■寶 華 宋利文 張 航 楊阿日木扎 謝天明 馬燕芬*

（1.內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院動物營養(yǎng)與飼料研究所，內(nèi)蒙古呼和浩特010031；2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古通遼028000）

圍產(chǎn)期（即奶牛產(chǎn)前3 周至產(chǎn)后3 周）是奶牛整個泌乳周期中最為至關(guān)重要的一個階段，對奶牛的健康和生產(chǎn)性能極為重要。奶牛在產(chǎn)前1～3 周內(nèi)采食量下降，干物質(zhì)攝入量減少，滿足不了胎兒生長發(fā)育和自身能量代謝的需要；而奶牛在分娩后的1～3周內(nèi)，由于泌乳高峰先于采食高峰到達，致使奶牛機體處于能量負平衡（negative energy balance，NEB）這樣的一種營養(yǎng)應(yīng)激狀態(tài)[1-3]。NEB 啟動機體脂肪動員，隨后血液中非酯化脂肪酸（non-esterified Fatty Acids，NEFA）和β-羥丁酸（beta-hydroxybutyricacid，BHBA）濃度增加，葡萄糖（glucose，GLU）濃度下降[4]，引發(fā)奶牛亞臨床酮病（subclinical ketosis，SCK）、臨床酮?。╟linical ketosis）和脂肪肝等圍產(chǎn)期能量代謝障礙性疾病，亞臨床酮病長期不治療就會轉(zhuǎn)化為臨床型酮病。以圍產(chǎn)期能量代謝障礙為病理學(xué)基礎(chǔ)的酮病和脂肪肝（妊娠毒血癥、肥胖綜合征）是奶牛重要的群發(fā)性常見多發(fā)病，且多發(fā)于日產(chǎn)奶30 kg 以上的高產(chǎn)牛。由于牧場一味的追求高產(chǎn)奶量、飼養(yǎng)管理程度低下等原因，使得該類疾病的發(fā)病率長期以來一直居高不下。據(jù)相關(guān)資料報道：我國奶牛亞臨床和臨床酮病的發(fā)病率約為15.0%～30.0%，印度為14.7%，美國為5.0%，而日本卻高達43.1%；我國奶牛脂肪肝的發(fā)病率超過30%。一頭患有酮病的奶牛其治療費用和奶產(chǎn)量下降所造成的經(jīng)濟損失可達150～300 美元，若奶?；加型〔粌H顯著降低免疫性能和繁殖性能，還會提高奶牛治療成本，顯著降低整個泌乳期的生產(chǎn)性能、繁殖性能和健康狀況，給奶牛業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失[5-6]。故奶牛亞臨床酮病、臨床酮病、脂肪肝一直被各國列為最重要的圍產(chǎn)期奶牛代謝病而加以研究，而防治新技術(shù)和新方法是該研究領(lǐng)域的重點之一。本課題組近5 年來一直在研究圍產(chǎn)期奶牛營養(yǎng)代謝病的發(fā)病機理[7-8]和防治技術(shù)[9-10]，有效地提高了圍產(chǎn)期奶牛的生產(chǎn)性能和健康狀況。

奶牛亞臨床酮病是目前奶牛養(yǎng)殖業(yè)中常見的一種由NEB 所致的營養(yǎng)代謝性疾病，主要發(fā)生在產(chǎn)后前3 周，主要由NEB 所致[11]。NEB 時，機體必然動員體脂彌補能量虧缺。在機體動員脂肪的同時將產(chǎn)生大量的NEFA，當(dāng)產(chǎn)生的NEFA 超過肝臟的氧化能力時就會在肝臟以脂肪的形式蓄積。同時，由于NEFA氧化不完全會導(dǎo)致機體產(chǎn)生大量的BHBA 進而引起脂肪肝和SCK 的發(fā)生[12]。SCK 時奶牛機體會處于嚴重的NEB 狀態(tài)，脂肪不斷動員的過程使機體處于高代謝狀態(tài)，產(chǎn)生的高濃度的NEFA 和BHBA 不僅能改變血液的酸堿度，影響抗氧化酶的活性，還具有脂毒性，影響線粒體的結(jié)構(gòu)和功能，導(dǎo)致機體在生物氧化過程中產(chǎn)生大量的自由基（Free radical）。自由基是機體氧化反應(yīng)過程中產(chǎn)生的活性物質(zhì)，正常狀態(tài)下機體內(nèi)自由基的產(chǎn)生和清除處于一個動態(tài)的平衡狀態(tài)，然而當(dāng)機體內(nèi)產(chǎn)生的多余自由基不能得到及時有效的清除時，具有強氧化性的自由基不僅會損害機體的組織和細胞，還會氧化其他生物基質(zhì)，如脂質(zhì)、DNA 和蛋白質(zhì)，使機體處于氧化應(yīng)激（oxidative stress，OS）狀態(tài)[13]，引起營養(yǎng)代謝性疾病和慢性疾病的發(fā)生。此外，高濃度的NEFA 和BHBA 可降低抗氧化酶活性，使自由基清除產(chǎn)生障礙，從而使亞臨床酮病奶牛產(chǎn)生氧化應(yīng)激。研究發(fā)現(xiàn)氧化應(yīng)激是一個非常重要的潛在因素[8]，能夠干擾機體的宿主免疫和炎癥反應(yīng)過程，因此氧化應(yīng)激增加了奶牛對各種疾病的易感性，特別是對于圍產(chǎn)期奶牛更容易受到各種營養(yǎng)代謝性疾病和傳染病的影響。圍產(chǎn)期奶牛的氧化應(yīng)激可能是引起炎性反應(yīng)和免疫功能紊亂的主要原因，這一觀點在奶牛的體外和體內(nèi)研究中都得以證實[8]。

越來越多的研究表明圍產(chǎn)期和泌乳早期奶牛的許多疾病的發(fā)生與氧化還原平衡呈顯著相關(guān)。圍產(chǎn)期奶牛由于分娩、泌乳啟動和乳汁分泌增加了奶牛機體的代謝應(yīng)激，奶牛自身抗氧化需求可能還會隨著產(chǎn)奶量的增加而逐步增加。一旦機體組織不能充分清除機體內(nèi)產(chǎn)生的多余的ROS，將不可避免地導(dǎo)致機體產(chǎn)生氧化應(yīng)激，并增加高產(chǎn)奶牛的患病風(fēng)險。因此，如何預(yù)防宿主組織的氧化損傷和免疫功能的紊亂，可能是更加有效地避免圍產(chǎn)期奶牛代謝性疾病發(fā)生的有效策略?；谝陨戏治?，本試驗主要分析圍產(chǎn)后期患有亞臨床酮病奶牛的脂質(zhì)動員與免疫紊亂和氧化損傷之間的關(guān)系，該研究可為提高亞臨床酮病奶牛的生產(chǎn)性能和健康狀況提供技術(shù)依據(jù)，同時對于揭示相關(guān)代謝性疾病的發(fā)生機制和制訂有效的預(yù)防措施提供相關(guān)參考。

1 材料與方法

1.1 亞臨床酮病奶牛篩選

在呼和浩特市一奶牛場選擇（2～5 胎），體重（650±20）kg、上一胎次產(chǎn)奶量（30±2.45）kg接近的產(chǎn)前（5±2）d 的50 頭臨床檢查健康的荷斯坦奶牛作為試驗動物，產(chǎn)后第10、20 d早晨飼喂前用無抗凝真空采血管尾靜脈采集血液，血液采集后立即放入冰盒保存，孵育后離心分離血清，分裝于1.5 ml 離心管，-20 ℃保存待測血液中BHBA、NEFA 和GLU 濃度。根據(jù)產(chǎn)后10 d 血液生化指標和臨床癥狀對所選擇的牛只進行分組，其中亞臨床酮病組奶牛10 頭，血液指標為1.2 mmol/l＜BHBA＜3.0 mmol/l，NEFA＞0.4 mmol/l，葡萄糖＜3.0 mmol/l，并伴有精神萎靡，食欲低下，體重減輕，泌乳量下降等作為SCK 組；健康奶牛10 頭，血液指標為BHBA＜1.2 mmol/l，NEFA＜0.4 mmol/l，葡萄糖＞3.0 mmol/l，且食欲、體溫、脈搏、泌乳量、呼吸正常的奶牛作為對照組。整個試驗過程牛群統(tǒng)一飼養(yǎng)管理，自由采食，自由飲水。

1.2 試驗日糧

所有奶牛均飼喂相同的基礎(chǔ)日糧，泌乳前期奶牛日糧組成詳見表1。

表1 泌乳前期奶牛日糧組成和營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 血液采集和測定

分別于產(chǎn)后第10、20 d 經(jīng)尾靜脈穿刺采集對照組和SCK組奶牛血樣，室溫下靜置2 h后用LD-3離心機于4 ℃下3 500×g 離心15 min（常州億能實驗儀器廠，江蘇，中國）。分離后的血清分裝于1.5 ml離心管中保存于-80 ℃，用于測定酮體指標、生化指標、抗氧化酶活性及免疫指標。

血清中BHBA、NEFA和GLU含量，抗氧化指標總抗氧化酶（Total antioxidant capacity，TAC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活性，氧化指標丙二醛（malondialdehyde，MDA）、活性氧（reactive oxygen species，ROS）、過氧化氫（hydrogen peroxide，H2O2）采用試劑盒（Randox Laboratories，Crumlin，UK）和酶標儀（Hitachi，Tokyo，Japan）進行測定；血清中生化指標天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（aspartate aminotransferase，AST）、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶（gamma-glutamyltransferase，GGT）、白蛋白（albumin，ALB）、膽固醇（Cholesterol，Chol）和甘油三酯（Triacylglycerol，TG）活性采用全自動生化分析儀（Sekisui Medical Co.，Ltd.，Tokyo，Japan）進行測定；血清中免疫指標免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）和炎性因子腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白介素-1β（interleukin-1 beta，IL-1β）、白介素-2（interleukin-2，IL-2）、白介素-8（interleukin-8，IL-8）、干擾素-γ（interferon-gamma，IFN-γ）采用ELISA 試劑盒和酶標儀（Hitachi，Tokyo，Japan）進行測定。

1.4 乳樣采集和測定

分別于產(chǎn)后第10、20 d左右連續(xù)3 d測定對照組和SCK組奶牛自由采食TMR的供給量、剩余量，計算出每組牛的平均采食量。

記錄產(chǎn)后10、20 d 對照組和SCK 組奶牛的產(chǎn)奶量，分別將第10 d 和20 d 早、中、晚采集的奶樣以4:3:3 混合后用乳成分分析儀LM2（北京英偉達科技有限公司，北京，中國）測定奶樣中的乳成分含量和體細胞數(shù)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

數(shù)據(jù)處理與分析采用SAS 9.4（SAS Institute Inc.，Cary，NC）進行統(tǒng)計檢驗。采用單因素方差分析（One-way ANOVA）和t 檢驗（Student's t-test）進行兩組比較。與對照組相比，P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01表示差異極顯著。

2 試驗結(jié)果

2.1 圍產(chǎn)期亞臨床酮病奶牛血液代謝參數(shù)（見表2）

表2 對照組和亞臨床酮病組奶牛產(chǎn)后10 d和20 d血液代謝參數(shù)

從表2 數(shù)據(jù)可知，在產(chǎn)后10 d 和20 d 時，SCK 組奶牛血液中BHBA 含量分別極顯著（P＜0.01）和顯著（P＜0.05）高于對照組，NEFA 含量均顯著高于對照組（P＜0.05），而GLU 含量在產(chǎn)后10 d（P＜0.05）和20 d（P＜0.01）時則顯著和極顯著低于對照組。且隨著泌乳時間的延長，SCK組奶牛血液中BHBA 含量均呈下降趨勢（P＜0.05），但SCK組奶牛產(chǎn)后20 d時BHBA 含量仍顯著高于對照組產(chǎn)后10 d 的奶牛（P＜0.05）。從以上數(shù)據(jù)來看，在產(chǎn)后20 d內(nèi)SCK組奶牛BHBA含量在1.2～3.0 mM之間，NEFA含量顯著高于0.4 mM，葡萄糖含量則顯著低于3.5 mM，說明奶牛在產(chǎn)后20 d內(nèi)一直處于嚴重的能量負平衡狀態(tài)，導(dǎo)致機體產(chǎn)生了嚴重的亞臨床酮病。此外，我們測定了血液中生化指標，以此判定亞臨床酮病奶牛的肝臟代謝情況。從表2 數(shù)據(jù)可知，在產(chǎn)后10 d 和20 d 時，SCK 組奶牛血液中AST、CHOL 含量分別極顯著（P＜0.01）和顯著（P＜0.05）高于對照組，ALT 含量均顯著高于對照組（P＜0.05），ALB和TG含量均極顯著高于對照組（P＜0.01）；而SCK組奶牛血液中GGT 含量僅在產(chǎn)后20 d時顯著高于對照組（P＜0.05）。之后隨著泌乳時間的增加，SCK 組奶牛血液中AST、ALB、CHOL 和TG 含量均呈下降趨勢（P＜0.05），但SCK 組奶牛產(chǎn)后20 d 時AST、ALT、ALB、CHOL 和TG 含量仍顯著高于對照組產(chǎn)后10 d 的奶牛（P＜0.05）。說明SCK 組奶牛肝臟功能在逐漸修復(fù)，但仍顯著高于對照組產(chǎn)后10 d的奶牛（P＜0.05）。以上數(shù)據(jù)進一步說明部分奶牛在圍產(chǎn)后期由于較高的產(chǎn)奶量和較低的干物質(zhì)采食量，導(dǎo)致機體產(chǎn)生了能量負平衡，進而導(dǎo)致機體產(chǎn)生了亞臨床酮病，在圍產(chǎn)期3周后機體自身仍不能進行自我修復(fù)，嚴重的有可能會導(dǎo)致臨床酮病的發(fā)生，降低奶牛生產(chǎn)性能和健康狀況，嚴重者可能會進一步影響奶牛的繁殖性能。

2.2 圍產(chǎn)期亞臨床酮病奶牛氧化還原狀態(tài)分析（見表3）

表3 對照組和亞臨床酮病組奶牛產(chǎn)后10 d和20 d氧化還原參數(shù)

從表3 氧化參數(shù)數(shù)據(jù)可知，在產(chǎn)后10 d 和20 d時，SCK組奶牛血液中ROS含量分別顯著（P＜0.05）和極顯著（P＜0.01）高于對照組奶牛，MDA含量分別極顯著（P＜0.01）和顯著（P＜0.05）高于對照組奶牛，而H2O2含量則均顯著高于對照組奶牛（P=0.02）；且隨著泌乳時間的延長，SCK 組奶牛血液中MDA 含量呈下降趨勢（P＜0.05），但SCK 組產(chǎn)后20 d 奶牛血液中ROS、MDA 和H2O2含量仍顯著高于對照組產(chǎn)后10 d 的奶牛（P＜0.05）。從抗氧化參數(shù)數(shù)據(jù)可知，在產(chǎn)后10 d和20 d 時，SCK 組奶牛血液中TAC 和GPX 活性分別顯著（P＜0.05）和極顯著（P＜0.01）低于對照組奶牛，SOD 活性則均顯著低于對照組奶牛（P＜0.05）；SCK 組產(chǎn)后20 d 奶牛血液中TAC、SOD 和GPX 活性仍顯著低于對照組產(chǎn)后10 d 的奶牛（P＜0.05）。綜合以上數(shù)據(jù)可知，SCK 組奶牛在分娩后產(chǎn)生能量負平衡的同時伴隨著氧化水平的增高，抗氧化酶活性的降低，說明分娩后奶牛機體確實產(chǎn)生了氧化應(yīng)激。

2.3 圍產(chǎn)期亞臨床酮病奶牛免疫水平變化（見表4）

表4 對照組和亞臨床酮病組奶牛產(chǎn)后10 d和20 d免疫參數(shù)

從表4 免疫因子參數(shù)數(shù)據(jù)可知，在產(chǎn)后10 d 和20 d 時，SCK 組奶牛血液中IgG 含量分別極顯著（P＜0.01）和顯著（P＜0.05）低于對照組奶牛，而TNF-α（P=0.03）、IL-1β（P=0.04）、IL-2（P=0.03）、IL-8（P=0.04）和IFN-γ（P＜0.05）含量則均顯著高于對照組奶牛；且隨著泌乳時間的延長，SCK 組奶牛血液中IgG 含量呈下降趨勢（P＜0.05），而TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8 和IFN-γ含量則呈上升趨勢（P＜0.05），但SCK組產(chǎn)后20 d奶牛血液中IgG 含量仍顯著低于對照組產(chǎn)后10 d 的奶牛（P＜0.05），TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8 和IFN-γ含量仍顯著高于對照組產(chǎn)后10 d 的奶牛（P＜0.05）。綜合以上數(shù)據(jù)可知，SCK組奶牛在分娩后產(chǎn)生能量負平衡的同時伴隨著炎癥反應(yīng)的發(fā)生。

2.4 圍產(chǎn)期亞臨床酮病奶牛生產(chǎn)性能和健康狀況（見表5）

從表5 中DMI 和產(chǎn)奶量數(shù)據(jù)可知，在產(chǎn)后10 d和20 d 時，SCK 組奶牛產(chǎn)奶量顯著（P＜0.05）和極顯著（P＜0.01）低于對照組奶牛，DMI 則均顯著低于對照組奶牛（P＜0.05），而SCC 則顯著（P＜0.05）和極顯著（P＜0.01）高于對照組奶牛；且隨著泌乳時間的延長，SCK 組奶牛SCC 呈上升趨勢（P＜0.05），但SCK 組產(chǎn)后20 d 時DMI 和產(chǎn)奶量仍顯著低于對照組產(chǎn)后10 d 的奶牛（P＜0.05），SCC 仍極顯著高于對照組產(chǎn)后10 d 的奶牛（P＜0.01）。SCK 組奶牛DMI（P=0.03）和產(chǎn)奶量（P＜0.01）顯著低于對照組奶牛，SCK 奶牛分娩后20 d 內(nèi)下降了9.13%～15.33%。從乳成分數(shù)據(jù)可知，SCK 組奶牛和對照組奶牛乳成分含量之間沒有差異（P＞0.05）。綜合以上數(shù)據(jù)可知，SCK 組奶牛機體產(chǎn)生的氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，顯著降低了奶牛生產(chǎn)性能，并增加了乳中的SCC。

表5 對照組和亞臨床酮病組奶牛產(chǎn)后10 d和20 d干物質(zhì)采食量、產(chǎn)奶量、乳成分含量和體細胞數(shù)

3 討論

3.1 亞臨床酮病奶牛的氧化應(yīng)激和炎性反應(yīng)

奶牛妊娠晚期和泌乳早期之間的圍產(chǎn)期無疑是營養(yǎng)介導(dǎo)的代謝性疾?。ㄈ缤『椭靖危┌l(fā)病率較高的階段。產(chǎn)后奶牛通常會處于NEB 狀態(tài)，這是由于用以維持奶牛產(chǎn)奶性能的干物質(zhì)攝入量低和對能量的需求增加而導(dǎo)致的[14]。當(dāng)機體處于NEB 時，就會啟動機體脂肪動員，隨后增加血液中NEFA 和BHBA 的濃度[15]。本研究也得出相同的結(jié)果，圍產(chǎn)后期SCK 奶牛血液中BHBA 和NEFA 濃度顯著高于健康組奶牛。其他研究結(jié)果也得出，SCK奶牛血清中1.2 mM＜BHBA＜3.0 mM，葡萄糖濃度低于3.5 mM[16-17]，本試驗結(jié)果得出SCK 組奶牛BHBA濃度均在1.2～3.0 mM 之間，NEFA 濃度高于0.4 mM，而葡萄糖濃度均低于3.0～3.5 mM，說明奶牛產(chǎn)犢后的3 周內(nèi)確實患有亞臨床酮病，但還沒有達到臨床酮病。

患有SCK 的奶牛常常會表現(xiàn)出較高的脂肪酸水平和肝臟脂質(zhì)積累。肝臟積累過多的脂質(zhì)則會損害線粒體功能、能量代謝和細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，以及其他途徑[18]。此外，肝臟過量的NEFA 會酯化為TG，導(dǎo)致肝臟脂肪堆積[19]。在我們的研究中也發(fā)現(xiàn)，SCK 奶牛血液生化指標膽固醇和TG 含量顯著增加，導(dǎo)致肝臟脂質(zhì)積累。然而，過多的肝臟脂質(zhì)積累可能會增加炎癥反應(yīng)。從我們所測得的數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，SCK 奶牛的炎癥標志物TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8 和IFN-γ的濃度顯著高于對照組，而IgG 含量顯著低于對照組，說明SCK 奶牛表現(xiàn)為肝臟脂肪堆積和全身炎癥反應(yīng)。

此外，肝臟脂質(zhì)積累也會導(dǎo)致機體產(chǎn)生過量的活性氧（ROS）。根據(jù)人類和小鼠的研究結(jié)果可知，高水平的ROS 通過改變細胞膜的完整性和功能來誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化、蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和核酸中的鏈斷裂，損害細胞和細胞器，進而誘導(dǎo)“二次損傷”并導(dǎo)致細胞凋亡[20]。本課題組前期體外研究發(fā)現(xiàn)，圍產(chǎn)期奶牛機體產(chǎn)生的氧化應(yīng)激可通過降低核因子E2 相關(guān)因子2（nuclear factor erythroid 2 like 2，NFE2L2）的核易位和轉(zhuǎn)錄活性而增加乳腺上皮細胞（bovine mammary epithelial cells，BMEC）的氧化損傷，破壞蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和DNA結(jié)構(gòu)，誘導(dǎo)乳腺上皮細胞產(chǎn)生凋亡，并最終導(dǎo)致機體氧化還原狀態(tài)不平衡[8]。

研究表明，過量的脂質(zhì)積累可促進脂質(zhì)毒性，并可通過產(chǎn)生氧化應(yīng)激來誘導(dǎo)小鼠肝損傷和炎癥反應(yīng)[21-22]。本試驗數(shù)據(jù)也得出，患有SCK 的奶牛表現(xiàn)出氧化應(yīng)激，與對照組相比，SCK奶牛血液中ROS、MDA和H2O2含量顯著升高，但TAC、SOD 和GPX 活性顯著降低?；谝陨蠑?shù)據(jù)分析，SCK 奶牛表現(xiàn)出嚴重的肝臟氧化應(yīng)激，而嚴重的氧化應(yīng)激則又會導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化、DNA 損傷、線粒體功能障礙，最終誘導(dǎo)細胞凋亡和組織損傷[17]，這與本課題組在BMEC 上得出的結(jié)果一致[8]。

此外，從本試驗所測試的SCK 奶牛肝功能指標發(fā)現(xiàn)，SCK 奶牛血清中AST、ALT、GGT、ALB、膽固醇和TG 濃度均顯著高于對照組，說明SCK 奶牛表現(xiàn)出肝損傷，這與Li 等[23]和Du 等[19]得出的結(jié)果一致，這些結(jié)果也進一步支持了我們的研究結(jié)果。綜上所述，圍產(chǎn)后期SCK 奶牛表現(xiàn)出嚴重的肝氧化損傷和炎性損傷。

3.2 亞臨床酮病奶牛的生產(chǎn)性能和健康狀況

產(chǎn)奶量是衡量奶牛生產(chǎn)性能的重要指標。SCK奶牛血液或牛奶BHBA 水平升高顯著影響產(chǎn)奶量的變化。部分研究發(fā)現(xiàn)SCK 奶牛日產(chǎn)奶量下降了1%～18%[24-25]，但其他研究發(fā)現(xiàn)SCK 奶牛的日產(chǎn)奶量從5%增加到了11%[26-27]，我們的研究發(fā)現(xiàn)患有SCK 奶牛的DMI 顯著低于健康組奶牛，SCK 奶牛日產(chǎn)奶量下降了9%～15%，進一步證明了SCK 奶牛血液中BHBA 濃度與產(chǎn)奶量之間呈線性關(guān)系[17]。研究發(fā)現(xiàn)，SCK 對產(chǎn)后第一周奶牛的產(chǎn)奶量的影響顯著低于第二周[17，25，28]，從本試驗所得數(shù)據(jù)可知，SCK均顯著降低了產(chǎn)后10 d 和產(chǎn)后20 d 的產(chǎn)奶量，且產(chǎn)后10 d 和產(chǎn)后20 d 的產(chǎn)奶量之間無顯著差異，說明奶?；加蠸CK 期間顯著降低了奶牛的產(chǎn)奶量，究其原因可能是與SCK 期間奶牛較低的干物質(zhì)采食量和較高的產(chǎn)奶所需的能量之間的不平衡導(dǎo)致的NEB 有關(guān)。本研究中未發(fā)現(xiàn)SCK 對奶牛乳成分的影響，相關(guān)原因還需做進一步研究。

牛奶中的SCC 可用于確定奶牛是否患有隱性乳房炎，隱性乳房炎的特征是SCC 增加，而乳房或牛奶中沒有任何視覺異常。一般牛奶中SCC 高于60×104個/ml 表示奶?；加须[性乳房炎[29]。較高的隱形乳房炎發(fā)病率會對生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟損失[30]。我們的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)SCK 奶牛乳中SCC 顯著高于對照組，且均低于60×104個/ml，表明兩組奶牛都未患有隱性乳房炎。但在SCC 較高的奶牛中，平均產(chǎn)奶量有所下降，進一步驗證了SCK 顯著降低了奶牛的生產(chǎn)性能。也有研究表明SCK 奶?？山档湍膛５拿庖咝阅躘31]，但不增加乳腺炎發(fā)病率[32]，我們的研究也得出了相同的結(jié)果。Leblanc[33]研究表明產(chǎn)后前2 周的高BHBA 濃度不影響臨床乳腺炎的發(fā)病率，但增加了臨床乳腺炎的嚴重程度和持續(xù)時間，這與該研究中得出BHBA 會提高SCC 的結(jié)果是一致的。本研究未評估臨床乳腺炎，從SCK 奶牛乳房來看，并沒有發(fā)現(xiàn)紅腫、乳房脹大等現(xiàn)象。

4 結(jié)論

圍產(chǎn)后期亞臨床酮病奶牛肝臟均產(chǎn)生了不同程度的氧化損傷和炎性損傷，顯著降低了奶牛的生產(chǎn)性能和健康狀況，且在圍產(chǎn)后期3周內(nèi)機體自身仍不能進行自我修復(fù)。