河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院（471000）姬國棟 閆俊強 李丹丹 杜莉莉

缺血性腦卒中是一種破壞性極強的疾病，為世界三大主要死亡疾病之一[1]。卒中后的外周免疫抑制被發(fā)現(xiàn)，腦梗死后的肺部感染發(fā)病率為26%，肺部感染的發(fā)生、病程發(fā)展及干預(yù)措施可直接影響腦梗塞患者的預(yù)后，更加強調(diào)了降低卒中后感染發(fā)生率的重要性[2]。T淋巴細胞作為重要的免疫細胞，已有多數(shù)研究證實急性缺血性腦卒中對T淋巴細胞的數(shù)量與免疫能力產(chǎn)生相應(yīng)影響。此次旨在分析不同部位腦梗死與外周血T淋巴細胞亞群數(shù)量的相關(guān)性，為腦梗死的臨床評估與治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對象 隨機選取2017年1月1日～2018年5月1日在河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性腦梗死患者82例作為實驗組，我院體檢人員20人作為對照組。

1.2 分組情況 梗死體積(cm3)=長×寬×MRI掃描陽性層數(shù)層面×3.14/6，梗死體積≤5cm3分入小梗死體積組、梗死體積為5～15cm3分入中梗死體積組、梗死體積＞15cm3分入大梗死體積組。

根據(jù)影像學(xué)結(jié)果實驗組分為：大梗死體積組22人，中梗死體積組34人，小梗死體積組26人。

丘腦梗死12人，基底節(jié)區(qū)梗死40人、小腦梗死4人、腦葉梗死23人（額葉5人，顳葉11人，枕葉4人，頂葉3人）、腦干梗死3人。

1.3 主要儀器及試劑 1.5T磁共振成像儀（Signa Twinspeed），美國通用電氣（GE）公司。流式細胞儀器BD FACSealibur流式細胞分析儀，美國碧迪醫(yī)療器械。異硫氨酸熒光素（FITC）、藻紅蛋白（PE），美國碧迪醫(yī)療器械。

1.4 檢測方法 入院取隔天早晨空腹狀態(tài)下外周靜脈血5ml，置于EDTA-K2的抗凝管中，分別取100μl抗凝外周血加入A試管（用20μl異硫氨酸熒光素標記CD4抗體）、B試管（用20μl藻紅蛋白標記CD8抗體），A、B試管均充分混合后室溫下避光孵育20分鐘，后加入紅細胞裂解液2ml，避光5分鐘后1500r/min離心5分鐘，分別加入PBS緩沖液0.5ml，放入流式細胞儀檢測。

1.5 觀察指標 比較各組T淋巴細胞亞群的檢測結(jié)果（CD4+、CD8+T淋巴細胞亞群細胞計數(shù)及CD4+/CD8+比值）。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料進行χ2檢驗，計量資料進行正態(tài)檢驗及方差齊性檢驗，符合正態(tài)分布采用單因素方差分析，檢驗方差齊者應(yīng)用SNK-q檢驗，檢驗方差不齊者應(yīng)用Dunnett，s T3檢驗。不符合正態(tài)分布采用非參數(shù)檢驗Kruskal-Wallis檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 性別與年齡 實驗組中男4 4人，女3 8人，年齡4 2～8 6歲，平均年齡（65.22±10.2）歲。對照組中男10人，女1 0人，年齡4 9～7 8歲，平均年齡（64.70±8.1）歲。實驗組與對照組性別、年齡比較無明顯差異性（P>0.05），具有可比性。

2.2 大梗死體積組、中梗死體積組、小梗死體積組分別與對照組比較 CD4+T淋巴細胞數(shù)量明顯降低，CD8+T淋巴細胞數(shù)量明顯升高，CD4+/CD8+T值明顯降低較小，均有統(tǒng)計學(xué)意義，P＜0.05。兩兩組間比較，大梗死體積組與中等梗死體積組、小梗死體積組及對照組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義，隨著梗死體積的增加，CD4減少，CD8增加，CD4+/CD8+減小，如附表1。

2.3 兩兩組間比較，基底節(jié)、腦干與其他部位梗死比較 CD4+T淋巴細胞數(shù)量明顯降低，CD8+T淋巴細胞數(shù)量明顯升高，CD4+/CD8+T值明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.005），如附表2。

附表1 不同梗死體積組的T淋巴亞群比較

附表2 不同梗死位置組的T淋巴亞群比較

3 討論

國內(nèi)外多數(shù)研究已證實了卒中的機體免疫抑制狀態(tài)，T淋巴細胞作為重要的免疫細胞，卒中后表現(xiàn)為總T淋巴細胞數(shù)目下降，各亞群的比例失調(diào)，即CD4+T細胞數(shù)目下降、CD8+T細胞數(shù)目上升。

缺血性腦卒中后的外周免疫抑制，可能是由于神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)的連接，由于腦損傷而產(chǎn)生一系列細胞因子，下丘腦被激活，從而激活HPA軸及腎上腺髓質(zhì)神經(jīng)末梢的分泌。HPA軸是中樞神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的連接通路，下丘腦釋放CRH，促腎上腺皮質(zhì)激素進入腎上腺，誘導(dǎo)糖皮質(zhì)激素的釋放。研究發(fā)現(xiàn)在腦梗塞后，皮質(zhì)醇和腎上腺素水平升高以及相關(guān)的淋巴細胞減少。對腎上腺素受體的刺激能夠抑制CTL，同時糖皮質(zhì)激素作為免疫細胞活化的抑制劑，可以作用于T淋巴細胞，誘導(dǎo)細胞凋亡[3]。

本試驗結(jié)果顯示基底節(jié)、腦干更易引起外周T淋巴細胞亞群中CD4+T淋巴細胞數(shù)量明顯降低，CD8+T淋巴細胞數(shù)量明顯升高，原因可能為解剖上基底節(jié)及腦干較其他組更接近下丘腦，缺血性卒中的刺激更容易激活下丘腦。外周T淋巴細胞亞群的失調(diào)，一方面減少大腦的卒中后免疫細胞浸潤，降低一系列炎性反應(yīng)，保護卒中后神經(jīng)元的恢復(fù)。另一方面，外周的免疫保護能力同時被削弱，增加了卒中后的感染率，如肺炎、尿路感染等，研究發(fā)現(xiàn)卒中后感染與不良預(yù)后呈正相關(guān)[4]。

綜上所述，缺血性腦卒中后引起機體的外周免疫抑制，隨著梗死體積增加，免疫抑制更顯著，基底節(jié)、腦干梗死較其他部位更容易引起外周免疫功能下降，可以認為是大腦的一種自我保護機制，然而提高了自身發(fā)生感染的可能性。通過缺血性腦卒中的部位和梗死體積更早的識別外周免疫系統(tǒng)的抑制程度，提前給予適當?shù)母深A(yù)有積極的臨床意義，最優(yōu)的方式是一種不增加腦損傷，又降低感染率的免疫調(diào)節(jié)方式，從而提高患者的預(yù)后。