邱波, 王艷, 胡建廷

(1. 山東省藥學科學院 山東省化學藥物重點實驗室, 濟南 250101;2. 山東英才學院, 濟南 250104)

大鼠心臟自發(fā)性原發(fā)性腫瘤罕見，心臟的自發(fā)性原發(fā)性腫瘤包括心房間皮瘤、心臟副神經節(jié)瘤、心內膜神經鞘瘤和心壁內神經鞘瘤等[1-3]。海綿狀血管瘤也是大鼠心臟自發(fā)性原發(fā)性腫瘤的一種類型，但對于大鼠心臟自發(fā)性原發(fā)性腫瘤中的海綿狀血管瘤的文獻報道極為罕見。本文以空白對照組大鼠(試驗周期為26周)出現的一例自發(fā)性心臟海綿狀血管瘤為研究對象, 通過肉眼形態(tài)觀察、HE染色及血管內皮細胞CD31陽性標記物的免疫組織化學染色方法, 對該病例進行病理形態(tài)學的初步探討。

1 動物來源與飼養(yǎng)環(huán)境

6～8周齡SPF級SD大鼠160只，雌雄各半，購自北京維通利華實驗動物有限公司[SCXK(京)2012-0001]。動物飼養(yǎng)于本中心SPF級動物房大鼠飼養(yǎng)間[SYXK(魯)2014-0008]，分4組進行為期26周的灌胃重復給藥毒性試驗。

2 患病動物概況

該患病動物為給藥26周結束后的空白對照組(雌雄各10)雄性大鼠。肉眼觀察，該動物心臟腫大，檢查體表皮膚無破損，眼、耳、鼻、口、外陰部等無出血或分泌物，肛周無排泄物附著。大鼠經剖檢后對心臟組織進行病理學和免疫組織化學觀察。

3 肉眼形態(tài)學觀察

剖檢見病變位于室間隔，與心壁間界限不清晰，呈海綿樣結構，大小約1.5 cm×0.8 cm×0.5 cm，切面呈蜂窩狀(圖1箭頭所示)。

4 組織病理學檢查

顯微鏡下, 觀察到心肌組織間含海綿狀血管瘤成分, 主要由邊界不清、擴張、充血的血管構成, 血管腔大小不等, 血管腔內有許多紅細胞, 管壁常較薄,內襯扁平的內皮細胞, 內皮細胞未見異型性(圖2)。

5 CD31免疫組織化學

圖 1 心臟的肉眼形態(tài)學觀察

5.1 試劑

SP-0023 HistostainTM-Plus Kits免疫組織化學試劑盒，規(guī)格: 18 mL，批號: AG08164417，Rabbit Anti-CD31單抗、DAB染色試劑盒，均由北京博奧森生物技術有限公司提供。

圖 2 心臟海綿狀血管瘤的病理組織學觀察

5.2 方法

CD31免疫組織化學染色: (1)石蠟切片, 常規(guī)脫蠟至水; (2)蒸餾水沖洗, PBS浸泡5 min; (3) 抗原修復: 將切片插到玻璃切片架上, 倒入0.01 mol/L的檸檬酸鈉緩沖液，微波爐中火加熱3 min至沸騰后，靜置5 min, 再加熱3 min至沸騰, 自然冷卻至室溫，PBS漂洗3次，每次2 min; (4) 3%去離子水孵育15～20 min; (5)添加試劑A室溫孵育15～20 min，傾去，勿洗; (6)添加適當比例稀釋的一抗，4 ℃過夜; (7)PBS沖洗，3 min×3次;(8)添加試劑B, 室溫孵育15～20 min; (9)PBS沖洗,3 min×3次; (10)添加劑C, 室溫孵育15～20 min;(11) PBS沖洗，3 min×3次; (12)顯色劑顯色。(13)自來水充分沖洗; (14)復染：蘇木素輕度復染1 min，鹽酸酒精分化，自來水藍化5～10 min;(15)高梯度系列酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片，鏡檢。

5.3 結果

血管內皮細胞CD31的免疫組織化學染色結果顯示，低倍鏡下(圖3A)，心肌間含海綿狀血管瘤成分，血管腔大小不等，呈海綿狀改變，血管腔內有許多紅細胞; 高倍鏡下(圖3B)，毛細血管管壁較薄，管腔擴大，管腔內充滿紅細胞，血管內皮細胞扁平，陽性染色，呈棕褐色。

6 討論

在大鼠中，大多數原發(fā)性腫瘤通常為低分化的間充質腫瘤，由梭形細胞組成，這些梭形細胞腫瘤通常被認為是神經鞘瘤，這一觀點已被S100蛋白免疫細胞化學染色陽性支持[4,5]。血管瘤也是大鼠心臟自發(fā)性原發(fā)性腫瘤的一種類型，但人們對于大鼠心臟原發(fā)性腫瘤中的血管瘤的報道極為罕見。對大鼠來說，血管瘤最常見于脾臟、肝臟和皮下組織[6]。血管瘤是相對邊界清楚的血管腫瘤，其特征是大小不一的血管輪廓，內襯單層均勻、分化良好的內皮細胞，其特征類似于正常的血管內皮?；|通常很少[7]。本病例鏡下觀察心肌間由大小不一的血管輪廓組成，血管內襯單層均勻、分化良好的內皮細胞，這與大鼠血管瘤的診斷標準相一致。

圖 3 心臟海綿狀血管瘤的免疫組織化學染色

與大鼠相比，人類心臟血管瘤報道的文獻資料相對較多，但是對于人類來說，心臟血管瘤也是十分罕見的原發(fā)性良性腫瘤，占心臟腫瘤的0.8%[8]。據谷伯起[9]和Basso等[8]統計，過去國外有文獻報告只占0.8%～2.8%。病理組織學上主要有兩種：毛細血管瘤和海綿狀血管瘤。毛細血管瘤鏡下主要為大量新生的毛細血管，新生的毛細血管內皮細胞增生肥胖，管腔大小不等，管腔內幾乎沒有紅細胞; 而海綿狀血管瘤主要為增生的毛細血管是薄壁，管腔擴大，大小不等，管腔內充滿紅細胞，呈海綿狀改變[10]。海綿狀血管瘤是一種比較少見的血管源性腫瘤，機體任何部位都可發(fā)生，常見于皮膚、肌肉，而發(fā)生在心臟的海綿狀血管瘤極為罕見。本病例剖檢肉眼觀察血管瘤體積小、呈海綿樣結構，免疫組織化學染色顯示血管內皮細胞上CD31分子為陽性; 鏡下觀察瘤體由不規(guī)則形的血竇構成，瘤與心壁間界限不清晰，瘤體中心部的血管竇纖維間隔可見散在的心肌細胞，高倍鏡下未見毛細血管內皮細胞增生肥胖，而本病例血管管腔擴張，管腔內充滿紅細胞，呈海綿狀改變。因此，結合上述肉眼形態(tài)學觀察、組織病理學及免疫組織化學血管內皮細胞CD31分子染為陽性的方法，本病例可診斷為心臟血管瘤類型中的海綿狀血管瘤。