張 芹，宋 威，張開松，屈長義，馮建新

(1.河南省水產(chǎn)科學(xué)研究院，鄭州450044；2.河南工業(yè)大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院，鄭州450001)

1 引言

中國大鯢(Andrias davidianus)是我國特有的珍稀兩棲動物，素有動物演變“活化石”之稱，具有較高的科研價值、遺傳育種價值和經(jīng)濟價值。中國大鯢隸屬隱鰓鯢科，全科有3種大鯢，分別是美國東部的隱鰓鯢、日本岐阜的日本大鯢和中國大鯢[1]。血液是動物體內(nèi)循環(huán)的重要組成部分，能反映物種的特性、生理狀態(tài)和其對環(huán)境變化的適應(yīng)情況。有關(guān)中國大鯢[2]、新疆北鯢[3]、北方山溪鯢[4]的血液學(xué)研究已有報道，本實驗通過對人工飼養(yǎng)大鯢投喂不同的餌料，分析大鯢生長情況及血液學(xué)指標(biāo)的變化，對人工養(yǎng)殖大鯢做進一步的了解，探索出適合大鯢生長的養(yǎng)殖模式，對更好地研究和開發(fā)中國特有的這一優(yōu)良種質(zhì)資源有著重要意義。

2 材料與方法

2.1 實驗材料

選擇人工養(yǎng)殖的健康大鯢16尾，分成四組，測量體長、體重，分別打PIT芯片[5]作為唯一辨識標(biāo)志，養(yǎng)殖在地下室避光陰涼處。養(yǎng)殖用水為河水，通過管道供水，為保持水質(zhì)清新，每五分鐘自動進排水一次，水溫常年保持在13-25℃之間。

2.2 實驗方法

結(jié)合養(yǎng)殖戶的經(jīng)驗，從文獻[6-7]中選擇幾種大鯢愛吃的餌料魚，設(shè)置三個試驗組和一個對照組，對照組正常投喂野雜魚，實驗組按照分組情況投喂特定餌料魚，餌料魚均為新鮮的活魚直接投喂。實驗歷時158天，結(jié)束后所有的大鯢統(tǒng)一測量體長、體重。一次性無菌注射器尾靜脈采血，注入添加抗凝劑的采血管中。血樣保存于冰盒中，送實驗室用美國全自動生化分析儀進行血清生化分析，測定白細胞數(shù)（WBC）、血紅蛋白（Hct）、血小板總數(shù)（Plt）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLOB）、總膽紅素（TBIL-K）、直接膽紅素（DBIL）、間接膽紅素（IBIL）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）、胱抑素C（Cysc）等血液學(xué)生理生化指標(biāo)。

用SPSS軟件對實驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析。

3 結(jié)果與分析

3.1 體重指標(biāo)變化

實驗魚均為5齡魚，實驗前平均體重4370.9 g（3440 g-5400 g），為了避免陌生大鯢之間的爭斗，以原始的池塘分布為依據(jù)。

表1 實驗組和對照組大鯢體重變化情況Tab 1 Comparison of body weight with different for age fish

通過表1可以看出，實驗組體重的增加高于對照組，說明選出的兩種餌料對大鯢的生長都比直接投喂不挑揀的野雜魚要好。泥鰍組平均體重增加了20.21%，體重增加的最多，與對照組相比存在顯著性差異，可見大鯢喜食泥鰍這種餌料魚，并且有利于個體體重的增加，鯽魚組平均體重增加了8.39%，作為餌料比對照組要好，但是增重百分比沒有顯著性差異。劉鑒毅等[8]對人工養(yǎng)殖的大鯢的餌料的選擇性進行了研究，發(fā)現(xiàn)在人工飼養(yǎng)條件下大鯢喜歡吃泥鰍、青蛙、白鰱和鯽魚，其中泥鰍和鯽魚的攝食率分別為94.4%和65%。本實驗的結(jié)果和文獻結(jié)果一致，對于這些大鯢喜食的餌料魚，有利于顯著增加大鯢的體重。

3.2 血液學(xué)生理和生化指標(biāo)

實驗組和對照組的血液學(xué)指標(biāo)見表2。A組總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）和球蛋白（GLOB）含量都是最高的，分別為85.98g/L、32.67g/L和50.81 g/L，實驗組的這三項指標(biāo)的含量均高于對照組。A組谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）含量為177.00 U/L，高于B組（128.00 U/L）和C組（114.00 U/L），對照組谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）含量最低（90.65 U/L）。A組總膽紅素（TBIL-K）含量為4.28 μmol/L，高于B組（1.02 μmol/L）、C組（0.66 μmol/L）和對照組（0.70 μmol/L）。A組間接膽紅素（IBIL）含量為22.82 μmol/L，高于B組（9.56 μmol/L） 和C組（9.39 μmol/L），對照組間接膽紅素（IBIL）含量為3.54 μmol/L，低于實驗組。A組胱抑素C（Cysc）含量為0.74 mg/L，高于B組（0.22 mg/L）、C組（0.11 mg/L）和對照組（0.28 mg/L）。

B組谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）含量為11.50 U/L，低于A組（19.75 U/L）和C組（23.00 U/L），對照組谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）含量為13.15 U/L，僅高于B組。B組谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）含量為9.50 U/L，低于A組（9.75 U/L）和C組（14.00 U/L），而對照組谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（ALT）含量為8.50 U/L，低于實驗組。

表2 實驗組和對照組血液學(xué)指標(biāo)Tab 2 Comparison of blood physiological indices with different forage fish

4 討論

魚類血液學(xué)指標(biāo)的變化，可以反應(yīng)出魚體的生理狀態(tài)和健康狀況。血液中的氧氣絕大部分以血紅蛋白為載體[9]，血紅蛋白直接參與氧氣的運輸，若血紅蛋白含量低，則魚體在劇烈運動或應(yīng)激狀態(tài)時得不到足夠的氧氣。血紅蛋白含量高說明對氧氣的運輸能力較強，也就是動物體質(zhì)處于較好的狀態(tài)，魚類在患病[10-12]時紅細胞數(shù)、血紅蛋白含量都會降低。本實驗中，血紅蛋白的含量沒有顯著性差異，但A、B和C三個實驗組的血紅蛋白含量都較D組要高，說明實驗組的大鯢體質(zhì)狀態(tài)要好于對照組。

總蛋白由白蛋白和球蛋白組成，良好的營養(yǎng)狀態(tài)可以使血蛋白維持在較高水平，患瘋狂病的鰱其總蛋白明顯降低[10]，患敗血癥的鰱總蛋白、白蛋白明顯降低[12]，患病組斑點叉尾鮰白蛋白含量顯著降低[13]。這幾項指標(biāo)在本實驗中沒有顯著性差異，但實驗組的總蛋白、白蛋白水平要高于對照組，說明實驗組的營養(yǎng)狀態(tài)要好于對照組。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶[14-16]是反應(yīng)魚類肝功能、健康狀態(tài)的一個重要指標(biāo)，對照組谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量低于于實驗組，谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶低于實驗組，說明對照組肝功能存在一定的問題，同時也可以說明實驗組的餌料在改善大鯢的肝功能上有一定的效果，泥鰍和大鯢可以作為加強營養(yǎng)狀態(tài)的餌料在平時的喂養(yǎng)中定期投喂，有利于改善人工養(yǎng)殖大鯢的健康狀況。

膽紅素大部分來自衰老紅細胞釋放出的血紅蛋白，當(dāng)肝細胞有異常時會引起直接型、中間型高膽紅素血癥[17-18]，A組總膽紅素、直接膽紅素和間接膽紅素含量都顯著較高，說明長時間投喂單一餌料，對肝細胞也會造成一定的損傷，血清胱抑素C可作為腎小球濾過功能的指標(biāo)，和肌酐都可以作為腎功能損傷的診斷指標(biāo)[19]。A組胱抑素C含量最高，D組肌酐含量最高，通過這兩個指標(biāo)可以看出餌料魚泥鰍的投喂對大鯢腎功能一定的保護作用。

本實驗中大鯢的餌料來自人工捕獲的野雜魚，每隔一天，會有專車送餌料魚進場，工作人員對餌料魚進行篩選，剔除大鯢不能食用的種類，其他新鮮野雜魚直接活體投喂到養(yǎng)殖池塘。經(jīng)過課題組鑒定，大鯢平時食用的魚類有花、鯽魚、泥鰍、馬口魚、麥穗魚、黃顙魚等。結(jié)合本次試驗需要，專人對餌料魚進行篩選，鯽魚和泥鰍挑選后單獨喂養(yǎng)，標(biāo)明野雜魚的組別還是按照平時的喂養(yǎng)習(xí)慣進行。由于雜魚個體小，大鯢易于捕食，一般的大鯢養(yǎng)殖戶投喂的活餌都以野雜魚為主。通過實驗可以得知，大鯢以泥鰍為主要餌料魚時，大鯢體重的增加與對照組相比有顯著差異，而且在餌料中添加泥鰍和鯽魚，對于大鯢的健康狀況也有較好的影響。所以在給養(yǎng)殖大鯢投喂野雜魚的同時，我們建議定期增加一些泥鰍、鯽魚等其他品種，對于大鯢的增重和體質(zhì)都有好的作用。在實際操作中我們發(fā)現(xiàn)，野雜魚中混有刺鰍，倒刺容易卡到大鯢，需要對鰍的品種進行篩選。鯽魚個體大小不一，需要根據(jù)大鯢個體大小挑選適口的進行投喂，若鯽魚個體過大，反而不利于大鯢捕食。