彭文培 陳 敏

(成都大熊貓繁育研究基地，成都，610000)

大熊貓(Ailuropodamelanoleuca)是中國(guó)特有的珍稀動(dòng)物，有“國(guó)寶”和“活化石”之稱。圈養(yǎng)條件下雌性大熊貓性成熟年齡為(5.7±1.1歲)，發(fā)情期主要集中在3—5月，少數(shù)在1—2月和6月[1]以及8、9月發(fā)情，除對(duì)正常的春季發(fā)情有大量研究報(bào)道外，對(duì)于大熊貓?jiān)?、9月的秋季發(fā)情情況，也有研究者進(jìn)行了報(bào)道，如馮文和等[2]研究認(rèn)為春季未發(fā)情的個(gè)別雌性大熊貓?jiān)谇锛疽部赡苡形⑷醯陌l(fā)情表現(xiàn)，藍(lán)景超等[3]觀察到1只由于環(huán)境、飼料等因素的改變，春季未發(fā)情的經(jīng)產(chǎn)雌性大熊貓?jiān)?月中旬出現(xiàn)了典型的發(fā)情行為且配種產(chǎn)仔，陳亞等[4]也報(bào)道了峨眉山大熊貓館發(fā)生初情大熊貓?jiān)?月下旬至9月上旬發(fā)情的情況。以上報(bào)道的大熊貓都屬1年1次的發(fā)情，本文作者在2016—2017年間于成都大熊貓繁育研究基地觀察到4只雌性大熊貓(包括初配和經(jīng)配大熊貓)1年發(fā)情2次的情況，此種情況比較罕見，國(guó)內(nèi)外鮮有記錄。為此，本文將對(duì)該4例大熊貓1年發(fā)情2次的異常情況進(jìn)行介紹，旨在為圈養(yǎng)大熊貓飼養(yǎng)繁育工作提供參考。

1 觀察對(duì)象和方法

1.1 研究地點(diǎn)和觀察對(duì)象

成都大熊貓繁育研究基地位于四川省成都市成華區(qū)，基地占地100 hm2，環(huán)境良好，設(shè)施設(shè)備完善，基地以原成都動(dòng)物園80年代搶救留下的6只病、餓大熊貓為基礎(chǔ)，經(jīng)過幾代人的努力，目前人工圈養(yǎng)種群數(shù)量已達(dá)184只，飼養(yǎng)技術(shù)處于領(lǐng)先水平。本研究所涉及的大熊貓有4只，具體情況見表1。

1.2 大熊貓日常管理

經(jīng)過調(diào)查，4只大熊貓都在基地各獸舍飼養(yǎng)過(太陽(yáng)、月亮產(chǎn)房主要用于大熊貓發(fā)情配種及產(chǎn)仔使用，產(chǎn)房?jī)?nèi)含有若干獸舍，且有獨(dú)立的配種間。每年雌性還未發(fā)情時(shí)基地便將雌性動(dòng)物隨機(jī)分配到太陽(yáng)、月亮產(chǎn)房?jī)?nèi)為發(fā)情交配做好準(zhǔn)備。每只大熊貓享有兩個(gè)連通的室內(nèi)獸舍及一個(gè)室外運(yùn)動(dòng)場(chǎng)，獸舍及運(yùn)動(dòng)場(chǎng)條件一致且符合《大熊貓國(guó)內(nèi)借展場(chǎng)館設(shè)計(jì)規(guī)范》(LY/T 2769—2016)的要求，配種間設(shè)置多個(gè)隔間在保證大熊貓雌雄個(gè)體互相交流信息的同時(shí)又確保其安全)，在出現(xiàn)1年發(fā)情2次的年份，發(fā)情期香冰、北川、雙欣飼養(yǎng)在太陽(yáng)產(chǎn)房，婭仔飼養(yǎng)在月亮產(chǎn)房。基地各獸舍飼養(yǎng)管理水平、竹類投放情況一致，獸舍環(huán)境也基本一致。

1.3 發(fā)情判定方法

本研究采用行為觀察法和激素測(cè)定法同時(shí)監(jiān)測(cè)，互為補(bǔ)充，并綜合發(fā)情行為表現(xiàn)、激素的波動(dòng)水平來判斷雌性大熊貓的最佳配種時(shí)間。行為觀察法和激素測(cè)定法參照楊勝林等[5]的方法進(jìn)行，即：當(dāng)觀察到大熊貓出現(xiàn)發(fā)情行為、生理變化：采食下降，走動(dòng)增多，出現(xiàn)做標(biāo)記、戲水等行為以及外陰腫脹、外翻等生理變化的情況下，啟動(dòng)激素測(cè)定程序，進(jìn)行尿中孕激素、雌激素的檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 發(fā)情行為表現(xiàn)

4只大熊貓?jiān)?016、2017年春季和秋季分別出現(xiàn)發(fā)情的行為特征和外陰發(fā)生明顯的生理變化。具體表現(xiàn)見表2。

表2 4只雌性大熊貓的發(fā)情表現(xiàn)情況Tab.2 The signs of estrus of gaint panda

注：表中行為表現(xiàn)縮寫參考張志和和魏輔文[6]，SM：蹭陰；MAS：自淫；AM：親近雄性；HHM：吼擊雄；WHP：待配；CH：吱吱叫；BL：咩叫
Note：The abbreviations of behavior in the table refer to ZHANG Zhihe and WEI Fuwen(2006)，SM：scent mark.MAS：masturbation.AM：approach male.HHM：howl hit male.WHP：warped-tail phenomenon.CH：chirp；BL：bleat

2.2 激素變化情況

4只雌性大熊貓?jiān)?016、2017年的春秋季發(fā)情時(shí)，其尿中雌激素也呈規(guī)律性變化(圖1)。(其中因北川在2016年12月出現(xiàn)冬季發(fā)情，當(dāng)時(shí)飼養(yǎng)員未將其行為作為發(fā)情處理，尿液收集時(shí)已過高峰期，故未進(jìn)行激素分析)。

圖1 4只雌性大熊貓?jiān)诎l(fā)情高峰尿液中的雌激素水平變化圖Fig.1 The estrogen concentration in giant panda’s urine during heat period

2.3 發(fā)情配對(duì)情況

4只雌性大熊貓均在發(fā)情高潮期時(shí)進(jìn)行配對(duì)(除北川是第1只于冬季發(fā)情的雌性大熊貓，因此錯(cuò)過了最佳配對(duì)時(shí)間，未能配對(duì))，配對(duì)的雄性大熊貓均有后代。

表3 4只雌性大熊貓的發(fā)情配對(duì)情況Tab.3 The signs of mating of gaint panda

3 討論

大多數(shù)野生大熊貓的發(fā)情期出現(xiàn)在4月中旬，受棲息地緯度、海拔高度和異常氣候變化的影響，也會(huì)出現(xiàn)稍有提前(3月下旬)或延遲(5月上旬)的現(xiàn)象[7]。圈養(yǎng)條件下，據(jù)已有的研究報(bào)道，大熊貓發(fā)情時(shí)間差異較大，但也主要集中在每年的3—5月，極少數(shù)在其他月份[1-4]。本研究的4 只雌性大熊貓?jiān)?年中均出現(xiàn)2次發(fā)情行為表現(xiàn)和雌激素規(guī)律變化，其結(jié)果表明少數(shù)大熊貓也存在1年發(fā)情2次的情況，且2次發(fā)情行為表現(xiàn)明顯，這是否正常，還待進(jìn)一步研究。

有研究顯示大熊貓由于哺乳影響了雌激素的分泌水平，致使其發(fā)情時(shí)間推遲至秋季[8]，但本研究這4只雌性大熊貓均未有懷孕育幼歷史，因此，該說法無法解釋這4只大熊貓12月發(fā)情的情況。此外，有資料表明飼料中的植物性雌激素可以發(fā)揮雌激素的作用，從而影響動(dòng)物的生殖[9]。大豆含有較為豐富的植物雌激素[10]，基地從2005年改進(jìn)大熊貓精飼料配方后，大熊貓日常精飼料中大豆比例達(dá)到16%。然而，基地圈養(yǎng)大熊貓食用的精飼料均一樣，其他雌性大熊貓也未曾出現(xiàn)1年發(fā)情2次的情況。不過大熊貓生理周期的變化是否會(huì)受食物中雌激素的影響還有待進(jìn)一步考證。藍(lán)景超等[3]曾推測(cè)旅日大熊貓“梅梅”的秋季發(fā)情可能與肥胖以及減肥過程中飲食結(jié)構(gòu)變化有關(guān)，而峨眉山的“平平”也可能是因?yàn)榻?jīng)歷過減肥過程致使“平平”發(fā)情延緩，出現(xiàn)8月發(fā)情的情況[4]。本文所涉及的4只熊貓，體重指標(biāo)屬正常標(biāo)準(zhǔn)，均未大幅度地改變其日糧水平，因此這一原因也無法解釋本研究出現(xiàn)的特殊情況。也有報(bào)道指出，圈舍地形及圈舍植被的改變會(huì)引起發(fā)情率的提高[11]?；貫榇浯?、雄個(gè)體，待產(chǎn)雌性個(gè)體設(shè)置月亮產(chǎn)房、太陽(yáng)產(chǎn)房以供其配種繁育，且其圈舍植被、地形并未大范圍改變，因此圈舍條件也無法解釋其1年發(fā)情2次現(xiàn)象。另一方面，有人提出提前發(fā)情可能與氣候，溫度等有關(guān)，然而近幾年生活在臺(tái)北、香港、廣州、泰國(guó)、新加坡、馬來西亞，甚至是南半球的澳大利亞的大熊貓也能正常發(fā)情，發(fā)情時(shí)間有的正常，有的出現(xiàn)提前現(xiàn)象，與大熊貓來源地四川相比，這些地方在地理和氣候方面有非常大的差異，可見大熊貓對(duì)地理和氣候環(huán)境具有較強(qiáng)的適應(yīng)能力[11]。

我們注意到，除大熊貓“雙欣”為初配個(gè)體外，其余個(gè)體為經(jīng)配雌性大熊貓，然均未有過懷孕育幼經(jīng)歷，尤其經(jīng)配雌性大熊貓“香冰”，多次觀察其配種后3個(gè)月左右，隨著孕激素大幅度的上升又下降，會(huì)出現(xiàn)減食、坐立不安、舔外陰等待產(chǎn)行為，甚至觀察到其有抱筍現(xiàn)象——狀似懷抱新生大熊貓的行為，卻從未生育過一次，且4只大熊貓發(fā)情期雌二醇波動(dòng)均處于有關(guān)研究的發(fā)情期雌二醇含量變化范圍內(nèi)，在發(fā)情高潮中，尿中雌二醇濃度迅速升高，在發(fā)情后期又逐漸下降到發(fā)情前水平[5，12-13]。

雌激素降到最低水平時(shí)，正常情況表示已排卵，汪謙[14]認(rèn)為在發(fā)情期間，有的會(huì)排出正常卵子而有的未排卵或排不出正常卵。未排卵情況出現(xiàn)尿中雌酮含量變化，可能由兩種原因引起：(1)見于無排卵性功能性子宮出血或受藥物刺激，如：HCG等；(2)卵巢腫瘤或患肝臟疾患時(shí)，因肝臟不能將雌激素滅活，尿中排出量增加[15]。這4只大熊貓均未產(chǎn)過仔，因此我們推測(cè)其生殖機(jī)能可能存在異常，導(dǎo)致其發(fā)情期出現(xiàn)異常情況，但具體原因有待進(jìn)一步研究方能確定。