楊婷婷 孫會(huì)剛 李同祥 盧臣 劉小三
姬松茸,又名巴西菇,為純天然綠色食品,是一種美味可口的藥食兼用菌,其含有的多糖抗癌活性在已知的真菌中居首位。另外,姬松茸還含有多種活性物質(zhì),其中的多酚類物質(zhì)具有抗氧化、抗癌等多種活性。本實(shí)驗(yàn)從姬松茸中提取多酚,并分析其含量及種類,將對(duì)姬松茸食用菌營養(yǎng)成分的研究及相關(guān)產(chǎn)品的開發(fā)具有重要意義。
一、材料和方法
材料。姬松茸:1號(hào):河北民安農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司提供;2號(hào):購自于上海;3號(hào):購自于福建。
試劑。無水乙醇、甲醇、甲酸、沒食子酸、多酚類物質(zhì)標(biāo)品(蘆丁、肉桂酸、對(duì)香豆酸、表兒茶素、咖啡酸等),均購自徐州中達(dá)生物科技有限公司。
二、實(shí)驗(yàn)方法
姬松茸多酚提取方法:采用水浴回流加熱法。
多酚含量計(jì)算方法:制作標(biāo)準(zhǔn)曲線采用福林酚法,根據(jù)回歸方程計(jì)算三種不同姬松茸子實(shí)體中多酚的含量。
多酚的檢測:采用高效液相色譜1100檢測。方法:流動(dòng)相A:甲醇,B: 1%的甲酸水,流速0.84Ml/min,柱溫35℃,檢測波長280nm。
三、結(jié)果與分析
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備。采用福林酚法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(見圖1),該標(biāo)準(zhǔn)曲線基本反映了樣品中總酚的量和光吸收之間的關(guān)系,能夠用來進(jìn)行總酚含量測定實(shí)驗(yàn)。
總酚含量的測定。對(duì)三種樣品進(jìn)行總酚含量測定,結(jié)果顯示:不同產(chǎn)地的樣品中多酚含量有所差異(見表1)。其中樣品1中多酚含量較高。
多酚種類的檢測。采用高效液相色譜法對(duì)樣品1中多酚進(jìn)行檢測,檢測的多酚物質(zhì)包括蘆丁、肉桂酸、對(duì)香豆酸、表兒茶素、咖啡酸等。其中根據(jù)標(biāo)品出峰時(shí)間,樣品在保留時(shí)間23.368min(見圖2右圖)的峰和標(biāo)品中23.348(見圖2左圖)出峰時(shí)間幾乎一致,初步判斷為對(duì)香豆酸。
四、討論
姬松茸是一種富含多種活性成份的食藥用兼用菌,其中多酚也是姬松茸含有的一種重要活性物質(zhì),因此,對(duì)于姬松茸多酚的研究是非常重要的。國內(nèi)目前對(duì)姬松茸多酚開展的研究多集中于多酚提取條件的優(yōu)化、總酚分離純化及其功能方面的研究,對(duì)于姬松茸多酚具體成份的研究較少。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)不同來源的姬松茸多酚進(jìn)行提取并測定其含量,發(fā)現(xiàn)了來源不同的姬松茸總酚含量不同,同時(shí)通過高效液相色譜的方法初步確定樣品1中含有對(duì)香豆酸多酚成分。但姬松茸多酚中可能還含有其它多酚類物質(zhì),因此對(duì)于姬松茸多酚的研究還需要更加深入的研究。