原發(fā)性血小板增多癥對血小板功能和血栓形成的影響及奧扎格雷鈉預(yù)防血栓的臨床效果

李嵐 高瑛 張維華 侯麗敏 高秋英

[摘要] 目的 研究原發(fā)性血小板增多癥（ET）患者血小板功能的變化和對血栓形成的影響，分析奧扎格雷鈉對血栓的預(yù)防作用。 方法 選擇2014年9月～2017年9月陜西省人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）收治的32例ET患者為研究對象，按隨機數(shù)字表法分為兩組，每組各16例。常規(guī)組采用常規(guī)治療患者作為常規(guī)組，研究組患者在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上給予奧扎格雷鈉治療。另選取20名同期來我院進行健康體檢的健康志愿者作為對照組。觀察三組對象P選擇素（CD62P）、抗纖維蛋白原受體單抗（PAC-1）、血栓素（TXB2）、6-酮-前列腺素1α（6-keto-PGF1α）水平以及血栓形成情況。 結(jié)果 治療前常規(guī)組和研究組CD62P、PAC-1、TXB2及6-keto-PGF1α水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），但均明顯高于對照組（P < 0.05）。治療后研究組CD62P、PAC-1、TXB2及6-keto-PGF1α水平明顯低于常規(guī)組，但仍然高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。常規(guī)組、研究組治療后CD62P、PAC-1、TXB2以及6-keto-PGF1α水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。研究組血栓形成率僅為6.25%，明顯低于對照組的18.75%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論 ET患者血小板功能及活性等指標明顯異于健康人群，且血栓發(fā)生率明顯升高。奧扎格雷鈉可明顯改善ET患者血小板情況，促進治療效果，降低血栓發(fā)生率，值得臨床應(yīng)用及推廣。

[關(guān)鍵詞] 原發(fā)性血小板增多癥;血小板;血栓;奧扎格雷鈉

[中圖分類號] R558.3? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2019）07（b）-0145-04

Effects of primary thrombocytosis on platelet function and thrombus formation and the clinical effect of Sodium Ozagrel in preventing thrombus

LI Lan? ?GAO Ying? ?ZHANG Weihua? ?HOU Limin? ?GAO Qiuying

Department of Hematology， Shaanxi Provincial People′s Hospital， Shaanxi Province， Xi′an? ?710068， China

[Abstract] Objective To study the changes of platelet function and its effect on thrombosis in patients with essential thrombocytosis （ET）， and to analyze the effect of Sodium Ozagrel on thrombosis prevention. Methods Thirty-two patients with ET admitted to Shaanxi Provincial People′s Hospital （"our hospital" for short） from September 2014 to September 2017 were enrolled as the study object， and they were divided into two groups by random number table， 16 cases in each group. Patients in routine group were treated with routine therapy， while patients in study group were treated with Ozagrel Sodium on the basis of routine treatment. Another 20 healthy volunteers who received physical examination in our hospital during the same period were selected as control group. The levels of P-selectin （CD62P）， anti-fibrinogen receptor monoclonal antibody （PAC-1）， thromboxane B2 （TXB2）， 6-keto-prostaglandin F1α （6-keto-PGF1α） and thrombosis rate of three groups were observed. Results Before treatment， there were no differences in levels of CD62P， PAC-1， TXB2 and 6-keto-PGF1α between the routine group and study group （P > 0.05）， but they were significantly higher than those of the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. After treatment， the levels of CD62P， PAC-1， TXB2 and 6-keto-PGF1α in the study group were significantly lower than those in the routine group， but still higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P < 0.05）. The thrombosis rate in the study group was only 6.25%， which was significantly lower than 18.75% in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. Conclusion The indexes of platelet function and activity in ET patients are significantly different from those in healthy person， and the incidence of thrombosis is significantly increased. Sodium Ozagrel can significantly improve the platelet status of ET patients， promote the therapeutic effect and reduce the incidence of thrombosis， which is worthy of clinical application and promotion.

[Key words] Thrombocythemia major; Platelet; Thrombus; Sodium Ozagrel

原發(fā)性血小板增多癥（essential thrombocytosis，ET）是骨髓增殖性疾病，具體發(fā)病機制尚不明確，多數(shù)研究認為與JAK-2基因V617突變有關(guān)[1-2]。臨床上ET發(fā)病隱匿，進展緩慢，患者早期無任何臨床癥狀，僅在發(fā)生血栓或血細胞計數(shù)明顯升高時被發(fā)現(xiàn)[3]。臨床表現(xiàn)為反復(fù)血栓，多見于四肢血栓，嚴重者甚至引起心、腦、肺、腎等重要器官血栓，導(dǎo)致血小板計數(shù)明顯升高，功能異常[4-5]。目前，臨床上對ET患者血小板的功能關(guān)注較少，因此在對ET患者治療時往往忽視血栓的形成和預(yù)防。但在目前數(shù)據(jù)中統(tǒng)計顯示[6]，血栓是ET患者最常見的并發(fā)癥之一，除了血小板計數(shù)明顯升高以外，血小板的功能也明顯發(fā)生改變[7]。因此，觀察ET患者血小板功能的變化以及如何預(yù)防ET患者的血栓形成是臨床研究的熱點。本文通過對陜西省人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）收治的ET患者進行研究，分析患者P選擇素（CD62P）、抗纖維蛋白原受體單抗（PAC-1）、血栓素（TXB2）以及6-酮-前列腺素1α（6-keto-PGF1α）水平，觀察ET患者血小板功能變化情況，分析血栓的預(yù)防措施，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年9月～2017年9月我院收治的32例ET患者為研究對象，納入標準：①符合ET診斷標準[8];②年齡30～80歲;③自愿參加本次研究。排除標準：①心肺功能、腎功能不全;②對本研究用藥過敏的患者;③存在其他嚴重疾病對研究造成影響的患者。按隨機數(shù)字表法將32例ET患者分為兩組，每組各16例。其中，常規(guī)組中男9例，女7例;年齡38～75歲，平均（56.8±4.4）歲。研究組中男8例，女8例;年齡35～76歲，平均（56.4±4.5）歲。另納入20名同期來我院行健康體檢的健康志愿者作為對照組，其中男10名，女10名;年齡34～79歲，平均（56.9±4.5）歲。三組對象性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準通過，所有研究對象均自愿參加本次研究。

1.2 治療方法

常規(guī)組患者給予常規(guī)治療，給予羥基脲（齊魯制藥有限公司，規(guī)格：0.5 g/片，產(chǎn)品批號：20140909）、干擾素[商品名：干復(fù)津，日本安斯泰來制藥株式會社，規(guī)格：9 μg/（0.3 mL·支），注冊證號S20020002，產(chǎn)品批號：20140820]，以及阿司匹林（上海信誼百路達藥業(yè)有限公司，規(guī)格：25 mg/片，產(chǎn)品批號：20141209）治療。研究組在常規(guī)組基礎(chǔ)上加用奧扎格雷鈉（山東華魯制藥有限公司，規(guī)格：100 mL/瓶，產(chǎn)品批號：20141024），160 mg加入生理鹽水靜脈滴注，1次/d。兩組患者均連續(xù)治療2周。

1.3觀察指標

觀察三組CD62P、PAC-1、TXB2以及6-keto-PGF1α水平以及血栓形成率情況。

1.3.1 試劑與儀器? 由美國BD公司生產(chǎn)的流式細胞儀，美國BD公司提供的異硫氰酸熒光素（FITC）標記的單克隆抗體PAC-1 FITC和藻紅蛋白（PE）標記的單克隆抗體CD62P-PE。

1.3.2 標本采集及檢測方法? 采集三組對象空腹晨靜脈血3 mL，將樣本注入抗凝管中搖勻，另準備2支流式試管，一支裝入10 μL FITC標記的單克隆抗體PAC-1 FITC，另一支裝入10 μL藻紅蛋白（PE）標記的單克隆抗體CD62P-PE。分別于2支試管中注入標本10 μL，搖勻后置入室溫暗處反應(yīng)15 min，再加入1 mL PBS懸浮，采用流式細胞儀檢測CD62P和PAC-1水平。再次采集三組對象空腹晨靜脈血3 mL，將血液樣本置入含有消炎痛-EDTA-二鈉40 μL的試管中，混勻后離心機旋轉(zhuǎn)離心，離心半徑100 mm，離心溫度2～8℃，3000 r/min離心15 min后分離血漿，采用放射免疫法測定TXB2以及6-keto-PGF1α水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用SNK-q檢驗;計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組對象各項指標比較

治療前兩組患者CD62P、PAC-1、TXB2及6-keto-PGF1α水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05）;但均明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。治療后研究組上述指標水平明顯低于常規(guī)組，但仍然高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。常規(guī)組、研究組治療后CD62P、PAC-1、TXB2以及6-keto-PGF1α水平均低于治療前，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。見表1。

2.2 兩組患者血栓形成率比較

研究組血栓形成率僅為6.25%（1例），明顯低于對照組的18.75%（3例），差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=7.143，P < 0.05）。

3 討論

血小板是人體血液中重要的成分之一，健康正常人的血液中血小板基本處于靜息狀態(tài)，但在生理或病理血栓狀態(tài)下，受到各種因素的影響，血液中的血小板受到各種因素影響從而發(fā)生不可逆性活化，則會導(dǎo)致血小板與纖維蛋白原聚集，引起動脈血栓，導(dǎo)致血管閉塞，最終使患者發(fā)生血栓[9-10]。

目前ET患者出現(xiàn)血栓的具體機制尚未完全明確，但人們認為與血小板功能及數(shù)量的異常有明顯關(guān)系[11]。本文對我院ET患者血小板的功能變化進行研究，觀察較為穩(wěn)定的TXB2和6-keto-PGF1α水平，以評估TXA2和前列環(huán)素（PGI2）水平。結(jié)果顯示，治療后研究組CD62P、PAC-1、TXB2以及6-keto-PGF1α水平明顯低于常規(guī)組，但與對照組仍然略有差距。而研究組血栓形成率僅為6.25%，明顯低于常規(guī)組的18.75%，提示ET患者血小板功能較常人發(fā)生變化，且血栓形成率明顯升高，但經(jīng)過奧扎格雷鈉治療后，可有效改善血小板功能，減少血栓的形成，達到較好效果。CD62P是血小板膜上的一種糖蛋白，成為血小板活化依賴性顆粒性膜蛋白，位于血小板α顆粒及內(nèi)皮細胞的Weibel-Palade小體中，在內(nèi)皮細胞或血小板活化時，CD62P則有α顆粒上轉(zhuǎn)至血小板膜表面，因此CD62P成為活化血小板的標志物之一[12-13]。PAC-1是早期活化血小板的標志物之一，由GPⅡb/Ⅲa復(fù)合而成，是血小板活化的靈敏指標，常被臨床用于血栓疾病的檢測和評估[14]。TXA2主要由白細胞和血小板分泌而成，是血小板中花生四烯酸的主要代謝產(chǎn)物，具有強烈收縮血管的作用，促進血小板聚集作用[15]。PGI2則是由血管內(nèi)皮細胞分泌，是一種強烈的血管擴張因子和血小板聚集抑制劑[16]。在健康人體內(nèi)，TXA2和PGI2處于平衡狀態(tài)，當TXA2和PGI2平衡失調(diào)時，則會導(dǎo)致血管痙攣，血栓形成[17]。但TXA2和PGI2在體內(nèi)極其不穩(wěn)定，不易檢測[18]。TXA2經(jīng)過30 s后代謝為穩(wěn)定的TXB2，PGI2經(jīng)過3 min后則會代謝為較為穩(wěn)定的6-keto-PGF1α[19]。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)[20]，TXA2與PGI2在凝血功能中起著重要作用，而PT患者的TXA2與PGI2指標均高于正常人群，因此具有發(fā)生血栓的潛在風(fēng)險。

綜上所述，ET患者血小板功能及活性等指標明顯異于健康人群，且血栓發(fā)生率明顯升高。奧扎格雷鈉可明顯改善ET患者血小板情況，促進治療效果，降低血栓發(fā)生率，值得臨床應(yīng)用及推廣。

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