梁宛楠，李 倩

（哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司，哈爾濱 150069）

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 疫苗

NDV、IB、EDS76三聯(lián)滅活疫苗為實(shí)驗(yàn)室制備，批號(hào)為201601、201602、201603。

1.1.2 試驗(yàn)用雞

SPF雞來自哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司五常SPF雞場(chǎng)。

1.1.3 ND、IB（M41）和EDS76的HA抗原

ND的HA抗原、EDS76的HA抗原由本實(shí)驗(yàn)室自制，IB（M41）的HA抗原購(gòu)自荷蘭GD公司。

1.2 試驗(yàn)方法

將上述3批三聯(lián)滅活苗分別存放于2~8℃冰箱和室溫兩種不同溫度條件下。

1.2.1 物理性狀

觀察在不同間隔時(shí)間內(nèi)取不同保存條件下（2~8℃和室溫）的疫苗，觀察其穩(wěn)定性、黏度及有無分層和沉淀現(xiàn)象。

1.2.2 安全性試驗(yàn)

分別取2~8℃保存了3、6、9、12、15個(gè)月的疫苗和室溫保存了3、6、9個(gè)月的疫苗免疫28日齡的SPF雛雞，每羽1.0 mL，每批疫苗每次免疫10只，每次設(shè)對(duì)照5只，觀察15 d，每天觀察注射疫苗的雞只有無全身反應(yīng)和注射部位有無異常變化。

1.2.3 免疫效力試驗(yàn)

取14日齡SPF雞，免疫IBH120弱毒疫苗，每只1羽份，到35日齡，采血，分離血清，測(cè)IB的HI抗體，然后再分別取2~8℃保存3、6、9、12、15月的疫苗和室溫保存3、6、9月的疫苗進(jìn)行接種，第1組0.02 mL·只-1，第2組每只0.5 mL·只-1，每批疫苗每次接種10只，每次設(shè)對(duì)照5只，免疫28 d采血檢測(cè)抗NDV、IBV、EDS76的HI抗體。第1組測(cè)抗NDV的HI抗體，第2組測(cè)抗IBV、EDS76的HI抗體。分別統(tǒng)計(jì)HI抗體平均水平。

2 結(jié)果和討論

2.1 三聯(lián)滅活疫苗的物理性狀

疫苗在2~8℃保存15個(gè)月或在室溫保存9個(gè)月，無分層和破乳現(xiàn)象，其黏度和穩(wěn)定性均符合標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 三聯(lián)滅活疫苗的安全性

疫苗在2~8℃保存15個(gè)月或在室溫保存9個(gè)月，其安全性完全符合標(biāo)準(zhǔn)，接種雞只以后，采食和飲水正常，沒有出現(xiàn)全身不良反應(yīng)，與對(duì)照相比沒有明顯區(qū)別；注射部位沒有發(fā)生腫脹和充血等癥狀，表明三批疫苗安全性全部合格。

2.3 三聯(lián)滅活疫苗的免疫效力

疫苗在2~8℃免疫效力結(jié)果見表1和表2。疫苗在室溫保存免疫效力結(jié)果見表3和表4。

表1 2~8℃保存不同時(shí)間三聯(lián)滅活疫苗ND和EDS76的免疫效力

表2 2~8℃保存不同時(shí)間三聯(lián)滅活疫苗IB的免疫效力

表3 室溫保存不同時(shí)間三聯(lián)滅活疫苗ND和EDS的免疫效力

表4 室溫保存不同時(shí)間三聯(lián)滅活疫苗IB的免疫效力

結(jié)果表明，3批疫苗在2~8℃保存15個(gè)月或在室溫保存9個(gè)月對(duì)雛雞的免疫效力沒有明顯變化，但在臨床應(yīng)用中考慮到疫苗的免疫效力可能會(huì)受到其他不良因素的影響，所以，將滅活疫苗的保存期暫定為2~8℃保存12個(gè)月，在室溫保存6個(gè)月。在臨床應(yīng)用中，特別是在不具備保存條件的地方，將滅活疫苗放置在陰涼通風(fēng)的條件下6個(gè)月不會(huì)影響滅活疫苗的免疫效果。

3 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，該疫苗在2~8℃保存12個(gè)月或在室溫保存6個(gè)月其物理性狀、安全性、免疫效力檢驗(yàn)均合格。