李 歡
(鳳城市動物疫病預防控制中心,遼寧鳳城 118100)
桑白皮為桑科植物桑Morus alba L.的干燥根皮,性甘、寒,具有瀉肺平喘、利水消腫的功能,主治肺熱喘咳、水腫脹滿尿少、面目肌膚浮腫等。研究表明,復方靈尼膠囊提取物Ⅳ(每1g提取物相當于5.39g生藥,由君藥桑白皮,臣藥穿心蓮和姜黃,佐藥黃芪和黃芩,使藥甘草組合而成)對環(huán)孢素A導致的小鼠T淋巴細胞亞群抑制模型具有顯著的治療作用。
選擇1 日齡的AA肉雞公雛270只,隨機分為3組,每組設(shè)6個重復,每個重復15只。對照組為基礎(chǔ)日糧組,試驗組分別在基礎(chǔ)日糧的基礎(chǔ)上添加0.5%、1%的桑白皮。
試驗動物籠養(yǎng),試驗籠為四層全重疊式育雛籠,自由采食和飲水,控制舍內(nèi)溫度、濕度和光照,衛(wèi)生學指標符合肉雞的衛(wèi)生要求。
參照NRC《雞營養(yǎng)需要》。
2.4.1 樣品采集
分別于21、42日齡從每個重復里隨機抽取2羽雞,心臟采血,分離血清,測定血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量。
2.4.2 測定方法
(1)材料、試劑及配制
采用免疫比濁法,在紫外可見分光光度計上進行測定。試劑盒采用濰坊三維生物工程集團有限公司生產(chǎn)的免疫球蛋白試劑盒,完全按試劑盒說明書進行操作。
微量移液器、塑料試管、試管架、旋渦混勻器、冰箱、水浴鍋和日本島津UV-2401PC紫外可見分光光度計。
IgG試劑:反應(yīng)劑、抗血清液,混合為工作液
IgA試劑:反應(yīng)劑、抗血清液,混合為工作液
IgM試劑:反應(yīng)劑、抗血清液,混合為工作液
標準品
混勻,37℃溫育10min,波長IgA/M 340nm,IgG為700nm處以工作液調(diào)零,測各管吸光度。
(2)結(jié)果計算:
以濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標繪制標準曲線,由此查處標本濃度。
2.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
試驗結(jié)果以平均值±標準差表示,采用SPSS17.0統(tǒng)計分析軟件對試驗數(shù)據(jù)進行單因素方差分析桑白皮對肉雞血清IgA含量的影響。
不同處理對肉仔雞血清IgA含量影響見表2,21和42日齡時,各處理組IgA水平差異不顯著(P>0.05),但相對于對照組,添加0.5%和1%的桑白皮,肉雞血清IgA水平均有提高趨勢。
表2 桑白皮對肉雞血清lgA水平的影響(μg/ml)
不同處理對肉仔雞血清IgM含量的影響見表3和42日齡時,飼糧中添加1%和0.5%的桑白皮相對于對照組均顯著提高了肉雞血清IgM水平(P<0.05)。
表3 桑白皮對肉雞血清lgM水平的影響(μg/ml)
不同處理對肉仔雞血清IgG含量的影響見表4和42日齡時,各處理組 IgG水平差異不顯著(P>0.05),但相對于對照組,添加0.5%和1%的桑白皮,肉雞血清IgG水平均有提高趨勢。
表4 桑白皮對肉雞血清lgG水平的影響(μg/ml)
本試驗結(jié)果顯示,添加不同濃度桑白皮使肉雞血清IgM含量較對照組顯著提高,對IgG、IgA含量也有一定提高趨勢,而證實了桑白皮能夠提高機體的體液免疫機能。