曹愛巧 譚磊 吳雯娟 黃婷 羅燕

摘 ?要：研究建立了使用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定液態(tài)奶中的三聚氰胺檢測方法。用二乙胺乙腈水溶液超聲提取液態(tài)奶中的三聚氰胺，離心后進行過濾，濾液不需要凈化，直接用氮氣吹干，20%甲醇溶液復(fù)溶。驗證結(jié)果滿足SN/T 0001-93的要求，具有較好的精密度和準確度，該方法具有特異性強、前處理簡單等特點，適合液態(tài)奶中三聚氰胺的定量測定。

關(guān)鍵詞：液態(tài)奶;三聚氰胺;液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜

中圖分類號：S859.84 文獻標志碼：A 文章編號：1001-0769（2019）05-0056-03

三聚氰胺俗稱密胺、蛋白精，是一種三嗪類含氮雜環(huán)有機化合物，常被用作化工原料[1]。三聚氰胺對人體有害，微溶于水，無味，白色單斜晶體，可溶于甲醇、甲醛和乙酸等，不溶于丙酮和醚類，不能作為食品添加劑使用或是用于食品加工。但是，不法商人為了提高食品或飼料檢測中蛋白質(zhì)含量指標，借助三聚氰胺的高含氮量，把其摻進食品或飼料中[2]。非法添加三聚氰胺會對人的腎臟和膀胱等器官產(chǎn)生有害作用，引發(fā)結(jié)石[3]。中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會、工業(yè)和信息化部和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部等五部委聯(lián)合發(fā)布公告，制定了三聚氰胺在乳與乳制品中的臨時管理限量值，其中規(guī)定液態(tài)奶（包括原料乳）、奶粉和其他配方乳粉中三聚氰胺的限量值為2.5 mg/kg，高于2.5 mg/kg的產(chǎn)品一律不得銷售。含乳15%以上的其他食品中三聚氰胺的限量為2.5 mg/kg，高于2.5 mg/kg的產(chǎn)品一律不得銷售[4-5]。

三聚氰胺在高溫下可能會分解，放出氰化物，在強酸或強堿環(huán)境下，還會發(fā)生水解。測定三聚氰胺的方法有高效液相色譜法[6-7]、氣相色譜質(zhì)譜法[8]和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，高效液相色譜法的靈敏度較低，且無法提供被檢測物的結(jié)構(gòu)信息，一般常作為篩選方法。氣相色譜質(zhì)譜法和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法能夠進行確證分析。中華人民共和國國家標準GB/T22388-2008《原料乳與乳制品中三聚氧胺檢測方法》規(guī)定了高效液相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜法和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定三聚氰胺的方法，但均需對提取液進行固相萃取凈化。本文旨在對液態(tài)奶中三聚氰胺高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法進一步探討。本研究使用二乙胺乙腈水溶液超聲提取液態(tài)奶中的三聚氰胺，離心后進行過濾，濾液不需要凈化，直接用氮氣吹干，20%甲醇溶液復(fù)溶。消除牛奶基質(zhì)的影響，增強了抗干擾能力，降低了檢出限和提高了定量重現(xiàn)性。該法較為簡便，縮短了分析時間，降低了成本。

1 ?試驗部分

稱取2.00 g試樣，置于15 mL刻度試管中，加入7 mL乙腈，渦旋振蕩1 min，加入1 mL二乙胺，用水定容到10 mL，渦旋振蕩1 min，超聲提取15 min，8 000轉(zhuǎn)/min冷凍離心8 min（4 ℃），過濾后備用。移取 ? ? 2 mL在80 ℃下氮氣吹干，1 mL的20%甲醇溶液復(fù)溶，供液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜上機測定。

2 ?結(jié)果與討論

2.1 標準曲線

按方法條件設(shè)置儀器參數(shù)，配制一系列濃度的標準樣品溶液（0.01 μg/mL、 ? ? ? 0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.2 μg/mL和 ?0.5 μg/mL），待儀器基線穩(wěn)定后，對系列標準樣品溶液進行測定，繪制標準曲線，其相關(guān)系數(shù)r=0.998592。

2.2 方法檢出限確定[9]

以空白牛奶樣品為基質(zhì)，一個陽性添加濃度C（10.0 μg/g），按照方法進行前處理，進行上機測定，測得信噪比S/N=19.49，可計算檢出限為0.0015 μg/g。計算公式如下：

檢出限（Method Detection Limit，MDL）（μg/g）=3C/（S/N）

2.3 方法精密度和回收率試驗

以空白牛奶樣品為基質(zhì)，進行加標回收試驗，加標濃度分別為0.01 mg/kg、0.05 mg/kg和0.2 mg/kg。將加標樣品和空白樣品按方法進行前處理[9]，上機測試，結(jié)果見表1、表2和表3。

2.4 結(jié)論

經(jīng)過上述試驗驗證，本方法用于液態(tài)奶中三聚氰胺殘留的測定，一系列濃度的標準樣品溶液（0.01 μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.2 μg/mL和0.5 μg/mL）的標準曲線相關(guān)系數(shù)r=0.998592;方法檢出限確定為0.001 5 μg/g，符合標準方法的要求;0.01 mg/kg、0.05 mg/kg和0.2 mg/kg ? 加標試驗變異系數(shù)分別為5.07%、2.39%和4.82%，加標試驗回收率范圍分別為88.10%～100.50%、97.86%～104.54%和87.79～102.74%。驗證結(jié)果滿足中華人民共和國國家標準SN/T 0001-93的要求，具有較好的精密度和準確度，該方法具有特異性強、前處理簡單等特點，適合液態(tài)奶中三聚氰胺的定量測定。

參考文獻：（9篇，略）