棗葉綠茶香氣成分研究

劉紅霞　吳孔陽　王露露　齊建勇　趙旭升

【摘 要】本文采用超聲波輔助液-液萃取法，以灰棗棗葉綠茶為原料，用甲醇做萃取溶劑、三氯甲烷做富集溶劑、氯化鈉溶液做提純劑，再結(jié)合超聲波提高提取率，最后取萃取后的下層有機(jī)相進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）分析，從而得出棗葉綠茶的香氣成分。由GC-MS分析的結(jié)果表明，棗葉綠茶中棕櫚酸甲酯、亞油酸甲酯、油酸甲酯、棕櫚酸的含量較高。

【關(guān)鍵詞】棗葉綠茶;超聲波輔助液-液萃取;GC-MS分析;香氣成分

中圖分類號： R284.1文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A文章編號： 2095-2457（2019）19-0109-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2019.19.051

0 引言

近年來，很多國內(nèi)外學(xué)者對棗葉的活性成分做了研究，表明棗葉中含有三萜酸及其皂苷類、核苷類、氨基酸類、黃酮類化合物、酚酸類等多種類型的活性成分[1]。據(jù)有關(guān)學(xué)者研究，棗葉中黃酮的含量極其豐富，是主要的活性成分，而黃酮類化合物又是有效的自由基清除劑和抗氧化劑，因此為棗葉成為提取黃酮類化合物的原料提供依據(jù)[2]。

本文我們采用超聲波輔助液-液萃取法檢測棗葉綠茶的香氣成分[3]，然后再將富集的液體進(jìn)行氣相色譜分析。超聲波是一種強(qiáng)的彈性波，它能提高提取萃取效率，使溶劑和棗葉綠茶充分接觸，從而有利于香氣成分向提取溶劑轉(zhuǎn)移。與其他技術(shù)相比，特別是針對從植物中提取成分，超聲波輔助液-液萃取法的優(yōu)越性就在于超聲波能分解細(xì)胞膜，促進(jìn)所含成分從植物細(xì)胞基質(zhì)中釋放，從而加強(qiáng)傳質(zhì)。此外，這種方法是在較低溫度下操作的，有利于植物中所含的熱不穩(wěn)定成分。

1 材料與方法

1.1 材料

棗葉綠茶采于洛陽師范學(xué)院棗園

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

經(jīng)查閱文獻(xiàn)得知，采用中心組合設(shè)計(jì)對主要因素進(jìn)行優(yōu)化，得出取200mg棗葉綠茶分別以甲醇和三氯甲烷為萃取溶劑和預(yù)富集溶劑，32℃下超聲波水浴21min，54μL的三氯甲烷，7.4% NaCl 4mL為最佳反應(yīng)條件。本文對優(yōu)化后的實(shí)驗(yàn)方案再進(jìn)行系統(tǒng)的設(shè)計(jì)，用GC-MS進(jìn)行定性定量分析，進(jìn)而檢測出棗葉綠茶的香氣成分。

1.2.1 香氣成分的提取

分別取棗葉綠茶5g（擴(kuò)大25倍）、6g（擴(kuò)大30倍），在研缽中碾碎，分別加入50mL、60mL甲醇;再進(jìn)行超聲水浴，時(shí)間為21min，溫度為32℃，超聲功率為40KHz;在高速離心機(jī)內(nèi)4000rpm，離心5min，進(jìn)行固液分離。上層為深綠色上清液，下層為固體沉淀。分別加入12.5mL、15mL提取劑甲醇，短時(shí)間內(nèi)溶液分層明顯，再4000rpm，離心5min。取下層有機(jī)相，進(jìn)行GC-MS分析。

2 氣相色譜-質(zhì)譜分析

采用GC2010Plus氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行氣相色譜分析，該儀器配備2臺AOC-20i自動進(jìn)樣器和1臺AOC-20s自動取樣器自動進(jìn)樣系統(tǒng)聯(lián)用構(gòu)成的雙自動進(jìn)樣系統(tǒng)和高靈敏度的FID檢測器。GC-MS的氣相色譜條件：色譜柱為Rtx-5MS石英毛細(xì)血管柱（柱長為30m，柱內(nèi)徑為0.25mm，粒徑為0.25μm），進(jìn)樣口溫度為220℃，溶劑延遲5min，氦氣為載氣，壓力84.8Kpa，總流速為50.0mL/min，柱流速為1.52mL/min，線速度為44.5cm/sec，吹掃流速為5.0mL/min，不分流模式，進(jìn)樣量1μL。程序升溫：起始溫度為40℃，保留1min，以5℃/min速率升至250℃，保留40min。質(zhì)譜條件：數(shù)據(jù)采集掃描模式為全掃描，離子源溫度為250℃，離子源接口溫度為250℃，電子轟擊離子源（EI），電子能量為70eV，質(zhì)量范圍（m/z）為30-650amu，溶液延長時(shí)間為5min。

2.1 氣相色譜-質(zhì)譜分析結(jié)果

棗葉綠茶（5g）和棗葉綠茶（6g）分別稀釋10倍進(jìn)行GC-MS分析得到棗葉綠茶的香氣成分、保留時(shí)間、定量離子、峰面積、峰高、濃度以及定性離子，經(jīng)整理制成表格見表1和表2。

表1 棗葉綠茶（5g）GC-MS成分分析

表2 棗葉綠茶（6g）GC-MS成分分析

分別取5g、6g棗葉綠茶經(jīng)萃取后得到的下層有機(jī)相，再進(jìn)行GC-MS分析得到棗葉綠茶香氣成分的色譜圖，結(jié)果見圖1和圖2。

3 總結(jié)

本文灰棗棗葉綠茶采用超聲波輔助液-液萃取法做前處理，再進(jìn)行GC-MS分析。用甲醇做萃取溶劑、三氯甲烷做富集溶劑、氯化鈉溶液做提純劑，再結(jié)合超聲波提高提取率，最后取萃取后的下層有機(jī)相進(jìn)行氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）分析，從而檢測出棗葉綠茶的香氣成分。在實(shí)驗(yàn)中分別取質(zhì)量為5g和6g的棗葉綠茶作為樣本，得出GC-MS分析的結(jié)果：棗葉綠茶（5g）檢測出三種成分，分別為棕櫚酸甲酯、亞油酸甲酯、油酸甲酯;棗葉綠茶（6g）檢測出四種成分，分別為棕櫚酸甲酯、亞油酸甲酯、油酸甲酯、棕櫚酸。，原因可能是（1）樣品量過少（2）該成分在實(shí)驗(yàn)過程中被破壞。

【參考文獻(xiàn)】

[1]張穎，郭盛，朱邵晴，徐璐，嚴(yán)輝，錢大瑋，段金廒.不同干燥方法對酸棗葉中核苷類、氨基酸類及黃酮類成分的影響[J]. 食品工業(yè)科技，2016（09）：296-303.

[2]蔡凌云，韓素菊，肖杭，鄒利娟.密蒙花總黃酮抗氧化活性[J].光譜實(shí)驗(yàn)室，2011（03）：1343-1346.

[3]曾里，夏之寧.超聲波和微波對中藥提取的促進(jìn)和影響[J].化學(xué)研究與應(yīng)用，2002（03）：245-249.