■劉艷豐 唐淑珍 聶存喜 王文奇* 王承敏

(1.新疆畜牧科學(xué)院飼料研究所，新疆烏魯木齊830013；2.石河子大學(xué)動物科技學(xué)院，新疆石河子832000)

沙棘于1977年列入《中國藥典》后，科研工作者對沙棘汁、沙棘油及其提取物進(jìn)行大量的研究,證實了沙棘含有多種維生素、微量元素、氨基酸和生物活性物質(zhì)，是一種對人體健康有潛在益處的膳食纖維和藥物化合物[1]。每千克沙棘葉中，含有胡蘿卜素724 mg、類胡蘿卜素290 mg、維生素C 1 270 mg、黃酮類9 178 mg，由此可見，沙棘黃酮是沙棘中重要的活性成分。黃酮屬多酚類化合物,根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)，沙棘黃酮以槲皮素和異鼠李素黃酮醇及其苷類為優(yōu)勢活性成分。沙棘黃酮具有強抗氧化劑和抗菌性能[2]，提高免疫系統(tǒng)[3-4]，顯著增加抗高脂血癥[5]。劉艷豐等[6]研究表明，在阿勒泰羊日糧中添加不同劑量的沙棘葉黃酮，可以提高阿勒泰羊的日增重；提高凈肉率；提高血清總蛋白和免疫因子。但在不同脂肪含量的日糧中，沙棘黃酮對阿勒泰羊羔羊的脂肪代謝等是否有影響尚不清楚。本試驗旨在前期研究的基礎(chǔ)上，在阿勒泰羊羔羊不同脂肪含量的日糧中添加沙棘黃酮，通過生產(chǎn)性能、屠宰性能和脂肪代謝酶含量等評價沙棘黃酮的作用，為沙棘黃酮的科學(xué)利用和功能性飼料添加劑的開發(fā)提供參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

沙棘黃酮(總黃酮含量50%，經(jīng)檢測其它成分主要是纖維等）。

1.2 試驗動物分組

選取健康的5月齡體重相近的阿勒泰羊冬季出生的公羔羊40只，隨機分成4組，每組分10個重復(fù)，每個重復(fù)1只，經(jīng)方差分析，組間試驗羊差異不顯著。本試驗于2017年5月到7月在新疆福?？h某養(yǎng)殖合作社開展，預(yù)試期10 d，正試期60 d。試驗飼糧在參照農(nóng)業(yè)部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)“NY/T 816—2004肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)”的基礎(chǔ)上，結(jié)合新疆地方品種——阿勒泰羊的特點配制。試驗飼糧采用采用玉米-棉粕-豆粕和苜蓿-麥草型全價顆粒飼料，單因素完全隨機試驗設(shè)計，Con1組、Con2組分別飼喂低脂飼糧、高脂飼糧（高脂日糧脂肪含量增加25%），LSL組、HSL組為試驗組，分別在Con1和Con2中添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25%的沙棘黃酮，全部制成孔徑為0.6 cm的全價顆粒飼料。基礎(chǔ)飼糧和營養(yǎng)水平見表1。

1.3 飼養(yǎng)管理

采用標(biāo)準(zhǔn)化肉羊圈舍進(jìn)行飼喂，每只羊的占地面積為2.4 m2。每天喂料2 次（9：00、18：00）。所有試驗羊均自由采食和飲水，由專人負(fù)責(zé)飼養(yǎng)管理。按照常規(guī)防疫程序進(jìn)行防疫和圈舍消毒。

1.4 指標(biāo)測定和分析

1.4.1 生長性能指標(biāo)

收集飼糧和剩料，詳細(xì)記錄各組每天采食量，計算平均采食量、料肉比等生長性能指標(biāo)。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

于試驗正式期的第1 d、第20 d、第40 d和第60 d，晨飼前稱試驗羊只體重量，用于計算日增重。

日增重=某一時間段(期末質(zhì)量-初始質(zhì)量)/天數(shù)。

精料樣品于烘箱65 ℃烘至質(zhì)量恒定，粉碎后過篩保存。參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[7]分析干物質(zhì)(DM)、粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)等指標(biāo)(見表1)。

1.4.2 屠宰性能指標(biāo)

于第61 d，從各組選取3只試驗羊進(jìn)行屠宰。宰前禁食24 h，禁水2 h，宰后采集背最長肌并稱重，液氮帶回實驗室，-80 ℃保存。胴體進(jìn)行分割，將骨骼、肌肉、脂肪、尾脂和皮下脂肪等分別稱重和記錄，用于后續(xù)計算。

1.5 統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)用Microsoft Excel 2010整理，采用SPSS 20.0軟件的one-way Anova 過程進(jìn)行方差分析，并采用Duncan's法進(jìn)行多重比較，以P=0.05為差異顯著性標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果和分析

2.1 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔生長性能的影響

表2 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔生長性能的影響

由表2 可知，在1～20 d 和1～60 d，Con2 的日增重最高，與其它組均差異顯著（P＜0.05），在1～60 d，LSL日增重比Con1 降低2.5%，HSL 日增重比Con2 降低14.3%。在1～40 d，Con2 和LSL 的日增重均與Con1、HSL 差異顯著（P＜0.05），HSL 與Con1 也差異顯著（P＜0.05）。Con2 和HSL 干物質(zhì)采食量均與Con1、LSL 差異極顯著（P＜0.01），Con1的干物質(zhì)采食量與LSL差異極顯著（P＜0.01），有機物采食量的趨勢與干物質(zhì)采食量一致。料肉比HSL組最高，Con2組最低。

2.2 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔屠宰性能的影響

表3 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔屠宰性能的影響（%）

由表3 可知，沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔的屠宰性能有影響。屠宰率HSL 組最高，與Con2 組差異顯著(P＜0.05)，與LSL 組差異雖無統(tǒng)計上差異，但P＜0.1。骨骼占胴體的比重，HSL 組最高，與Con1 組差異極顯著（P＜0.01），與Con2 組差異顯著(P＜0.05)；LSL 組與Con2 組差異顯著(P＜0.05)。肌肉占胴體的比重，HSL 組和LSL 組均與Con2 差異顯著(P＜0.05)，分別增加6.25%和6.19%。脂肪占胴體的比重，Con2 組 最 高，與HSL 組 和LSL 組 均 差 異 顯 著(P＜0.05)，HSL 組和LSL 組脂肪占胴體比重分別降低15.93%和12.97%。其它指標(biāo)各組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔背最長肌營養(yǎng)成分的影響

表4 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔背最長肌營養(yǎng)成分的影響

由表4可知：沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔背最長肌的營養(yǎng)成分有影響。HSL組和LSL組脂肪均比Con1組低，且差異顯著（P＜0.05）。HSL組和LSL組黃酮含量均比Con1、Con2組高，且差異極顯著（P＜0.01）。HSL組和LSL組飽和脂肪酸含量均比Con1、Con2組低，且差異顯著（P＜0.05）。HSL組不飽和脂肪酸含量比Con1組高，差異顯著(P＜0.05)。其它指標(biāo)各組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.4 沙棘黃酮對背最長肌的酶活和蛋白的影響

表5 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔背最長肌的酶活和蛋白的影響

由表5 可知：Apo-A100、Apo-B100、ACC 等各組間差異不顯著（P＞0.05）。Con1組、Con2組PPAR-γ的含量高于LSF 且差異顯著（P＜0.05）；而p-AMPK 正好相反，LSF 較高，與Con1 組、Con2 組均差異顯著（P＜0.05）。飼喂高脂肪含量的日糧的p-AMPK 酶活均比飼喂低脂肪日糧的高，而且差異顯著（P＜0.05），與沙棘黃酮添加無關(guān)。

3 討論

3.1 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔生長性能的影響

本試驗表明，添加脂肪能明顯增加日增重，胴體中脂肪含量也較高，但在高脂肪日糧中添加沙棘黃酮，日增重顯著降低，脂肪含量也顯著降低。原因可能是沙棘黃酮具有抑制脂肪的作用，能在合理范圍內(nèi)降低FASN表達(dá)量、抑制脂肪酸的合成、減少動物體脂沉積、提高瘦肉率。

在低脂肪含量日糧中，添加沙棘黃酮對日增重沒有影響，但提高了采食量，劉艷豐等（2014）[6]研究表明在脂肪含量不高的日糧，添加0.25%～0.50%的沙棘葉黃酮，可以提高阿勒泰羊羔羊采食量，與本文的研究結(jié)果具有一致性。國內(nèi)外關(guān)于沙棘黃酮的研究報道較少，李垚等(2008)[8]研究報道日糧中添加0.20%沙棘黃酮極顯著降低了肉仔雞的腹脂率。通過降低過氧化物酶體增殖物激活受體(PPART)基因的表達(dá)來降低FAS 基因的表達(dá)(夏蕾等，2009)[9]。本試驗表明，沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔的脂肪沉積在表觀上也有降低作用，與李垚、夏蕾等在單胃動物上的研究基本一致。表明，沙棘黃酮的降脂效果與動物品種無關(guān)，但作用機理是否一致還需進(jìn)一步研究。

3.2 沙棘黃酮對阿勒泰羊冬羔背最長肌的酶活和蛋白的影響

脂肪的合成和分解的酶活影響最為關(guān)鍵的是激素和日糧(單安山等，2004)[10]。FAS 表達(dá)水平的升高可顯著增加甘油三酯在體內(nèi)的沉積而導(dǎo)致肥胖(Mcneel等，2000)[11]。夏蕾等(2009)[9]在斷奶仔豬日糧中添加0.1%沙棘黃酮可通過降低過氧化物酶體增殖物激活受體(PPART)基因的表達(dá)來降低FAS 基因的表達(dá)量，繼而減少東北民豬腹部脂肪的沉積；但謝偉華等(2009)[12]研究結(jié)果表明，小鼠脂肪組織FAS mRNA 表達(dá)量在山楂黃酮處理后顯著升高，說明山楂黃酮能促進(jìn)脂肪組織和肌肉組織的脂肪酸合成。PPAR-γ刺激前脂肪細(xì)胞分化為成熟脂肪細(xì)胞，而且與成熟脂肪細(xì)胞內(nèi)脂肪形成密切相關(guān)。PPAR-γ可通過活化脂肪細(xì)胞中乙酰輔酶A等促進(jìn)脂肪細(xì)胞中甘油三酯增加，導(dǎo)致脂肪細(xì)胞體積增大（常彥飛等，2013）[13]。本試驗中，添加沙棘黃酮均降低了PPAR-γ的含量，尤其是日糧脂肪含量較低時，抑制效果更明顯，從而影響脂肪合成，沙棘黃酮通過PPAR-γ影響脂肪合成效果是否與飲食中高脂肪含量的日糧有關(guān)還需要進(jìn)一步研究。Lee等（2012）[14]等報道，甘草黃酮能夠激活A(yù)MPK(腺苷酸活化蛋白激酶)，進(jìn)而調(diào)節(jié)脂肪代謝限速酶的活性，促進(jìn)脂肪酸在線粒體的氧化，降低脂肪的沉積以及改善脂質(zhì)代謝紊亂。李欣益等（2018）[15]研究發(fā)現(xiàn)沙棘黃酮對于大鼠的非酒精性脂肪肝病有一定的改善作用,其作用機制是通過調(diào)節(jié)AMPK-PPARα信號通路發(fā)揮作用。本試驗中，添加沙棘黃酮也有同樣的效果，通過調(diào)節(jié)AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)酶活，進(jìn)而調(diào)節(jié)脂肪代謝限速酶的活性，促進(jìn)脂肪酸在線粒體的氧化，降低脂肪的沉積。

4 結(jié)論

在低脂肪含量日糧中，添加沙棘黃酮對日增重沒有影響，但提高了采食量。在高脂肪日糧中，沙棘黃酮對日增重具有抑制作用，對采食量沒有明顯影響。添加沙棘黃酮，增加骨骼在胴體中的比重，降低脂肪，尤其是皮下脂肪在胴體中的比重，從而提高瘦肉率，尤其是脂肪含量高的日糧。

沙棘黃酮通過調(diào)節(jié)脂肪酸合成與分解過程中脂肪代謝關(guān)鍵酶的活性來影響脂肪含量，通過調(diào)節(jié)p-AMPK-PPAR-γ信號通路發(fā)揮作用，從而降低皮下脂肪的含量。飼喂高脂肪含量日糧的p-AMPK 酶活均比飼喂低脂肪日糧的高，是否與沙棘黃酮添加量有關(guān)需要進(jìn)一步研究。