王曉寧，孫 巖，盧偉偉，劉 冰

(吉林大學第一醫(yī)院 輸血科，吉林 長春130021)

1 案例分析

患者，男，65歲，因血友病貧血入院，常規(guī)進行輸血檢測時發(fā)現(xiàn)患者血型：O型 RhD陽性、不規(guī)則抗體篩查陽性。進一步鑒定抗體，并進行交叉配血試驗，滿足患者輸血需求。

1.1 試劑與儀器

抗-A、抗-B試劑(批號 20170509、20190510)(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-N 試劑(批號20160811、20180810) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-M試劑(批號20161221、20181220) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-D(IgM)試劑(批號20161811、20181114) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-C 試劑(批號20163003、20181103) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-c 試劑(批號20163103、20181106) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-E 試劑(批號20163202、20181106) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-e 試劑(批號20163303、20181227) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、ABO 反定型試劑 (批號20185313、20180712) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、篩選細胞(批號20187014、20180717) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、譜細胞 (Saquin)(批號8000248526、20180705)、譜細胞 (REAGENS)(批號731811、20180716)、抗-Dia (批號8000238598、8000232510)(上海血液中心自制) 、抗球蛋白試劑(批號20165002、20180725) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-IgG(批號20175102、20190629) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、抗-C3d(批號20165201、20180727) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、聚凝胺試劑 (批號20167507、20181208) (上海血液生物醫(yī)藥有限公司)、細胞洗滌離心機(日本久保田)、水浴箱。

1.2 方法抗體

血型鑒定均采用試管法，鑒定采用試管法、抗人球蛋白法，交叉配血采用鹽水、聚凝胺、抗人球蛋白法互相驗證[1]。

2 結果

2.1 血型鑒定

ABO血型、M、N型血清學測定，結果見表1，Rh五分型、Dia 、Dib血清學測定結果見表2。

表1 ABO血型血清學測定結果

表2 Rh五分型、Dia血清學測定結果

綜合表1、表2血清學結果分析，患者血型為：O型、“CCDee”、“MM”、“Di(a-b-)”。

2.2 抗體篩查及鑒定結果

2.2.1不規(guī)則抗體篩選試驗

試管法進行不規(guī)則抗體篩選試驗，結果見表3。

表3 不規(guī)則抗體篩選結果

在鹽水介質中，通過抗篩譜分析發(fā)現(xiàn)抗-N抗體，進一步進行譜細胞鑒別，鑒定其抗體的特異性。

2.2.2譜細胞鑒定試驗

應用匈牙利進口譜細胞(REAGENS)(批號731811、20180716)鑒別其抗體的特異性，結果見表4(患者自身IS、抗人球卡、-2ME卡法中均陰性)。

表4 譜細胞鑒定結果

進口譜細胞與患者血清反應,反應格局見表4。結果表明存在抗-E 抗體(IgG),抗-N抗體(IgM)，抗-Dia抗體(IgM)。

2.2.3譜細胞排除抗體

由于抗-E抗體經常聯(lián)合抗-c抗體[2]，因此為保證患者輸血安全，進一步排除了抗-c抗體。

2.3 交叉配血結果

篩選O型，“CCDee”、“MM”、“Di(a-b-)”獻血員，與患者標本進行交叉配血。采用鹽水介質、聚凝胺、抗人球蛋白卡法三種方法配血，結果相合。

3 討論

本次案例是一例罕見的三抗聯(lián)合的配血案例，患者先后產生了抗-E抗體、抗-N抗體、抗-Dia抗體。抗-E抗體是Rh血型系統(tǒng)中較為常見的血型，根據(jù)國內相關報告，RhE抗原陰性人群比例約為46%[3]，產生輸血反應的案例也有很多報道。隨著對抗體篩查和Rh同型輸注問題的重視，這類問題在逐漸減少。

本案例中單克隆檢出抗-N，抗-N同抗-M比起來相對稀少[4，5]，通過2-ME破壞發(fā)現(xiàn)為IgM的抗-N,大多數(shù)抗-N是天然抗體IgM型,在25℃以上沒有活性，37℃凝集消失，因此在抗人球介質中IgM的抗-N一般不會發(fā)生明顯的配血不合現(xiàn)象。但國內也有IgM型抗-N抗體導致交叉配血的案例分析[6]。因此單一使用抗人球法配血，將會漏檢部分鹽水，因此針對鹽水抗篩陽性的配血案例，要選用多種介質進行交叉配血試驗，保證試驗的準確性，避免因輸血而產生相關抗體，提高輸血安全。

根據(jù) Layrisse等的描述Dia是1955年在委內瑞拉的一個家系中發(fā)現(xiàn)[7]。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)這一血型和南美印第安人關系密切，而在歐洲血統(tǒng)的人群中罕見[7，8]。1967年Thompson等報道了有兩例可檢測其對偶抗原Dib的抗體[9]。根據(jù)Dia的分布及頻率大量研究發(fā)現(xiàn)，它可以作為人類學的標記。Dia幾乎是蒙古人種中獨有的，而在那些罕見的例外中,往往難以排除蒙古血統(tǒng)祖先的存在。在東南亞人群中，Dia的頻率從2%-12%不等[10]，中國約為5%[11]，日本人中的頻率比中國人群稍高約為10%[12]。因此在獻血員中篩選Dia (-)的血并不困難，在12袋O型獻血隊員中篩選“CCDee/MM”、Dia (-)的紅細胞懸液1袋，應用鹽水、聚凝胺、抗人球卡法三種配血方式配血，主側、次側均無凝集、無溶血，配血相合。3天后，患者再次提出輸血要求，復查鹽水抗篩：凝集減弱為1+，認為為患者選取的“CCDee/MM”、Dia (-)血液，有很好的輸注效果。

綜上所述，在抗體篩選和交叉配血時，不能單一依靠一種方法，不同的方法對不同類型的抗體的敏感度不同，可能漏檢抗體或造成假陰性結果。