孫民長

(河南省滑縣中醫(yī)院,河南 安陽456400)

菊花為常見藥材之一,多用于治療頭痛眩暈、心胸煩熱及目赤腫痛等。然而由于菊花的密度相對較小,流通性較差,普通飲片不利于進行定量小包裝與藥房調劑[1]。為有效解決此問題,相關人員研發(fā)出了壓制飲片技術,該技術利用物理壓縮的方法,將飲片制作成一定形狀,便于直接使用包裝材料進行相應的封裝處理,有利于藥師對其進行直接調配。另外,煮散顆粒多以傳統(tǒng)中藥煮散理論為依托,僅改變對藥材的粉碎程度,有效保持了傳統(tǒng)意義上湯劑煎煮過程,根據(jù)患者病情進行藥量增減,具有吸收迅速、療效較好的優(yōu)勢。

1 儀器及測試藥品

1.1 儀器 高效液相色譜儀;色譜工作站;C18色譜柱;分析天平;小型中藥粉碎機;電熱鼓風干燥箱;超聲波清洗器。

1.2 測試 藥品菊花煮散顆粒(實驗室自制);菊花傳統(tǒng)飲片(四川新荷花中藥飲片股份有限公司,批號:0910114);色譜甲醇(美國Fisher公司);水(實驗室自制超純水);3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸(中國食品藥品檢定研究院,批號107643-201507);異綠原酸A(中國食品藥品檢定研究院,批號111723-200805);綠原酸(中國食品藥品檢定研究院,批號110753-200413)。

2 方法及結果

2.1 菊花飲片測試溶液制備

(1)壓制飲片測試溶液的制備 通過精密稱取的方式稱取10份菊花壓制飲片,共計30 g,在藥品中加入10倍量的水,靜置30 min。取其中5份樣品分別進行煎煮,煎煮時間分別為5、10、15、20、30 min,煎煮完成后過濾,濾液定容到250 mL,備用。取剩余5份樣品,煎煮30 min后濾過,將濾液收集備用;隨后向濾渣中加入10倍量的水后再進行煎煮,煎煮時間分別為5、10、15、20、30 min,濾過后,將兩次濾液合并,再將其定容到250 mL,備用。

(2)傳統(tǒng)飲片測試溶液的制備 通過精密稱取的方式稱取10份菊花傳統(tǒng)飲片,共計30 g,制備方法同上。

(3)煮散顆粒測試溶液的制備 通過精密稱取的方式稱取10份菊花煮散顆粒,共計30 g,制備方法同上。

2.2 測試的色譜條件 選取C18色譜柱;檢測波長為328 nm,流動相為乙腈(A)-0.1%的磷酸水(B)和梯度洗脫;進樣量為10μL,柱溫控制在30℃,按綠原酸計,理論塔板數(shù)應≥3 000。

2.3 對照品的制備 通過精密稱取的方式稱取3,5-O-二咖啡?；鼘幩?、異綠原酸A及綠原酸。上述3種物質質量分別為13.46 mg、15.55 mg、12.01 mg,將其分別放置于10 m L容量瓶內并加入甲醇,使其溶解至相應的刻度后搖勻,即得到儲備液。精密吸取儲備液3次,每次1 m L,將其置于10 m L容量瓶內并加入甲醇,配制成濃度為0.134 6 mg/m L、0.155 5 mg/m L、0.120 1 mg/m L的溶液。

2.4 方法學實驗

(1)穩(wěn)定性實驗 取同一溶液,依據(jù)上述色譜條件,放置0、120、240、360、480、600、720 min后進樣,測得上述3種物質的峰面積相對標準偏差(RSD)值分別為0.79%、1.52%、1.60%(n=6),證明溶液在室溫內基本保持穩(wěn)定。

(2)精密度實驗 通過精密吸取的方式,于1 d內進行6次連續(xù)進樣,每次取量為10μL,按照上述色譜條件,測定上述3種物質在1 d內精密度RSD值。經(jīng)測定,上述3種物質的1 d內精密度分別為0.70%、1.09%、1.35%(n=6)。連續(xù)3 d進行進樣,測得其日間精密度分別為0.77%、1.49%、1.37%(n=6),證明儀器具有良好的精密度。

(3)重復性實驗 在上述色譜條件下,取供測試溶液10份,每份10 m L,測得3種物質的RSD值分別為0.69%、1.09%、1.73%(n=6)。

(4)加樣回收率實驗 通過精密稱取的方式,稱取6份樣品溶液,每份質量為5 mL,分別向其中加入對照品溶液,其中3,5-O-二咖啡?；鼘幩崛芤汉彤惥G原酸A溶液各1 m L,綠原酸溶液2 m L,確保加入量和供試品中的各成分具有相當?shù)暮?按照上述色譜條件,計算回收率與RSD值。經(jīng)過測定后得出,3種物質回收率的平均值分別為96.95%、97.25%、96.90%,其RSD值分別為1.95%、0.76%、1.47%,證明其加樣回收率與要求相符。

2.5 干膏收率的測定 采用精密吸取的方式分別吸取3種測試溶液各15 m L,將其放置在已經(jīng)恒重的蒸發(fā)器皿內。蒸干后,在105℃環(huán)境下干燥3 h,然后將其放置在干燥器中進行冷卻,冷卻時間為30 min,隨后進行重量的精密測定。

2.6 煎煮曲線結果 對菊花壓制飲片、傳統(tǒng)飲片及煮散顆粒在第1、2次煎煮過程中不同時間點的溶出曲線進行比較。數(shù)據(jù)顯示,飲片形式不同對煎煮溶出效果無影響,3種形式的飲片均可有效確保菊花的煎煮質量,其中煮散顆粒的溶出速度較快,但與其他兩種形式相比并無明顯優(yōu)勢。見表1、表2。

表1 3種形式菊花飲片第1次煎煮溶出曲線

表2 3種形式菊花飲片第2次煎煮溶出曲線

3 討論

研究數(shù)據(jù)顯示,壓制飲片在3,5-O-二咖啡酰基奎寧酸、異綠原酸A及綠原酸含量與干膏收率等方面略高于傳統(tǒng)飲片,但并無明顯優(yōu)勢,證明壓制過后并不會對有效成分的溶出造成影響。對花草類藥材而言,壓制后有利于運輸與存儲,同時有利于藥師進行藥劑的調配[2]。同時,對煮散顆粒而言,隨著煎煮時間的延長,其煎出含量明顯降低。王蕊等[3]研究顯示,煮散顆粒的異綠原酸A的含量較低,可能由于高溫破壞,隨著煎煮時間的延長,煎出的含量也隨之降低,與本研究結果基本一致,證明菊花類藥材煎制時間不宜過長。但是由于本研究時間較短,且研究環(huán)境有限,部分結果可能存在誤差,希望能在以后的研究中不斷改進。

綜上所述,不同飲片形式不會影響菊花的煎煮質量,其煎煮效果不受飲片形式的影響。