)；強(qiáng)脯氨酸試劑盒(南京建成生物工程研究所；批號(hào)20171008)等。

1.3 方法

1.3.1 術(shù)瑞吉預(yù)防犬腹腔粘連試驗(yàn) 將12只實(shí)驗(yàn)犬隨機(jī)分成3組,每組4只。A組為空白組,B組為Seprafilm組,C組為術(shù)瑞吉組。

參照Ellis法制備腸粘連模型[2],于犬腹中線臍部開始做一3 cm切口打開腹腔,創(chuàng)口周圍干紗布隔離,牽拉出盲腸置于紗布上5 min,使盲腸漿膜干燥,用干紗布摩擦盲腸漿膜層,使?jié){膜層破損,形成點(diǎn)狀出血面,創(chuàng)面約1 cm寬、2 cm長。A組紗布按壓,直至沒有滲血為止。B組將Seprafilm放置于盲腸創(chuàng)面。C組涂抹術(shù)瑞吉生物流體膜,直至沒有滲血為止。術(shù)后關(guān)閉腹腔。

1.3.2 粘連程度評(píng)定分級(jí) 于術(shù)后7 d,將各組犬麻醉后進(jìn)行剖腹探查,記錄腹腔粘連情況,參照胡建敏分級(jí)方法,進(jìn)行粘連評(píng)分[3],如表1。并取粘連部位組織,用于病理組織學(xué)檢測(cè)和羥脯氨酸測(cè)定。

表1 腹腔粘連分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

1.3.3 組織病理學(xué)觀察 取腸管創(chuàng)面組織,進(jìn)行病理切片制作和觀察。

1.3.4 組織羥脯氨酸測(cè)定 取腸管創(chuàng)面組織,進(jìn)行羥脯氨酸測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(ˉx±SD)表示,采用單因素方差分析以及 Post Hoc Tests多重比較檢驗(yàn)LSD和S-N-K法,P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 術(shù)后第7天粘連程度分級(jí) 由表2和中插彩版圖1可知,各組均有粘連發(fā)生,但無梗阻、腸擴(kuò)張。A組粘連嚴(yán)重,均與腸管、腸系膜粘連,其中1例與胰腺粘連。C組和B組腸管漿膜創(chuàng)傷恢復(fù)良好,痕跡不明顯,只有部分犬腸管與大網(wǎng)膜少量粘連,未與其他臟器粘連。C組和B組粘連評(píng)分均低于A組,具有顯著性差異(P＜0.05)。

圖1 各組粘連情況

表2 術(shù)后各組腹腔粘連分級(jí)結(jié)果 (n=4)

2.2 粘連組織病理組織學(xué)觀察 各組腸壁粘連組織切片如中插彩版圖2,A組盲腸漿膜層與粘連組織連接緊密,有大量的膠原纖維,粘連組織中新生毛細(xì)血管明顯增多。C組和B組盲腸漿膜層增厚,膠原纖維較少,有少量的新生毛細(xì)血管。

圖2 腸壁粘連組織H.E.染色 (×200)

2.3 腸粘連創(chuàng)面組織Hyp水平 由表3可知,手術(shù)后第7天取創(chuàng)面粘連組織(未粘連者取創(chuàng)面組織)測(cè)定Hyp含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)B組和C組的腸壁Hyp含量明顯低于A組腸壁Hyp含量,有顯著性差異(P＜0.05)。

表3 腸粘連組織Hyp結(jié)果 (n=4)

3 討論

目前國內(nèi)外研究的纖維蛋白膠、多孔沸石、醫(yī)用膠等都不適用于這種沒有明顯出血點(diǎn)的彌漫性滲血,而且有些醫(yī)用敷料使用后還會(huì)導(dǎo)致粘連的發(fā)生[4]?？涨慌K器損傷或者手術(shù)時(shí)同樣會(huì)出現(xiàn)沒有明顯出血點(diǎn)的彌漫性滲血,且其術(shù)后創(chuàng)面炎癥反應(yīng)、纖維蛋白的滲出,常常導(dǎo)致腹腔粘連。Pados G等人在相關(guān)研究中報(bào)道,90%的開腹手術(shù)會(huì)導(dǎo)致腹腔粘連,外科手術(shù)后,93% ～97%的患者發(fā)生腹腔粘連,腹腔粘連形成后可能不會(huì)表現(xiàn)出臨床癥狀,但是仍有很大一部分會(huì)繼發(fā)腸梗阻、慢性腹腔疼痛等。

本試驗(yàn)采用的術(shù)瑞吉生物流體膜是一種天然復(fù)合植物材料。由羧甲基纖維素鈉和海藻酸鈉組成的等滲液體；羧甲基纖維素鈉和海藻酸鈉均可粘附在創(chuàng)面,避免創(chuàng)面與其他組織接觸發(fā)生粘連；同時(shí)其降解產(chǎn)物可以抑制炎性反應(yīng),保護(hù)肉芽組織,促進(jìn)傷口愈合[5-6]。羧甲基纖維素具有良好的水溶性,溶于水后形成的溶膠具有一定黏度(與海藻酸鈉混合使用時(shí),彌補(bǔ)了海藻酸鈉粘附力不足的情況),可加速血液凝固[7]。吳立各等人在實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn),羧甲基纖維素可以明顯減輕腹腔術(shù)后的粘連程度,8 d后可被降解吸收[8]。同時(shí)纖維素類對(duì)血小板和血紅蛋白等有良好的吸附作用,有利于形成血栓,促進(jìn)止血[9]。另外,纖維素基類的止血材料溶解后可以釋放出負(fù)離子,激活凝血系統(tǒng)從而加快止血[10]。同時(shí),流體膜可以維持傷口周圍的濕潤環(huán)境,促進(jìn)創(chuàng)面愈合,抑制炎癥反應(yīng),減少后期瘢痕的形成,并與周圍組織隔離,減少粘連的發(fā)生。

術(shù)后粘連的形成是腹腔手術(shù)中最常見的并發(fā)癥之一,粘連可以看成體內(nèi)瘢痕的形成,組織在受損后需要進(jìn)行修復(fù)和重塑。當(dāng)手術(shù)或感染引起腹膜或腹腔漿膜損傷時(shí),創(chuàng)面會(huì)發(fā)生炎癥反應(yīng),分泌多種生物活性物質(zhì)。創(chuàng)面的機(jī)械損傷、腹膜炎癥、血凝塊的形成等,都會(huì)引起炎性反應(yīng)和纖維漿液滲出,同時(shí)激活凝血系統(tǒng),導(dǎo)致纖維蛋白沉積并凝固,而術(shù)后纖溶系統(tǒng)失衡,不能及時(shí)溶解纖維蛋白,就形成永久性粘連。

本試驗(yàn)參考Ellis法制作犬腸粘連模型,該方法具有操作簡單、造模成功率高、對(duì)組織損傷小等優(yōu)點(diǎn)。本試驗(yàn)粘連分級(jí)結(jié)果表明,A組均與腸管或胰腺發(fā)生粘連,B組和C組部分與大網(wǎng)膜或腸系膜粘連,粘連較輕。證明術(shù)瑞吉生物流體膜具有一定的防粘連作用。通過對(duì)病理切片分析結(jié)果表明：A組纖維組織增生明顯,新生毛細(xì)血管豐富,有明顯的粘連帶。B組和C組盲腸漿膜層增厚,新生血管較少,未出現(xiàn)粘連帶,創(chuàng)面有纖維增生。說明術(shù)瑞吉生物流體膜沒有影響創(chuàng)面自身的愈合過程,有一定的防粘連作用。通過對(duì)創(chuàng)面組織Hyp含量分析結(jié)果表明：C組Hyp含量明顯低于A組但高于B組,與粘連評(píng)分結(jié)果和組織切片結(jié)果相符。試驗(yàn)結(jié)果與lvarsson M L.等人的研究結(jié)果相吻合[11]。再次證明術(shù)瑞吉具有預(yù)防粘連的作用。因此,該試驗(yàn)證明了術(shù)瑞吉生物流體膜在犬腸粘連模型術(shù)后具有一定的防粘連作用。