肝康靈顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

劉玉

摘 ?要：本實(shí)驗(yàn)對(duì)肝康靈顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。含量測(cè)定方法：采用奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm），乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為236nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃，梔子苷在0.01～1.6mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可作為肝康靈顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

關(guān)鍵詞：肝康靈顆粒;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);研究

梔子為肝康靈顆粒主要成分之一。梔子是茜草科植物梔子的果實(shí)，具有護(hù)肝、利膽、降壓、鎮(zhèn)靜、止血、消腫等作用?！端幮哉摗酚涊d：“殺蟅蟲毒，去熱毒風(fēng)，利五淋，主中惡，通小便，解五種黃病，明目，治時(shí)疾除熱及消渴口干，目赤腫痛?！睏d子具有抗哮喘、抗炎鎮(zhèn)痛、保肝利膽、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化、促進(jìn)韌帶細(xì)胞增殖、促進(jìn)黑色素生成等作用[1-2]。

梔子含有梔子甙（gardenoside）、都桷子素龍膽雙糖甙（genipin-1-gentiobioside）、梔子酮甙（gardo-side）、去乙酰車葉草甙酸甲酯（methyl deacetyl asperulosidate）、綠原酸（chlorogenic acid）、藏紅花酸（cro-cetin）、熊果酸（ursolic acid）、蕓香甙（rutin）、β-谷甾醇（β-sitosterol）等成分。本實(shí)驗(yàn)擬增加肝康靈顆粒中梔子苷含量進(jìn)行測(cè)定。本實(shí)驗(yàn)對(duì)肝康靈顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：OLABO雙排六孔恒溫水浴鍋（濟(jì)南鑫井醫(yī)療器械有限公司）;MS204精密天平（濟(jì)南思卓醫(yī)療器械有限公司）;GI-3000-14四元低壓梯度液相色譜儀（武漢集思儀器設(shè)備有限公司）;721型聯(lián)創(chuàng)儀器可見分光光度計(jì)（南京聯(lián)創(chuàng)分析儀器制造有限公司）;RephiLe Direct-Pure Genie 超純水系統(tǒng)（上海樂楓生物科技有限公司）。

1.2 色譜柱：奧泰公司C18色譜柱（220mm×4.6mm，5μm）。

1.3 對(duì)照品：梔子苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所）。

1.4 試劑：甲醇（山東省陽(yáng)信隆泰化工科技有限公司）、磷酸（山東省陽(yáng)信隆泰化工科技有限公司）、乙腈（山東省陽(yáng)信隆泰化工科技有限公司）、四氫吷喃（山東省陽(yáng)信隆泰化工科技有限公司）。

1.5 試藥：肝康靈顆粒

2 測(cè)定方法確定

2.1 色譜條件

分別考察乙腈-甲醇-水（5：45：50），乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（30∶70∶0.8），乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（20∶80∶0.8）乙腈-甲醇-0.4%冰醋酸溶液（10：18：62），乙腈-甲醇-0.4%磷酸溶液（2：18：80），乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）不同比例的流動(dòng)相，流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）時(shí)分離效果最好，所以采用乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）為本次實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相。依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[5-6]。流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸-四氫吷喃（10∶90∶0.8）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)：236nm，流速：1.0ml·min-1。柱溫：30℃。理論板數(shù)按梔子苷峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取梔子苷對(duì)照品適量，置容量瓶中，加流動(dòng)相制成每1mL含0.1mg的溶液，即得。

2.3 供試品溶液的制備

取肝康靈顆粒適量，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得。

2.4 專屬性試驗(yàn)

取除梔子以外的原料，按樣品制備工藝制成陰性對(duì)照樣品，按上述實(shí)驗(yàn)方法檢測(cè)，結(jié)果陰性試驗(yàn)沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

2.5 精密度試驗(yàn)

取對(duì)照品溶液按上述色譜條件，精密吸取20μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.69%，表明本方法精密度良好。

2.6 對(duì)照品的線性考察

精密稱取適量梔子苷對(duì)照品，加入流動(dòng)相溶液使溶解分別配制成每毫升含0.01、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6毫克的溶液。分別精密上述溶液吸取20μL，注人液相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，梔子苷在0.01～1.6mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.7 重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的肝康靈顆粒樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法制備供試品溶液，測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.68%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.8 回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，共測(cè)定六份樣品。梔子苷回收率99.6%。

2.9 樣品含量測(cè)定

依照上述含量測(cè)定方法，測(cè)定梔子苷凍干粉三批樣品。

4 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)分離效果好、方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確、專屬性好，可用于肝康靈顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。

參考文獻(xiàn)

[1]方尚玲，劉源才，張慶華，林英，陳道玉，李世杰.梔子苷鎮(zhèn)痛和抗炎作用的研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2008（06）.

[2]張文娟，李茂星，張泉龍，邱建國(guó)，尉麗力，賈正平.梔子苷的快速提取分離及其鎮(zhèn)痛抗炎作用研究[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012（21）.

[3]Antioxi-dant activity of Gardenia jasminoides Ellis fruit extracts. Debnath T，Park P J，Deb Nath N C，et al. Food Chemistry，2011.

[4]Effects of Gar-deniae Fructus extract and geniposide on promoting ligament cell proliferation and collagen synthesis. Chen Q C，Zhang W Y，Kim H J，et al. Phytotherapy Research，2010.

[5]吳亞超，楊文靜，張磊，趙萬順，張文生，葉正良.梔子中梔子苷等7個(gè)化學(xué)成分測(cè)定及質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2016（10）.

[6]張留記，劉欽松，屠萬倩，劉怡.RP-HPLC法同時(shí)測(cè)定不同產(chǎn)地梔子中梔子苷、西紅花苷-Ⅰ和西紅花苷-Ⅱ的含量[J].中國(guó)藥房，2011（07）.