氮、磷、硫?qū)︺t超富集植物李氏禾吸收CrⅥ的影響

伍嬋翠 劉杰 梁英

摘要：通過水培試驗(yàn)，以用25% Hoaglands營養(yǎng)液培養(yǎng)的植株作為對照，研究無機(jī)營養(yǎng)元素氮、磷、硫?qū)︺t超富集植物李氏禾吸收六價鉻[Cr（Ⅵ）]的影響。結(jié)果表明，李氏禾根系對Cr（Ⅵ）的吸收符合系Michaelis-Menten方程，其米氏常數(shù)（Km）為91.84 μmol/L。與全素培養(yǎng)條件相比，在缺氮、缺硫條件下，李氏禾的根系吸收位點(diǎn)與Cr（Ⅵ）的親和力增加，根系分泌物能增加土壤中難溶性鉻的活性，從而有利于對Cr（Ⅵ）的吸收;而在缺磷培養(yǎng)條件下，根系分泌物不利于土壤中難溶性鉻的溶出，缺磷條件對李氏禾吸收Cr（Ⅵ）存在非競爭性抑制作用。由研究結(jié)果可知，適當(dāng)施用磷肥有利于提高李氏禾對Cr（Ⅵ）污染土壤的植物修復(fù)效率。

關(guān)鍵詞：超富集植物;李氏禾;氮;磷;硫;植物修復(fù)效率

中圖分類號： X173 ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A ?文章編號：1002-1302（2019）14-0316-05

受人類活動的影響，土壤中的六價鉻[Cr（Ⅵ）]污染已經(jīng)成為亟待解決的環(huán)境問題之一。李氏禾（Leersia hexandra Swartz）是我國境內(nèi)發(fā)現(xiàn)并報道的首例鉻超富集植物[1]，因其強(qiáng)大的吸收和富集Cr（Ⅵ）的能力，在Cr（Ⅵ）污染土壤的修復(fù)方面具有良好的應(yīng)用前景。然而，重金屬污染土壤的植物修復(fù)效率受到很多外界因素的影響，土壤中的非金屬營養(yǎng)元素正是影響因素之一。此外，氮（N）、磷（P）、硫（S）對土壤重金屬形態(tài)轉(zhuǎn)化及植物吸收累積的影響也成為環(huán)境領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。

已有一些研究者分析了不同營養(yǎng)元素對植物吸收重金屬的影響。樓玉蘭的研究表明，硝態(tài)氮的施用會促進(jìn)OH-或HCO3-的釋放，使根際pH值上升，從而降低土壤中重金屬的活性，減少了植物對重金屬的吸收[2]。郭光光等的研究表明，施用磷肥提高了蓖麻地下部對銅（Cu）的吸收和積累[3]。López-Bucio等研究發(fā)現(xiàn)，磷抑制了擬南芥對鉻的吸收[4]。Shi等研究發(fā)現(xiàn)，在銅污染土壤中施加硫肥有利于水稻對銅的吸收累積[5]。Zhong等研究發(fā)現(xiàn)，在砷（As）污染土壤中施用硫肥可減少油菜籽粒中的砷含量[6]。Marchiol等利用高粱（Sorghum bicolor）、向日葵（Helianthus annus）在各種金屬污染土壤中進(jìn)行植物提取試驗(yàn)，結(jié)果表明，施肥的植物葉片中富集的As、Cu和鋅（Zn）要高于不施肥的植物[7]。由此可見，不同的營養(yǎng)元素對植物吸收土壤中重金屬的影響存在一定差異，會因營養(yǎng)元素、植物和重金屬種類的不同而有不同的影響。目前，關(guān)于氮、磷、硫影響鉻超富集植物吸收Cr（Ⅵ）的研究未見報道。因此，研究氮、磷、硫?qū)︺t超富集植物李氏禾吸收 Cr（Ⅵ） 的影響，對于提高Cr（Ⅵ）污染土壤的植物修復(fù)效率、進(jìn)一步完善植物修復(fù)技術(shù)都有重要意義。

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)于2016年3月至2017年1月在桂林電子科技大學(xué)花江校區(qū)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院環(huán)境工程實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。

本試驗(yàn)所用李氏禾幼苗采自桂林市靈川縣靈田鄉(xiāng)花江邊的無污染農(nóng)田。選取生長一致的李氏禾幼苗，用去離子水輕柔洗凈后，放置于人工氣候箱（LRH-550-GSI，珠江牌）中，用25% Hoaglands（霍格蘭氏）營養(yǎng)液進(jìn)行水培培養(yǎng)，每3 d更換1次營養(yǎng)液。培養(yǎng)條件如下：光—暗周期為12 h—12 h，白天溫度控制在25 ℃，夜晚溫度設(shè)置為20 ℃，相對濕度控制為75%，光照度為7 000 lx。每天需要加入超純水以補(bǔ)充因水分蒸發(fā)而減少的培養(yǎng)液體積，每3 d更換1次營養(yǎng)液，預(yù)培養(yǎng) 15 d。

供試土壤取自用含鉻廢水處理的模擬人工濕地試驗(yàn)系統(tǒng)。待土壤自然風(fēng)干、用瑪瑙研缽研磨并過100目尼龍篩后備用。參照HJ 491—2009《土壤 總鉻的測定 火焰原子吸收分光光度法》[8]，采用微波消解儀（ETHOS A，Milestone，意大利）對土樣進(jìn)行消解，用原子吸收分光光度計（AA-6300，日本島津）采用火焰法測定消解液中的鉻濃度（mg/L）。供試土壤的總鉻含量為1.80 mg/g。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 N、P、S與Cr（Ⅵ）的競爭吸收試驗(yàn) 試驗(yàn)前，將植物分成7組：（1）對照（用25% Hoaglands溶液培養(yǎng)）;（2）用NO3-完全缺失的25% Hoaglands溶液培養(yǎng);（3）用含有 5 mmol/L NO3-的25% Hoaglands溶液培養(yǎng);（4）用H2PO4-完全缺失的25% Hoaglands溶液培養(yǎng);（5）用含有5 mmol/L H2PO4-的25% Hoaglands溶液培養(yǎng);（6）用SO42-完全缺失的25% Hoaglands溶液培養(yǎng);（7）用含有5 mmol/L SO42-的25% Hoaglands溶液培養(yǎng)。將培養(yǎng)介質(zhì)的pH值均調(diào)至5.5。48 h后，將K2Cr2O7溶液加入各組植物中，使其Cr（Ⅵ）濃度分別為20、40、60、80、100 μmol/L。每個處理設(shè)3個重復(fù)，于處理后4 h收獲植物。

將收獲后的李氏禾根系先用去離子水沖洗3次，再置于超聲波清洗儀中，用10 mmol/L乙二胺四乙酸（EDTA）溶液清洗10 min，以排除植物根系表面吸附的Cr6+離子對試驗(yàn)結(jié)果的影響[9]，最后用超純水清洗3次。輕柔地吸干李氏禾根部表面的水分，并用陶瓷刀將根部切下，先于105 ℃殺青 30 min，再于80 ℃烘至恒質(zhì)量。用陶瓷剪將李氏禾根系樣品剪至長度為1～2 mm，得到植物干樣。

使用微波消解儀（ETHOS A，Milestone，意大利），采用美國環(huán)保局（United States Environmental Protection Agency，簡稱USEPA）的方法3050B[10]對處理好的植物干樣進(jìn)行微波消解。在每個批次的試驗(yàn)中，菠菜標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW10015）也用同樣的方法進(jìn)行消解，作為質(zhì)控，僅當(dāng)檢測濃度在標(biāo)定值的95%～105%范圍內(nèi)時，分析結(jié)果方可接受。

1.2.2 根系分泌物對難溶性鉻的活化試驗(yàn) 試驗(yàn)前，將植物分成4組：（1）對照（用25% Hoaglands溶液培養(yǎng)）;（2）用NO3-完全缺失的25% Hoaglands溶液培養(yǎng);（3）用H2PO4-完全缺失的25% Hoaglands溶液培養(yǎng);（4）用SO42-完全缺失的25% Hoaglands溶液培養(yǎng)。在試驗(yàn)第10天，光照2 h后將李氏禾取出，先用蒸餾水沖洗根部3遍，在新制備的超純水中加入幾滴0.05%百里酚溶液[11]，浸泡李氏禾根部5 min，再用超純水清洗根部3次。將李氏禾放入300 mL 0.5 mmol/L CaCl2溶液中[12]，每杯加入3滴0.05%百里酚溶液，放回培養(yǎng)箱中光照收集4 h。4 h后，將收集液用0.45 μm濾膜抽濾后于40 ℃、90 r/min旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮，在比色管中定容至25 mL。

稱取0.200 g三氧化二鉻[分析純（AR）]、0.200 g鉻酸鉛（AR）、2.000 g土壤樣品，分別倒入裝有根系分泌物的各個比色管中。在室溫下連續(xù)振蕩（振速為150 r/min）3 h后取上清液。用0.45 μm針式過濾器過濾后待測。每組設(shè)3個平行樣。

1.3 樣品的檢測與統(tǒng)計分析

用原子吸收分光光度計（AA-6300，日本島津公司）采用火焰法對樣品中的鉻濃度進(jìn)行測定。標(biāo)準(zhǔn)系列使用液采用鉻標(biāo)準(zhǔn)溶液[GBW（E）080257]配制而成。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以3個平行樣品測定值的算術(shù)平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差表示，數(shù)據(jù)用單因素方差分析法（ANOVA）進(jìn)行統(tǒng)計分析，用最小顯著差數(shù)法（LSD）評價數(shù)據(jù)間的差異水平（P<0.05表示差異顯著）。

2 結(jié)果與分析

2.1 NO3-與Cr（Ⅵ）的競爭吸收

在5 mmol/L NO3-和NO3-缺失的條件下，考察氮對李氏禾吸收Cr（Ⅵ）的影響。由圖1可見，李氏禾對Cr（Ⅵ）的吸收速率隨著Cr（Ⅵ）濃度的增加而提高。在本試驗(yàn)的Cr（Ⅵ）濃度范圍內(nèi)，缺氮培養(yǎng)條件下李氏禾的鉻吸收速率均高于對照;在5 mmol/L NO3-的培養(yǎng)條件下，李氏禾的鉻吸收速率均低于對照。當(dāng)營養(yǎng)液中的Cr（Ⅵ）濃度為20 μmol/L時，缺氮培養(yǎng)的李氏禾對鉻的吸收速率比對照增加了18.0%;而在 5 mmol/L NO3-培養(yǎng)條件下， 李氏禾對鉻的吸收速率比對照減少了25.4%。說明NO3-抑制了李氏禾根系對Cr（Ⅵ）的吸收，而氮元素的缺失則明顯促進(jìn)了李氏禾根系對鉻的吸收。

為了進(jìn)一步研究NO3-與李氏禾根系吸收Cr（Ⅵ）之間的關(guān)系，將缺氮、對照和5 mmol/L NO3-培養(yǎng)條件下李氏禾根系對Cr（Ⅵ）的吸收速率用Michaelis-Menten方程進(jìn)行擬合（圖2），根據(jù)雙倒數(shù)法求得Michaelis-Menten方程的各參數(shù)，列于表1。由圖2、表1可以看出，在5 mmol/L NO3-的培養(yǎng)條件下，李氏禾根系對Cr（Ⅵ）的最大吸收速率（vmax）比對照降低了16.2%，但米氏常數(shù)（Km）較對照明顯提高，說明在此條件下，NO3-與Cr（Ⅵ）競爭李氏禾根部相同的吸收位點(diǎn)。而在缺氮條件下，李氏禾根系對Cr（Ⅵ）吸收的米氏常數(shù)較對照略小，表明在此條件下，李氏禾根系吸收位點(diǎn)與Cr（Ⅵ）的親和力略微提高。

2.2 H2PO4-與Cr（Ⅵ）的競爭吸收

為了研究磷與李氏禾吸收Cr（Ⅵ）之間的關(guān)系，本試驗(yàn)在5 mmol/L H2PO4-和H2PO4-缺失的條件下考察李氏禾根系中的鉻含量。由圖3可見，鉻吸收率隨Cr（Ⅵ）濃度增加而增加;在本試驗(yàn)范圍內(nèi)的任何Cr（Ⅵ）濃度處理中，5 mmol/L H2PO4-培養(yǎng)條件下的鉻吸收速率均高于對照，且在缺磷培養(yǎng)條件下的鉻吸收速率均低于對照。當(dāng)營養(yǎng)液中Cr（Ⅵ）濃度為100 μmol/L時，5 mmol/L H2PO4-培養(yǎng)條件下的鉻吸收速率比對照提高了23.9%，而缺磷培養(yǎng)條件下的鉻吸收速率比對照減少了14.4%。由上述分析得出，H2PO4-有利于李氏禾對Cr（Ⅵ）的吸收。

將5 mmol/L H2PO4-、對照和缺磷培養(yǎng)條件下李氏禾根系對Cr（Ⅵ）的吸收用Michaelis-Menten方程進(jìn)行擬合（圖4）。由表2可以看出，用5 mmol/L H2PO4-培養(yǎng)的李氏禾根系對Cr（Ⅵ）的最大吸收速率（vmax）較對照提高了17.5%，但米氏常數(shù)（Km）較對照明顯降低了17.0%，表明在此條件下，李氏禾根系吸收位點(diǎn)與Cr（Ⅵ）的親和力增加。缺磷條件培養(yǎng)的李氏禾根系對Cr（Ⅵ）的最大吸收速率（vmax）較對照有所降低，其米氏常數(shù)（Km）與對照接近，表明缺磷對李氏禾吸收Cr（Ⅵ）存在非競爭性抑制作用。

2.3 SO42-與Cr（Ⅵ）的競爭吸收

在5 mmol/L SO42-和SO42-缺失的條件下，考察硫?qū)钍虾涛誄r（Ⅵ）的影響。由圖5可見，鉻吸收素速率隨著Cr（Ⅵ）濃度增加而提高。在本試驗(yàn)的Cr（Ⅵ）濃度范圍內(nèi)，缺硫條件培養(yǎng)的李氏禾對鉻的吸收速率均高于對照，5 mmol/L SO42-條件下培養(yǎng)的李氏禾對鉻的吸收速率均低于對照。當(dāng)營養(yǎng)液中Cr（Ⅵ）濃度為20 μmol/L時，缺硫條件培養(yǎng)的李氏禾對Cr（Ⅵ）的吸收速率較對照提高了29.8%，而5 mmol/L SO42-條件下培養(yǎng)的李氏禾對鉻的吸收速率比對照減少了18.8%。

將缺硫、5 mmol/L SO42-和對照培養(yǎng)條件下李氏禾根系對Cr（Ⅵ）的吸收用Michaelis-Menten方程進(jìn)行擬合（圖6）。由表3可以看出，5 mmol/L SO42-條件培養(yǎng)的李氏禾對 Cr（Ⅵ） 的最大吸收速率（vmax）與對照相近，但米氏常數(shù)（Km）較對照提高了27.7%。這表明添加SO42-對李氏禾吸收 Cr（Ⅵ） 存在競爭性抑制。在缺硫培養(yǎng)條件下，李氏禾根系對Cr（Ⅵ）吸收的米氏常數(shù)較對照減少了26.8%，表明在此條件下， 李氏禾的根系吸收位點(diǎn)與Cr（Ⅵ）的親和力增加， 即缺硫促進(jìn)了李氏禾根細(xì)胞對Cr（Ⅵ）的吸收。

2.4 缺N/S/P培養(yǎng)對根系分泌物活化難溶性鉻的影響

為了進(jìn)一步驗(yàn)證李氏禾吸收Cr（Ⅵ）與非金屬營養(yǎng)元素氮、硫和磷之間的競爭關(guān)系，取缺氮、缺硫和缺磷培養(yǎng)條件下的李氏禾根系分泌物，對難溶性鉻進(jìn)行活化試驗(yàn)，并與全素培養(yǎng)條件下的李氏禾根系分泌物對難溶性鉻的活化效果進(jìn)行對比。由圖7可以看出，與全素培養(yǎng)的李氏禾根系分泌物相比，缺氮、缺硫條件培養(yǎng)的根系分泌物對Cr2O3的活化量雖略微增加，但并無顯著差異（P<0.05），而缺磷條件培養(yǎng)的根系分泌物對Cr2O3的活化量顯著降低，較全素條件培養(yǎng)的根系分泌物活化量減少了29.8%。缺氮和缺硫條件培養(yǎng)的根系分泌物對PbCrO4的活化量與全素條件培養(yǎng)的根系分泌物相比的顯增加，而缺磷條件培養(yǎng)的根系分泌物對PbCrO4的活化量僅為全素條件培養(yǎng)的根系分泌物活化量的43.4%。在不同培養(yǎng)條件下，根系分泌物對于鉻污染土壤中鉻的活化量也存在顯著差異。缺氮和缺硫條件培養(yǎng)的根系分泌物比全素條件培養(yǎng)的根系分泌物活化效果明顯增加，而缺磷條件培養(yǎng)的根系分泌物校全素條件培養(yǎng)的根系分泌物的活化效果顯著降低。

3 討論與結(jié)論

土壤中存在的各種螯合劑及活性功能團(tuán)可與重金屬競爭吸附位點(diǎn)，從而影響重金屬的生物有效性[13]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，NO3-與Cr（Ⅵ）競爭李氏禾根部相同的吸收位點(diǎn)，缺氮有利于李氏禾對Cr（Ⅵ）的吸收。據(jù)報道，森林生態(tài)系統(tǒng)中的植物對Pb的吸收會因?yàn)镹O3-的存在而受到明顯抑制，從而減少Pb對植物的毒害作用[14]。還有研究表明，氮可以影響玉米根系對鉻的吸收，且兩者呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，即當(dāng)?shù)吭黾訒r，玉米根系中的鉻含量不斷下降[15]，這說明氮的存在可能會抑制玉米根系對鉻的吸收。以上結(jié)論都與本試驗(yàn)的結(jié)果一致。當(dāng)植物吸收NO3-時，會促使根系分泌OH-或HCO3-，使根際環(huán)境pH值升高，造成根際土壤堿化，從而降低土壤中的重金屬溶解度，減少根系對重金屬的吸收[2]。這有可能是NO3-抑制李氏禾吸收Cr（Ⅵ）的原因。

由于磷自身形態(tài)的復(fù)雜性，使得關(guān)于磷影響植物對土壤中重金屬吸收的研究存在爭議。關(guān)于磷影響植物對重金屬吸收的報道也有不同結(jié)論。本試驗(yàn)結(jié)果表明，H2PO4-有利于李氏禾對Cr（Ⅵ）的吸收。這與一些學(xué)者的研究結(jié)論一致。如Singh的試驗(yàn)結(jié)果表明，在含鎘土壤中加入過量的磷，可以促進(jìn)油菜和燕麥對鎘的吸收[16]。黃化剛等通過盆栽試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)高濃度的磷有助于東南景天對鎘、鋅的積累[17]。陳同斌等的研究發(fā)現(xiàn)，添加大量磷（含量為400 mg/kg以上）會使超富集植物蜈蚣草地上部、地下部的含砷量明顯升高，磷過量對蜈蚣草富集砷具有明顯的促進(jìn)作用[18]。其原因有可能是磷的加入降低了土壤pH值，從而提高了土壤重金屬的有效性[19]。此外，也有研究認(rèn)為，磷對植物吸收重金屬存在抑制作用。劉世亮等研究發(fā)現(xiàn)，磷抑制了油麥菜對鎘的吸收[20]，這與本研究結(jié)論相反。由此可見，添加磷對植物吸收重金屬的影響與植物品種、重金屬種類以及磷化合物組成的不同有密切關(guān)系。

硫不僅是植物必需的營養(yǎng)元素，也對植物重金屬吸收調(diào)控具有重要影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，缺硫促進(jìn)了李氏禾根細(xì)胞對Cr（Ⅵ）的吸收，添加SO42-對李氏禾吸收Cr（Ⅵ）存在競爭性抑制。這與前人的研究結(jié)論一致。如Hu等研究了SO42-對水稻吸收砷的影響，發(fā)現(xiàn)隨著硫施加量的增加，水稻地上部分的砷累積量減少[21]。Fan等研究發(fā)現(xiàn)，施加過量硫能顯著降低水稻糙米中鎘的累積量[22]。Shewry等認(rèn)為，硫酸根離子對大麥幼苗吸收Cr（Ⅵ）起到抑制作用[23]。其原因有可能是因?yàn)镾O42-常被還原成S2-，并與土壤中其他金屬離子如Hg2+、Cu2+、Cd2+等形成金屬硫化物沉淀，從而降低金屬的移動性[24]。

根分泌現(xiàn)象是植物根系為適應(yīng)環(huán)境變化而作出的反應(yīng)[25]，植物的根分泌活動會受到一些因素（如本身基因型、生長環(huán)境等）的影響，其活動過程十分復(fù)雜。上述試驗(yàn)結(jié)果充分證明，李氏禾在不同營養(yǎng)條件（缺氮、缺硫或缺磷）下，其根系分泌物具有一定的特異性，其對特定物質(zhì)的活化能力也有所不同。McGrath等通過根袋試驗(yàn)證明，超富集植物天藍(lán)遏藍(lán)菜（Thlaspi caerulescens）能夠?qū)⑼寥乐须y溶態(tài)的鋅轉(zhuǎn)化為可溶態(tài)鋅，從而有利于植物對鋅的吸收[26]。本試驗(yàn)表明，在缺氮條件下，李氏禾根系分泌物能有效活化土壤中的鉻，使其活性提高，這與樓玉蘭等認(rèn)為的施用硝態(tài)氮會促使根系分泌OH-或HCO3-，從降低土壤重金屬活性的研究結(jié)論[2]相符。在缺氮、缺硫培養(yǎng)條件下，李氏禾根系分泌物通過活化土壤中的難溶性鉻，促進(jìn)植物對鉻的吸收，與本研究中缺氮、缺硫條件有利于李氏禾根系對Cr（Ⅵ）吸收的試驗(yàn)結(jié)果一致，與全素培養(yǎng)條件相比，缺磷培養(yǎng)條件下的根系分泌物不利于土壤中難溶性鉻的溶出，因此不利于李氏禾根系對鉻的吸收，與本研究中缺磷對李氏禾吸收Cr（Ⅵ）存在非競爭性抑制作用的結(jié)論一致，也與趙晶等認(rèn)為的磷的加入降低了土壤pH值，提高了土壤重金屬有效性的研究結(jié)論[19]相符。

綜上所述，缺氮、缺硫有利于李氏禾對Cr（Ⅵ）的吸收，缺磷不利于李氏禾對Cr（Ⅵ）的吸收，適當(dāng)添加H2PO4-有利于李氏禾對Cr（Ⅵ）的吸收。在后續(xù)工作中有必要進(jìn)一步研究添加不同濃度的磷對李氏禾吸收Cr（Ⅵ）的影響，以確定H2PO4-的最佳施用量。試驗(yàn)結(jié)果對促進(jìn)鉻超富集植物李氏禾對污染土壤中Cr（Ⅵ）的吸收，從而進(jìn)一步提高鉻污染土壤的植物修復(fù)效率和完善植物修復(fù)技術(shù)有著重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。

參考文獻(xiàn)：

[1]Zhang X H，Liu J，Huang H T，et al. Chromium accumulation by the hyperaccumulator plant Leersia hexandra Swartz[J]. Chemosphere，2007，67（6）：1138-1143.

[2]樓玉蘭，章永松，林咸永. 氮肥形態(tài)對污泥農(nóng)用土壤中重金屬活性及玉米對其吸收的影響[J]. 浙江大學(xué)學(xué)報（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版），2005，31（4）：392-398.

[3]郭光光. 氮磷施用對蓖麻吸收，轉(zhuǎn)運(yùn)銅的影響及機(jī)制[D]. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017：52.

[4]López-Bucio J S，Dubrovsky J G，Raya-González J，et al. Arabidopsis thaliana mitogen-activated protein kinase 6 is involved in seed formation and modulation of primary and lateral root development[J]. Journal of Experimental Botany，2014，65（1）：169-183.

[5]Shi J Y，Lin H R，Yuan X F，et al. Enhancement of copper availability and microbial community changes in rice rhizospheres affected by sulfur[J]. Molecules，2011，16（2）：1409-1417.

[6]Zhong L，Hu C，Tan Q，et al. Effects of sulfur application on sulfur and arsenic absorption by rapeseed in arsenic-contaminated soil[J]. Plant Soil and Environment，2011，57（9）：429-434.

[7]Marchiol L，F(xiàn)ellet G，Perosa D，et al. Removal of trace metals by Sorghum bicolor and Helianthus annus in a site polluted by industrial wastes：a field experience[J]. Plant Physiology and Biochemistry，2007，45（5）：379-387.

[8]中華人民共和國國家環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn). 土壤 總鉻的測定 火焰原子吸收分光光度法：HJ 491—2009[S]. 北京：中國環(huán)境科學(xué)出版社，2009.

[9]Leita L，Contin M，Maggioni A. Distribution of cadmium and induced Cd-bingding proteins in roots，stems and leaves of Phaseolus vulgaris[J]. Plant Science，1991，77（2）：139-147.

[10]de Oliveira L M，Ma L Q，Santos J A G，et al. Effects of arsenate，chromate，and sulfate on arsenic and chromium uptake and translocation by arsenic hyperaccumulator Pteris vittata L.[J]. Environmental Pollution，2014，184：187-192.

[11]張玉鳳，馮 固，李曉林. 叢枝菌根真菌對三葉草根系分泌的有機(jī)酸組分和含量的影響[J]. 生態(tài)學(xué)報，2003，23（1）：30-37.

[12]Pinto A P，Simoes I，Mota A M. Cadmium impact on root exudates of sorghum and maize plants：a speciation study[J]. Journal of Plant Nutrition，2008，31（10）：1746-1755.

[13]Karlsson T，Skyllberg U. Complexation of zinc in organic soils EXAFS evidence for sulfur associations[J]. Environmental Science & Technology，2007，41（1）：119-124.

[14]Burzyński M. The uptake and accumulation of phosphorous and nitrates and the activity of nitrate reductase in cucumber seedlings treated with PbCl2 or CdCl2[J]. Acta Societatis Botanicorum Poloniae，1988，57（3）：349-359.

[15]李國軍. 大量營養(yǎng)元素對玉米苗期鉻吸收及生理特性的影響研究[D]. 太原：山西大學(xué)，2010：15.

[16]Singh B R. Cadmium and fluoride uptake by oats and rape from phosphorus fertilizers in two different soils[J]. Norwegian J Agric Sci，1990，4：239-250.

[17]黃化剛，李廷強(qiáng)，朱治強(qiáng)，等. 可溶性磷肥對重金屬復(fù)合污染土壤東南景天提取鋅/鎘及其養(yǎng)分積累的影響[J]. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報，2012，18（2）：382-389.

[18]陳同斌，范稚蓮，雷 梅，等. 磷對超富集植物蜈蚣草吸收砷的影響及其科學(xué)意義[J]. 科學(xué)通報，2002，47（15）：1156-1159.

[19]趙 晶，馮文強(qiáng)，秦魚生，等. 不同氮磷鉀肥對土壤pH和鎘有效性的影響[J]. 土壤學(xué)報，2010，47（5）：953-961.

[20]劉世亮，劉忠珍，介曉磊，等. 施磷肥對Cd污染土壤中油麥菜生長及吸收重金屬的影響[J]. 河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2005，39（1）：30-34.

[21]Hu Z Y，Zhu Y G，Li M，et al. Sulfur （S）-induced enhancement of iron plaque formation in the rhizosphere reduces arsenic accumulation in rice （Oryza sativa L.） seedlings[J]. Environmental Pollution，2007，147（2）：387-393.

[22]Fan J L，Hu Z Y，Ziadi N，et al. Excessive sulfur supply reduces cadmium accumulation in brown rice （Oryza sativa L.）[J]. Environmental Pollution，2010，158（2）：409-415.

[23]Shewry P R，Peterson P J. The uptake and transport of chromium by barley seedlings （Hordeum vulgare L.）[J]. Journal of Experimental Botany，1974，25（87）：785-797.

[24]孫麗娟，段德超，彭 程，等. 硫?qū)ν寥乐亟饘傩螒B(tài)轉(zhuǎn)化及植物有效性的影響研究進(jìn)展[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報，2014，25（7）：2141-2148.

[25]涂書新，孫錦荷，郭智芬，等. 植物根系分泌物與根際營養(yǎng)關(guān)系評述[J]. 土壤與環(huán)境，2000，9（1）：64-67.

[26]McGrath S P，Shen Z G，Zhao F J. Heavy metal uptake and chemical changes in the rhizosphere of Thlaspi caerulescens and Thlaspi ochraleucm grown in contaminated soils[J]. Plant and Soil，1997，188（1）：153-159.