摘 要:對(duì)22株白靈芝進(jìn)行菌絲體生長(zhǎng)速率對(duì)比實(shí)驗(yàn),觀察各菌絲體性狀,結(jié)果表明其中有8株菌種生長(zhǎng)勢(shì)較好;后通過(guò)拮抗實(shí)驗(yàn)初步確定1605和2009003、2011001三株優(yōu)良菌株。
關(guān)鍵詞:白靈芝;生長(zhǎng)速率;拮抗
靈芝,屬于擔(dān)子菌綱,多孔菌目,多孔菌科靈芝亞科,靈芝屬。靈芝是傳統(tǒng)的名貴菌類中的藥材?,F(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)研究證明,靈芝的主要有效成分是靈芝多糖和三萜類物質(zhì)。靈芝多糖可以提高機(jī)體免疫力,消除體內(nèi)超氧自由基,抗腫瘤、抗衰老,提高肝臟的解毒功能等功效,對(duì)于心血管疾病、糖尿病、慢性支氣管炎、慢性肝炎、神經(jīng)衰弱等疾病也有一定的療效。由于菌種傳代培養(yǎng)次數(shù)多,造成菌株退化,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)選育不同區(qū)域同一種白肉靈芝菌種進(jìn)行培養(yǎng)篩選出優(yōu)良性能的菌株。
一、材料與方法
1.實(shí)驗(yàn)材料
供試靈芝,由林芝米林縣、曲水縣及拉薩食用菌綜合試驗(yàn)站提供。
供試培養(yǎng)基:PDA培養(yǎng)基
2.實(shí)驗(yàn)方法
(1)優(yōu)質(zhì)菌絲體的篩選。將22株白肉靈芝菌絲體分別轉(zhuǎn)入新的PDA平板培養(yǎng)基上培養(yǎng),置于25℃恒溫箱培養(yǎng)。觀察并記錄菌絲體定植天數(shù)、菌絲長(zhǎng)速及濃密度。
菌絲生長(zhǎng)速率={(菌落直接-接種點(diǎn)直徑)/2}/d
(2) 靈芝菌株拮抗實(shí)驗(yàn)。對(duì)1.2.1選出的優(yōu)良菌株分別進(jìn)行拮抗實(shí)驗(yàn),觀察記錄菌絲體的定植天數(shù)、菌絲長(zhǎng)速及菌絲密度判斷是否發(fā)生特異性變化。
二、結(jié)果與分析
1.優(yōu)質(zhì)靈芝菌絲體的篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果
通過(guò)靈芝菌絲體的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)中定值天數(shù)、菌絲生長(zhǎng)速率及菌絲濃密度觀察,從結(jié)果可以得到其中1605、2011001、2009003三個(gè)菌株的生長(zhǎng)速率都達(dá)到0.26cm*d-1 ;靈芝菌株1605、1804、1806、2011001、2009003、聶8.11、米1、米2等8株靈芝菌株不管是生長(zhǎng)速率還是菌絲濃密度都較好,故選擇該8株作為待試菌株。
2.拮抗實(shí)驗(yàn)結(jié)果
從上圖可以清楚的看出,1804和1806屬于同一種菌株,其他菌株都有著明顯的拮抗反應(yīng)。其中1605和2009003、2011001在拮抗實(shí)驗(yàn)中生長(zhǎng)良好,故選取這三種作為優(yōu)良菌株,以待進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。
三、結(jié)語(yǔ)
進(jìn)行菌株篩選實(shí)驗(yàn)中,可以分別從定值時(shí)間、生長(zhǎng)速率及菌絲濃密度來(lái)判斷供試菌株是否屬于優(yōu)良菌株,其中,實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基條件、培養(yǎng)條件都必須保持一致,多設(shè)立對(duì)照組減少誤差。拮抗實(shí)驗(yàn)不僅可以從宏觀上判斷菌株是否屬于同一品種,而且直觀地看出菌株生長(zhǎng)勢(shì)是否良好。
參考文獻(xiàn):
[1]李宇偉,連瑞麗,李利紅,劉永錄.靈芝液體深層發(fā)酵菌株篩選與培養(yǎng)基優(yōu)化的研究[J].廣東發(fā)農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,6:52-54.
[2]張先鋒,鄭聯(lián)壽,王世宏,等.靈芝栽培技術(shù)[J].北方 中藥材開發(fā)技術(shù),2008 (11):7-9.
[3]陳艷秋,張立秋,郭曉帆.樺褐孔菌人工馴化栽培[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2006,34(3):9—10.
[4]邵力平,沈瑞祥,張素軒,等.真菌分類學(xué)[M].北京:中國(guó)林業(yè)出版社,1984:224—227.
[5]朱華玲,班立桐,徐曉萍,等.食用菌發(fā)酵的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012,24(4):80—83.
[6]賀新生,王茂,歐文婧,等.樹舌白靈芝菌絲體發(fā)酵工藝條件試驗(yàn)[J].食品科學(xué),2008,29(3):289—291.
通訊作者簡(jiǎn)介:高磊(1987-06-)男,甘肅靖遠(yuǎn),碩士,微生物學(xué)專業(yè),就職于西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院蔬菜研究所,主研究方向?yàn)槭秤镁?/p>
項(xiàng)目:1.西藏白肉靈芝菌種液體發(fā)酵條件優(yōu)化研究;3.國(guó)家食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系拉薩綜合試驗(yàn)站;3.科技富民穩(wěn)邊專項(xiàng)-西藏特色食用菌高效栽培技術(shù)示范課題