劉 霞，李照偉，王 慧，崔 燕，張 霞，張人俊

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，甘肅蘭州 730070；2.貴州省動物疫病預防控制中心，貴州貴陽 550008）

偽狂犬病（pseudorabies，PR）是由偽狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）引起的一種可感染家畜以及其他多種野生動物的烈性傳染病[1]，其中豬是PRV的主要宿主。發(fā)熱和腦脊髓炎是PRV感染的主要臨床特征，同時PRV感染還會引起種豬繁殖障礙，以及新生仔豬的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，對仔豬有很高的死亡率。研究表明，PRV是豬呼吸系統(tǒng)疾病綜合征（PRDC）重要原發(fā)性病原之一[2-3]。我國1947年首次報道該病。自2011年以來，蘇、魯、豫、皖、冀、浙、粵、湘等地的PRV感染率不斷攀升，感染豬場數(shù)量不斷增多。同時，隨著規(guī)?；B(yǎng)殖的普遍化，PRV與其他病毒性疾病以及細菌性疾病的混合感染給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大經(jīng)濟損失[5-6]。研究表明，母源抗體的半衰期一般為10～15 d，因此選擇母源抗體下降到較低水平時再進行疫苗接種，可以盡量避免母源抗體對仔豬主動免疫的影響，但過低水平的母源抗體又不能對仔豬防御病毒感染產(chǎn)生足夠的保護力[7]。蔣安華等[8]在參照國內(nèi)外應用PRV基因缺失疫苗來凈化PR基礎(chǔ)上，采用對所有基礎(chǔ)公、母豬每年普免3次，后備母豬配種前免2次，保育豬55～60日齡免疫1 次的免疫方案，經(jīng)過3年的實施，使豬場PRV野毒感染陽性率降低到了凈化標準。本研究在調(diào)查規(guī)模豬場PRV感染的基礎(chǔ)上，選取1個規(guī)模豬場，經(jīng)gE-ELISA檢測后選取3組豬群，設置不同的免疫程序并跟蹤檢測免疫抗體產(chǎn)生及消長情況，從而為科學制定規(guī)模豬場免疫程序提供參考。

1 材料與方法

1.1 分組及免疫程序設置

在規(guī)模豬場，先用gB-ELISA和gE-ELISA檢測妊娠母豬抗體；挑選gE、gB母源抗體均為陰性的仔豬10頭，命名為A組；gE陰性母豬產(chǎn)前40 d免疫PRV疫苗，挑選gB母源抗體陽性仔豬10頭，命名為B組；挑選gE母源抗體陽性仔豬10頭，命名為C組。針對不同分組，制定相應的免疫程序（表1）。

1.2 疫苗及檢測試劑

疫苗株：Bartha-K61株，生產(chǎn)批號1610010-2；SA215株，生產(chǎn)批號201707022。PRV gI（gE）-ELISA檢測試劑盒，批號107HS827，用于血清中的野毒感染抗體檢測；PRV gB-ELISA檢測試劑盒，批號107HS806，用于血清中的免疫抗體檢測。

1.3 抗體檢測

對不同分組，采集豬血清，按照試劑盒要求及操作步驟進行檢測，依據(jù)試劑盒判定標準進行結(jié)構(gòu)判定。

A組：在10、30、40、60、80、100、120日齡，各進行1次gB-ELISA跟蹤檢測；B組：在10、20、30、45、70、95、120、150、185 日齡，各進行1次gB-ELISA跟蹤檢測；C組：在10、20、30、50、75日齡，各進行1次gE-ELISA及gBELISA抗體跟蹤檢測。

2 結(jié)果與分析

2.1 A組

1日齡的活疫苗滴鼻免疫對豬群血清免疫抗體水平?jīng)]有影響，全為陰性；15日齡基因缺失疫苗免疫15 d后開始檢測到免疫抗體陽性，且陽性率逐漸升高；45日齡加強免疫1個月后，免疫抗體水平達到頂峰，此后逐漸下降，但持續(xù)到120日齡時，仍有50%的抗體合格率（表2）。

2.2 B組

1日齡活疫苗滴鼻免疫對母源抗體陽性豬群的血清抗體水平?jīng)]有影響，抗體水平持續(xù)下降，到45日齡時，合格率下降到了50%。50日齡基因缺失疫苗注射免疫后至70日齡期間，免疫抗體陽性率持續(xù)升高，90日齡再用基因缺失疫苗加強注射免疫1次，至120日齡免疫抗體達到頂峰，150日齡開始下降，持續(xù)到185日齡時，免疫抗體合格率下降到50%（表3）。

2.3 C組

母源抗體gE陽性背景下，不管是1日齡活疫苗滴鼻免疫，還是15日齡基因缺失疫苗注射免疫和45日齡加強免疫，gE抗體陽性持續(xù)存在，gB抗體滴度較低，說明經(jīng)過多次疫苗免疫，并不能使仔豬產(chǎn)生有效的免疫保護抗體（表4）。

3 討論

通過對3組不同母源抗體背景仔豬，采取不同的免疫程序進行免疫，然后進行跟蹤監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)對初生仔豬進行滴鼻免疫，不會產(chǎn)生有效的保護抗體，但會對呼吸道粘膜感染設置物理屏障，因此滴鼻免疫也很重要。

對于母源gE抗體陽性豬，疫苗免疫不能使其產(chǎn)生有效的免疫抗體，因此豬場定期檢測種豬gE抗體很有必要，及時淘汰gE抗體陽性種豬。只有g(shù)E抗體為陰性時，制定的豬場免疫程序才有意義。

表2 A組仔豬PRV gB-ELISA檢測結(jié)果（S/N）

規(guī)模豬場可結(jié)合抗體檢測結(jié)果，參考以下免疫程序：母源gB抗體陰性仔豬，1日齡滴鼻免疫，15日齡基因缺失疫苗注射免疫，45日齡加強免疫1次；母源gB抗體陽性仔豬，50日齡基因缺失疫苗注射免疫，90日齡加強免疫1次。

表3 B組仔豬豬偽狂犬病gB-ELISA檢測結(jié)果（S/N）

表4 C組仔豬豬偽狂犬病gB-ELISA及gE-ELISA檢測結(jié)果（S/N）

4 結(jié)論

本研究在貴州省某規(guī)模豬場，選取3組不同母源PRV gE和gB抗體背景仔豬群，開展PR免疫抗體消長規(guī)律研究。研究表明：仔豬的母源抗體背景，對于仔豬免疫程序的制定具有較大影響；對于不同母源抗體背景仔豬，其首免日齡和加強免疫日齡的選定，要結(jié)合母源抗體和免疫檢測結(jié)果合理制定；只有g(shù)E母源抗體為陰性的仔豬，才能通過制定合理的免疫程序，使其獲得足夠的免疫保護。