奚家龍 丁佳駿
摘要:目的:對冬蟲夏草氨基酸成分的藥理作用進行分析。方法:常規(guī)處理冬蟲夏草取藥粉,將100只健康雄性運動能力差異性不大的小鼠為研究對象,分為模型組、空白對照組、高、中、低劑量氨基組五組。每組實施針對性的實驗方法,對小鼠力竭游泳時間、血乳酸水平、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、鼠白細胞介素、腫瘤壞死因子α進行比較,探究氨基酸成分的免疫功能和抗疲勞功能。結(jié)果:氨基酸組小鼠的抗疲勞能力顯著增強,力竭游泳時間明顯延長,且血清乳酸水平有了明顯下降,小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平改善明顯。五組小鼠比較力竭游泳時間、血乳酸水平、脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、鼠白細胞介素、腫瘤壞死因子α差異顯著,(P<0.05)有統(tǒng)計學意義。此外,高、中、低劑量氨基組指標呈梯度變化的特點,與空白組較為接近,(P<0.05)有統(tǒng)計學意義。結(jié)論:冬蟲夏草氨基酸成分在免疫功能和抗疲勞能力上作用顯著。
關(guān)鍵詞:冬蟲夏草;氨基酸成分;藥理作用
冬蟲夏草屬于中藥材的一種,具有較大的滋補價值。該藥材屬于一種復合體,由蝙蝠蛾幼蟲和菌種結(jié)合而成[1]。其中冬蟲夏草中具有多種活性成分,幾年來對該藥材的研究以氨基酸組分居多。本文主要針對冬蟲夏草氨基酸成分的藥理作用進行分析。內(nèi)容如下。
1材料與方法
1.1材料與實驗動物
選取人工養(yǎng)殖的冬蟲夏草,經(jīng)去泥去腐質(zhì)等處理,自然風干后裝入玻璃器皿中存放。健康雄性運動能力差異性不大的100只小鼠為實驗動物。所有小鼠均未7周齡,體制量平均在(20.1±1.1)g,采用常規(guī)基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)方法。飼養(yǎng)溫度維持在23-25℃,飼養(yǎng)濕度維持在45%-55%。對飼養(yǎng)的小鼠進行一周的行為學指標訓練,將體育和運動能力與平均水平較大的小鼠淘汰。對小鼠進行每隔兩周的游泳訓練,每次在半小時,水溫在29-31℃,水深在30cm。
1.2實驗試劑和儀器
實驗儀器:恒溫水浴鍋、旋渦振蕩器、中藥粉碎機、超聲清洗器、高速低溫、和臺式離心機、全自動繪圖酶標儀、微量移液器等。實驗試劑:,尿素氮、血乳酸、小鼠相關(guān)酶聯(lián)免疫分析等試劑盒,肝素鈉、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸等分析純等。
1.3實驗方法
(1)分析提取氨基酸:在試管中放入20mg樣本,將6mol/L的15ml鹽酸加入。將試管內(nèi)的樣本混合均勻,做真空處理,十分鐘后封管。在烘烤溫度為110℃的恒溫環(huán)境下水解22h。冷卻到室溫搖勻。將11ml濾液放入燒杯。在恒溫水浴60℃環(huán)境下蒸干,行稀釋處理。稱取樣品800mg,塑料離心管規(guī)格10ml,15ml4%黃基水楊酸溶液加入搖勻,22000r/min,15min,取1ml上清液,4倍濾膜過濾。檢查儀器采用全自動氨基酸分析儀。結(jié)果顯示:在0.5%~3.5%之間的為天冬氨酸、絲氨酸。含量最高的為谷氨酸,之后是精氨酸、組氨酸、天冬氨酸。蛋氨酸最少[2]。(2)分組實驗:①抗疲勞實驗:模型組、空白對照組、高、中、低劑量氨基組五組小鼠,每組20只。對模型組外行每次0.4ml,灌胃給藥4w。采用生理鹽水的為空白對照組。高、中、低劑量氨基組給與不同劑量的氨基酸,分別為0.4、0.2、0.1ml。連續(xù)給藥4周后稱重,纏小鼠重量10%的鉛絲行游泳訓練,計算力竭時間。鉛絲取出,經(jīng)針對性處理后摘眼球采血0.1ml,行全血乳酸含量檢測。②免疫功能檢查:行造模處理除空白對照組外,按照50mg/kg劑量注射環(huán)磷酰胺,1次/d,連續(xù)2d。灌胃2周后末次給藥20min,稱重,摘除眼球取血。初處死小鼠對胸腺、脾臟稱重,計算臟器指數(shù),對IL-2、TNF-α檢驗[3]。
1.4統(tǒng)計學方法
數(shù)據(jù)記錄采用WPS表格,統(tǒng)計學計算采用SPSS20.0軟件,計數(shù)資料采用(%)表示,使用X2檢驗;計量資料采用()表示,使用t檢驗,P<0.05代表有統(tǒng)計學意義。
2結(jié)果
2.1抗疲勞實驗
力竭游泳時間和血乳酸水平比較,差異顯著,(P<0.05),且氨基酸組力竭游泳時間按照氨基酸含量的不同呈現(xiàn)梯度變化的特點,表現(xiàn)為力竭游泳時間,高劑量氨基酸組>中劑量氨基酸組>低劑量氨基酸組,(P<0.05)有統(tǒng)計學意義。
2.2免疫功能實驗
小鼠脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平差異明顯(P<0.05)有統(tǒng)計學意義。脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平具體表現(xiàn)為高劑量氨基酸組>中劑量氨基酸組>低劑量氨基酸組,(P<0.05)有統(tǒng)計學意義。
3討論
氨基酸成分是冬蟲夏草中的重要活性組分,其中在0.5%~3.5%之間的為天冬氨酸、絲氨酸。含量最高的為谷氨酸,之后是精氨酸、組氨酸、天冬氨酸。蛋氨酸最少。本次實驗顯示小鼠的抗疲勞能力和氨基酸的含量呈正相關(guān)的關(guān)系,在小鼠力竭游泳時間延長的過程中,血清乳酸水平下降明顯,小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平改善也明顯。高、中、低劑量氨基組小鼠的脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)、IL-2、TNF-α水平呈梯度變化的特點,與空白組較為接近,說明冬蟲夏草氨基酸成分在免疫功能和抗疲勞能力上作用顯著。
參考文獻:
[1]陳麗云,祁真.冬蟲夏草氨基酸成分的藥理作用分析[J].中國衛(wèi)生工程學,2018,17(5):675-677.
[2]鄭方毅.冬蟲夏草中含化學成分的種類及藥理作用研究進展[J].東方食療與保健,2015,(4):16-17.
[3]王林萍,余意,馮成強.冬蟲夏草活性成分及藥理作用研究進展[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2014,(7):132-136.
第一作者:奚家龍 男 1987-8 本科 助理工程師